1、调肝肾、祛痰瘀治法提前干预对 SHR 血压及血管活性物质的影响?780?中国中医药信息杂志 2004 年 9 月第 11 卷第 9 期调肝肾,祛痰瘀治法提前干预对 SHR 血压及血管活性物质的影响卢焯明,潘毅,梁颖瑜.,严灿,王剑(1.广州市中医院,广东广州 510130;2.广州中医药大学 ,广东广州 510405;3.广东药学院,广东广州 510130)摘要:目的探讨调肝肾,祛痰瘀治法方药提前干预对自发性高血压大鼠 (SHR)的高血压发展以及对多种血管活性物质的作用.方法采用尾套式大鼠血压计动态观察 SHR9-12 周龄时的血压变化,采用放射免疫法测定大鼠血浆内皮素(ET)和降钙素基因相关
2、肽 (CGRP)含量,采用硝酸还原酶比色法测定大鼠血浆一氧化氮(NO).结果经中药提前干预,SHR9-12 周龄的血压明显低于空白组,而不同给药时段之间无显着性差异.各给药组的 NO 水平均显着高于空白组,而全程给药组 ET/NO 比值则显着低于空白组.结论调肝肾,祛痰瘀治法方药提前干预,能提高H0 水平,改善内皮分泌舒缩因子的功能,从而延缓 SHR 早期的高血压发展.关键词:调肝肾;祛痰瘀;治未病;自发性高血压大鼠;血管活性物质中图分类号:R289.11 文献标识码:A 文章编号:10055304(2004)09078003m 嘲 ofn 瑚曲嗍 ntbyl1.蛐 gtheF.mcti 蚰
3、ofLiverandand舶锄 I 岫 andBloodSills.玎螂呻 yOkSI.sBio!PI 蚰 rea 皿 dVmmesl 曙 I 的嚣 LUZhuo-ming.,PANYi,LIANGYingyu,etalfJ.GuangzhouHospitalofTCM,Guangzhou510130China:2.GuangzhouUniversityofTCM,Guangzhou510405,China3.GuangdongPharmCollege,Guangzhou510130,China)AIBtat:ObjwToobservetheinfluenceofpreventivetreat
4、mentbyregulatingthefunctionofHverandkidneyandremovingsputumandbloodstasistherapy(RR-Therapy)onthedevelopmentofSHRhypertensionandseveralvasoactivesubstances.MethodThebloodpressuresofratsin9to12weeksoldweremeasuredwithnowoundsphygmomanometer.TheplasmaendothelinIET)andcalcitoningene-relatedpeptideICGRP
5、)inratsweredetectedbyradioimmunityanalysis.Theplasmanitricoxide(NO)wasdetectedbynitratereductasecolorimetricmethod.RemitAfterpreventivetreatedwithdecoctionmadeaccordingRR-Therapy,thevaluesofbloodpressureofratsin9to12weeksoldwerelowerthanthoseofnodosagegroupsignificantly.Therewasnosignificantdifferen
6、cein3administrationgroups.Comparedwithno-dosagegroup,thecontentsofplasmaNOineachadministrationgroupwerehighersignificantly.TheET/NOofratsinS-wholegroupwaslowerthannodosagegroupsignificantly.C 啊 MhlThepreventivetreatmentwiththedecoctionmadeaccordingRR-TherapycandepressthedevelopmentofSHRhypertensioni
