1、 古钩藤醇提液镇痛抗炎药理论文:古钩藤醇提液镇痛抗炎药理作用的实验研究【摘要】 目的研究古钩藤醇提液的镇痛抗炎药理作用。方法采用小鼠热板法和扭体法镇痛实验,观察古钩藤醇提液的镇痛作用,观察小鼠腹腔毛细血管通透性和二甲苯至小鼠耳廓肿胀的影响,观察其抗炎作用。结果古钩藤醇提液具明显的镇痛作用,大剂量能降低毛细血管通透性,抑制由二甲苯所致的炎症反应,可减轻小鼠耳廓肿胀的作用。结论古钩藤醇提液有明显的镇痛和一定的抗炎作用。【关键词】 古钩藤; 镇痛抗炎; 药理作用古钩藤又名海上霸王、白叶藤、牛角藤、大暗消等等, 为萝藦科植物古钩藤 Cryptolepis buchananii Roem. et Sch
2、ult 的地上部分。多生于阳坡,攀援于其他树上,分布于广东、广西、云南、贵州等地,具有舒筋活络、消肿止痛、解毒等功效,用于治疗腰痛、腹痛、跌打损伤、骨折、痈疮、癣等疾病1 。目前,镇痛抗炎作用的药物多为西药,且副作用多,而中草药古钩藤民间使用也有这方面的作用,是值得研究、开发的镇痛抗炎药。前期我们已经做过古钩藤根、茎水煎液大、小剂量组镇痛抗炎药理作用的研究,证明水煎液具备一定的镇痛抗炎作用,或有这种作用的趋势,其镇痛抗炎作用不稳定2。本科研小组现在对古钩藤醇提液镇痛抗炎作用进行实验研究, 旨在对其进一步开发和临床应用提供一定的理论依据。1 材料1.1 动物小鼠,雌雄兼用,体质量(202)g,均
3、由广西中医学院实验动物中心提供,动物证号 1104,根据实验性质和性别分笼喂养,自由采食饮水。1.2 仪器台式离心机XZB-2B 型自控温度热板仪,山东省医学科学院设备供应维修站制造,设备号为:3-109-1-7-6;722 型光栅分光光度计,上海第三分析仪器厂,设备号为:3-109-4-4-93。1.3 药品与试剂 干燥古钩藤全草,采自广西中医学院药用植物园;硫酸罗通定注射液,广东省博罗先锋药业集团有限公司生产,批号 020902;醋酸地塞米松,天津药业集团新郑股份有限公司生产,批号 070823;醋酸, 上海试一化学试剂有限公司。伊文思蓝, 上海化学试剂公司进口分装, 批号 F-9800。
4、二甲苯,齐鲁石化公司研究院试剂公司;生理盐水, 济南永宁制药厂。1.4 制备古钩藤水煎剂 古钩藤全草 300 g,加 8 倍水浸泡 1 h,煎煮 40 min, 煎煮 2 次,合并药液过滤浓缩至 200 ml(1.00 g/m l),后再加同等剂量的浓度为 95%的酒精放置 24 h 后醇提,按所需要的剂量配成溶液大剂量为 30 g/kg,小剂量为 15 g/kg,以备用。2 方法和结果2.1 小鼠热板法镇痛实验3取雌性小鼠,放入(550.5)热板测痛仪中,以舔后足作为疼痛反应指标,预测小鼠药前痛阈值。以痛阈值小于 30 s 视为合格小鼠,将痛阈值合格的 40 只小鼠随机分为 4 组,每组 1
5、0 只。分别是古钩藤大剂量组,剂量为 30 g/kg;古钩藤小剂量组,剂量为 15 g/kg;阳性对照药罗通定组,剂量 30 mg/kg;生理盐水对照组,剂量为 20 ml/kg。灌胃给药两次,时间间隔为 4 h。末次给药后 30,60,90,120 min 分别测定痛阈值。在测定中,如 60 s 内无痛反应,应立即取出,并以60 s 计算。各给药组与对照组比较,统计数据以s 表示,统计方法用 t 检验法。结果见表 1。表 1 古钩藤醇提液对热板法致痛小鼠的镇痛作用(略)痛阈值提高百分率(%)=(药后痛阈值-药前痛阈值)/药前痛阈值100%。表 1 结果表明,古钩藤醇提液大剂量组在药后60,9
