1、第七章 细菌感染的检查方法 与防治原则,要点: 1.了解致病菌的检查程序 2.掌握标本的采集和送检原则,2,实验室诊断主要内容: 直接查细菌及其成分（抗原、产物、核酸）细菌学诊断用已知的抗体检测标本中未知的抗原-血清学鉴定(serological identification) 间接查患者血清中特异性抗体用已知的抗原检测标本中未知的抗体-血清学诊断(serological diagnosis),第一节 细菌感染的实验室诊断,3,细菌感染的检验程序,无菌采集,采集适当标本,早期，用抗生素以前,采集双份血清,运送注意保存，尽快送检,一、标本的采集和运送原则,做好标记,二、细菌的检测,1.形态结构检
2、查 2.分离培养鉴定 3.细菌抗原的检测 4.细菌核酸检测 5.生物芯片技术等其他检测,1.形态结构检查,一般程序： 标本涂片 固定 染色 镜检 （观察镜下特征：菌体形态、排列、染色性 及特殊结构等） 初步鉴定,2.细菌分离培养与鉴定,标本（或增菌后）接种,普通琼脂平板 血琼脂平板 选择培养基平板,培养特征：生长条件菌落特征溶血环特征等,生化试验,Sugar Fermentation H2S Test Citrate utilization,血清学鉴定用已知Ab检测未知的纯培养细菌Ag ，以确定细菌的种、型。,动物试验 分离、鉴定细菌，测定细菌毒力。,药敏试验,12,细菌分离培养与鉴定一般程序
3、,标本（或增菌后） 接种,普通琼脂平板 血琼脂平板 选择培养基平板,培养特征：生长条件菌落特征溶血环特征等,染色镜检：,根据形态特征初步鉴定,生化反应 ：如肠道杆菌的乳糖发酵试验,血清学鉴定：鉴定细菌的种、型,毒力鉴定,内、外毒素检测 动物试验：家兔、豚鼠等,药敏试验,纸片法：只可定性 试管法：可定量（测MBC、MIC） E-test： 可定量（只可测MIC）,3. 细菌抗原的检测,血清学鉴定用已知Ab检测未知的纯培养细菌Ag ，以确定细菌的种、型。,特点：特异性强敏感性高Ag的检出与病原菌的死活无关,抗原检测方法：沉淀反应 协同凝集试验 免疫荧光法 对流免疫电泳EIA, Western bl
4、otting,4.细菌核酸的检测核酸杂交PCR基因序列分析 5.生物芯片技术等,三、细菌感染的血清学诊断,用已知的细菌或其特异性抗原 去检测患者体液中有无相应抗体以及抗体效价的动态变化可作为感染性疾病的辅助诊断。主要适用于抗原性较强的细菌和病程较长的感染性疾病的诊断。,标本：血清和其他体液 标本要求:双份血清(早期；恢复期) 诊断：恢复期或一周后血清Ab效价比早期升高4倍及4倍以上 现症感染,凝集试验：肥达试验（ Widal test）-诊断伤寒、副伤寒外斐试验（Well-Felix）-诊断立克次体病中和试验：-诊断链球菌性风湿病 补体结合试验： -检测Q热柯克斯体 ELISA： -检测炭疽芽胞杆菌保护性抗体,血清学诊断常用方法：,20,致病菌的检验程序:,第二节 细菌感染的特异性预防(自学),一、人工主动免疫（一）疫苗死疫苗减毒活疫苗亚单位疫苗重组载体疫苗 基因工程疫苗核酸疫苗（二）类毒素,二、人工被动免疫抗毒素血清丙种球蛋白其他免疫制剂：IFN-，CSF等。,23,思考题,1.试述检测细菌的采集和送检原则？ 2.对已经分离出的细菌菌落，怎样从微生物学角度去进一步鉴定？ 3.名词解释： serological identification and diagnosis(血清学鉴定与诊断),