7、nearlystagebyup-regulatingthecontentofplasmaNOandamelioratingendothelialdysfunction.K 呵 words:regulatingthefunctionofliverandkidney;removingsputumandbloodstasis:preventivetreatment;SHR:vasoactivesubstances本研究通过对自发性高血压大鼠(SHR)于胚胎期和(或)出生后发育期给予调肝肾,祛痰瘀中药复方,随之检测其血压以及与血管舒缩关系密切的活性物质内皮素(ET),一氧化氮(NO),降钙素基因相关肽
8、(CGRP)的水平,进而探讨调肝肾,祛痰瘀治法提前干预对 SHR 高血压的影响及其血管活性机制.1 材料与方法1.1 实验动物亲代 SHR 由上海市高血压研究所提供,雄性 l6 只,体重基金项目:广州中医药大学总体规划项目(GH00131)(29025)g,雌性 32 只,体重(17535)g. 亲代 WKY 大鼠由第一军医大学实验动物中心提供,雄性 4 只,体重(30015)g,雌性 8 只,体重(200 15)g.L2 分组及繁育SHR 按体重及雄,雌 1:2 的比例随机分为 4 组,分别为孕期给药组(A 组), 出生后给药组 (B 组),全程给药组(C 组),空白对照组(D 组), 另有
9、 WKY 大鼠正常对照组(E 组)1 组,共 5组.SHR 各组的血压及体重均有可比性.同笼配对繁育,每笼 1 雄 2 雌.1.3 药物及给药方法调肝肾,祛痰瘀中药复方组成:熟地黄 25g,龟甲 30g,2004 年 9 月第 11 卷第 9 期中国中医药信息杂志?781?丹参 15g,三七 5g,钩藤 15g,瓜萎 12g.所用中药均由广州中医药大学第一附属医院中药房提供.浸泡后文火煎煮并过滤成约 300mL 的药液(其中龟甲先煎 30rain,钩藤后下煎煮 5rain),复渣再煎 1 次,两次滤液合并后再温水浴制成 100mL 浓缩液(相当于含原药材 1.02g/mE).孕期给药组和全程给
10、药组在雌雄同笼之日起开始给药,根据“ 实验动物与人的体表面积比“ 折算出每日等效剂量 ,将中药混入少量日常饮用水中供其饮用.其余 3 组以煎煮中药用水制成的冷开水(简称冷开水)混入日常饮用水中.子鼠出生后,孕期给药组立即停止给药,改为给冷开水;全程给药组通过将中药混入饮用水中供哺乳母鼠饮用对子鼠间接给药,直至离乳;出生后给药组此时开始给药,方法同上;空白对照组及正常对照组给予冷开水.子鼠离乳后,全程给药组及出生后给药组子鼠灌胃给中药直至 12 周龄,每日给药 1 次,每周随体重变化调整给药量.其余 3 组子鼠均灌服等量冷开水.1.4 试剂及仪器ET 及 CGRP 放免试剂盒(解放军总医院),N
11、0 酶法测定试剂盒(南京建成生物技术研究所),其它试剂均为国产分析纯.RBP 一 1 无创性大鼠血压计,水提纯系统,低温离心机,电热恒温水浴箱,酶标检测仪,Y 计数仪等.1.5 血压及心率测定在 9 周龄子鼠中,每组随机选取 6 雄 6 雌(sHR 各组的体表 1 各组 912 周龄时的血压变化(Is,n=12,mmHg)重差异无显着性).以 4O给予大鼠预热 15min,固定大鼠 ,待其平静后测定尾动脉收缩压以及心率,每鼠测量 3 次,取均值.自 9 周龄起每周测量 1 次,直至 12 周龄.1.6ET,CGRP 及 N0 测定12 周龄子鼠快速断头取血,注入预冷的含 10%EDTA 二钠和
12、抑肽酶的试管中,摇匀.4,3000r/min 离心 10min,分离血浆,-40 保存.ET 及 CGRP 测定采用放射免疫非平衡法,具体方法按试剂盒说明书操作.N0 测定采用硝酸还原酶比色法,按试剂盒说明书操作:在玻璃试管内加待测样品血浆 ,每管 0.1mL,空白管加双蒸水 0.1mL,标准管加 100mol/LKNO 溶液 0.1mL.各管均加入 1 号缓冲液及 2 号底物溶液各 0.2mL,混匀,37恒温水浴 60min.加入 3 号及 4 号反应促进剂各 0.2mL,旋涡混匀 30s,室温静置 10min,4000r/min 离心 10min,取上清.另管加上清 0.5mL,显色剂 0
13、.6mL,混匀,室温静置 10min 后显色.每个标本等量加样于酶标板上.酶标仪用双蒸水调零,在 550n测定各管吸光度值,按公式 N0(1amol/L)=(样品管吸光度一空白管吸光度)/(标准管吸光度一空白管吸光度)100mol/L 算出 N0值,再算出 ET/NO 比值.1.7 统计分析数据以 I+s 表示,进行组间方差分析 ,自身前后 t 检验及相关分析.2 结果(见表 1表 3)注:与 D 组比较,#尸0.05,#尸0.01;与 E 组比较.尸0.05,料尸0.01;与自身 9 周龄时比较,/xPO.05,/x/xPO.01(下同)表 2 各组 912 周龄时的心率变化(Is,n=12
14、,bpm)压病合并左室肥厚,并进行了临床与实验研究 It-47.结果显组别 9 周龄 lO 周龄 11 周龄 12 周龄示,在有效逆转左室肥厚的同时,亦能在一定程度上降低血压,A 组 405.504-31.85413.584-19.60410.O832.07?403.58+26.22 其机制与调节神经,体液因素,改善血液流变学等有关.本B 组 409.33+26.93417.91+34.71408.9132.27?419.91+28.88 研究在此基础上结合高血压病本身的病理特点,针对其基本C 组 411.41+25.52414.3352.40409.8326.72?402.66+47.86
15、病机“肝肾阴虚,肝阳上亢,挟痰挟瘀“拟定了调肝肾 ,祛D 组 419.83+36.36400.754-36.87419.5041.90424.7518.98 痰瘀治法及组方.方中熟地黄,龟甲,钩藤是调肝肾的要药,E 组 387.16+34.46402.83+24.12374.4134.93407.33+26.89 丹参,三七,瓜蒌三味共同起到祛痰瘀的效能.表 3 各组 12 周龄时的 ET,NO,C6RP 及 ET/NO(x-l-$,n=12/11)在中医“ 治未病“思想的指导下,笔者选定了遗传性高组别 ET(ng/)No(pmoI/L)CGRP(ng/)ET/NO 血压动物模型 SHR 的胚
16、胎期和(或)出生后发育期为给药时A 组 643.97+189.9129.4916.88197.68285.4031.22_+24.56 段.实验结果表明:调肝肾,祛痰瘀治法及组方提前干预,B 组 750.804-465.2828.36+10.77310.73281.5833.4130.21 能在一定程度上延缓SHR912 周龄的高血压发展.三个中C 组 545.854-210.4629.139.03192.33332.6622.0215.30“药组的血压上升趋势均随周龄增长而明显减缓.一个有趣的D 组 669.30+313.1617.46+4.57330.86_344.9442.764-25.
17、60 发现是:无论是孕期给药组,还是出生后给药组,抑或是综合E 组 695.364-284.3018.653.97269.69_+321.6339.60+22.74 了以上两个时段的全程给药组,中药延缓升压的疗效均无明3 讨论显差别.既往本课题组根据中医病机理论,历代文献论述以及临研究结果显示,此复方对心率无明显影响.由于平均动床体会,提出以活血祛痰,平肝潜阳的治法及组方治疗高血脉压=心排血量总外周阻力,故目前结果提示其延缓升压机?782?中国中医药信息杂志 2004 年 9 月第 11 卷第 9 期保定,亳州,定州三产地长梗薤白提取物对高脂血症家兔的脂质调节作用孙文娟,赵珉,刘洁,杨世杰(1
18、.重庆医科大学基础医学院,重庆 400016;2.吉林大学 ,吉林长春 13002I)摘要:目的研究三产地长梗薤白提取物(ANBE)降脂作用的差异方法利用家兔高脂血症模型,研究三产地 ANBE 的脂质调节作用.结果三产地 ANBE 能明显降低高脂血症家兔 TCH,TF和 LOL-C 含量 ,显着升高 HDL-C含量和 HDL/TCH 比值,同时,能显着降低高脂血症家兔的过氧化脂质(LPO).结论三产地 ANBE 都具有较强的纠正高脂蛋白血症脂蛋白一胆固醇代谢素乱和抗脂质过氧化作用,此作用产地间差别不大.关键词:长梗薤白提取物:脂蛋白一胆固醇代谢;过氧化脂质; 高脂血症;家兔中图分类号:R285
19、.5 文献标识码:A 文章编号:10055304(2004)09.0782.02llaetofANBEllFmA 姻 Oils.哪 lLipidand 啪 ofHypeRabbitsSUNWen-juan,ZHAOMin,LIUJie,etalrJ,BasicalMedicalCollegeofChongqingUniversityofMedicalSciences,Chongqing400016,China;2.JilinUniversity,Changchun130021,ChinaJAlamt:oIbjEffectsofANBEfromthreeareas(Baoding,Bozhoua
20、ndDingzhou)onregulationofserumallipid.MethedRabbitsarefedwithhighcholesteroldiet,studyANBEfromthreeareasonregulationofserumallipid.RenllBItdemonstratedthatthelevelsofTCH,TG,LDL-CandLPOwereincreased.ANBEatconcentrationsof0.6g/kgcanreduceserumalTC,TGandLPOcontentsandincreaseHDLCinrabbitsfedwithhighcho
21、lesteroldiet.CanelThisstudyindicatedthateffectsofANBEfromthreeareasonregulationofserumallipidareobvious,andtheeffectsofANBEfromdifferentareashavenoobviousirnparities.K 町,I 时山:ANBE;lipidproteiniccholesterolmetabolism;lipidicperoxidationbaghcholosterolemia:rabbits长梗薤白(A,NERINIFOLIUMBAK,缩写为 ANB)为民间广泛食用
22、,亦作药用.本草纲目记载 n,它具有瘀血可散,胸痹刺痛可愈,中恶卒死可救等作用.长梗薤白提取物(ANBE)具有很强的降血脂及抗动脉粥样硬化作用,其中的有效成分甲基烯丙基硫,甲基烯丙基三硫和其他含硫化合物为其降脂及抗动脉粥样硬化的基础物质3-4,因此,科学开发薤白作制并非通过减慢心率,减低心排血量,而可能主要影响到血管阻力.ET,N0 及 CGRP 均直接影响血管阻力 :ET(ET 一 1)是体内作用最强的缩血管物质,N0 则是强烈的血管舒张因子 .二者均由血管内皮细胞分泌,其效应相互拮抗,ET/NO 比值一定程度上反映了内皮的功能5.CGRP 则是体内最强的神经源性舒血管因子 J.然而,关于它
23、们在高血压时的水平各家报道并不完全一致.本研究发现:12 周龄 SHR 的循环 ET 与 WKY大鼠处在同一水平,与部分研究者的结果一致83,但其血管切应力增高应能引起 N0 代偿的机制却受损.调肝肾,祛痰瘀提前干预,能明显上调 12 周龄 SHR 的血浆 N0 水平.是 N0 生成增多还是代谢减缓有待进一步研究.ET/N0 比值提示,提前干预在一定程度上改善了 SHR 内皮分泌舒缩因子的功能失调,并与延缓血压上升密切相关.对 CGRP 的影响未发现有统计学意义,有必要扩大样本量.参考文献:1严灿,高敏 ,邓中炎,等.高血压病左心室肥厚患者血浆 P 物质水平的变化及活血祛痰治法的影响J.中国中
24、西医结合杂志,1998,18(6):336338.2潘毅,邓中炎 ,严灿.心肌康逆转高血压左室肥厚的临床研究J.中国中医药科技,2001.8(4):213-214.3严灿,王剑 ,潘毅,等.中药复方心肌康对自发性高血压大鼠肥厚左室心功能的影响J.医学研究通讯,2000,29(7):1316.4严灿,王剑 ,邓中炎,等,平肝益气,活血祛痰法逆转自发性高血压大鼠左心室重构的实验研究J.中国中医药科技,2001,8(Supple):485O.5BrovkovychV,DobruckiLW,BrovkovychS,eta1.Nitricoxidereleasefromnormalanddysfunct
25、ionalendotheliumJ,JPhysiolPharmacol,1999,5O(4):575-86.6VapaataloH,MervaalaE,Nurminen 札.RoleofendotheliumandnitricoxideinexperimentalhypertensionJ.PhysiolRes,2000,49(1):11O.7王望,王宪 .降钙素基因相关肽超家族与高血压J.心血管病学进展,2000,21(5);257-262.8项美香,吕俊升 .自发性高血压大鼠血液及心血管组织内皮素的测定及意义J.浙江医科大学,1998,27(4):l45147.(收稿日期:2003-11-22)