6、0,120 min 能明显提高小鼠痛阈值,而古钩藤醇提液小剂量组在药后 30,60,90,120 min 也能明显提高小鼠痛阈值,从本实验结果中可以看出古钩藤醇提液有镇痛作用。2.2 小鼠扭体法镇痛实验3取体质量 1822 g 健康小鼠 40 只,雌雄各半,随机分为 4 组,分组及给药方法同“2.1”项。末次给药后 30 min 腹腔注射 0. 6%冰醋酸 0. 2 ml /只,同时用秒表计时,记录小鼠 15 min 内出现的扭体次数。各给药组与对照组比较,统计数据以 s 表示,统计方法用 t 检验法。结果见表 2。表 2 古钩藤醇提液对冰醋酸致痛小鼠的镇痛作用(略)药物镇痛百分率(%)= (
7、对照组扭体次数- 给药组扭体次数) /对照组扭体次数100%。表 2 结果表明, 古钩藤醇提液大、小剂量组对冰醋酸致痛小鼠能显著减少小鼠的扭体次数,具有明显的镇痛作用。但从各剂量组的镇痛百分率来看,镇痛百分率提高不明显。2.3 小鼠二甲苯耳肿胀实验3取体质量 1822 g健康雄性小鼠 48 只,阳性对照组药物改地塞米松,剂量为4.5 mg/kg,其他分组与给药均同“2.1”项。第 8 天每只小鼠右耳廓前后均匀涂擦当日配制的二甲苯 0. 1 ml/只,致炎 15 min 后将小鼠脱颈椎处死,剪下小鼠左右耳,用打孔器(直径 6 mm)分别在左、右耳同一部位打下等大的圆形耳片,分别在电子天平上称重后
8、,计算耳肿胀度。各给药组与对照组比较,统计数据以s 表示,统计方法用 t 检验法。耳肿胀度= 右耳重量-左耳重量;肿胀抑制率(%)=(对照组肿胀度-给药组肿胀度)/对照组肿胀度100%。结果见表 3。表 3 古钩藤醇提液对小鼠耳廓肿胀的影响(略)表 3 结果表明, 古钩藤醇提液大剂量组能明显抑制由二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,而小剂量组对此作用则无明显抑制作用。从抑制率看,大剂量组具有一定抑制耳廓肿胀的趋势,而古钩藤根小剂量组的抑制率为最差。2.4 对小鼠毛细血管通透性影响的实验3取体质量 1822 g 健康小鼠 48 只,雌雄各半,分组及给药方法同“2.3”项。第 8 天,每只小鼠尾静脉注射 2
9、.5%伊文思蓝0. 1 ml /10g(体重),并同时腹腔注射 0. 6%冰醋酸 0. 2ml /只, 15 min 后用 6 ml 生理盐水腹腔注射,轻柔小鼠腹部,然后断头处死小鼠,剪开腹腔,用吸管吸取腹腔洗出液约 56 ml,3 000 r /min 离心 5 min,取上清液 3 ml 在 722 分光光度计 590 nm 处测定吸收度(OD 值) 。各给药组与对照组比较,统计数据以s 表示,统计方法用 t 检验法。结果见表 4。表 4 古钩藤醇提液对小鼠毛细血管通透性的影响(略)表 4 结果表明,古钩藤醇提液大剂量组能降低小鼠毛细血管通透性,减少腹腔液体的渗出,具有明显的抗炎作用。而古
10、钩藤小剂量组效果不明显。3 讨论上述实验结果显示,古钩藤醇提液大、小剂量组都具有一定的镇痛作用,并从中也看到其镇痛作用较好;而抗炎作用只在大剂量组存在,小剂量组抗炎作用不明显,但至少可以看出古钩藤醇提液或有这种作用的趋势,这点以后再做进一步的深入研究,其镇痛和抗炎作用机制有待进一步研究,以后在研究中应该对其进行药物提纯再做研究。古钩藤是瑶族人民民间长期使用的药材, 有舒筋活络、消肿止痛等功效,主要用于治疗腰腿痛、风湿痛、痛经、软组织扭伤等, 疗效显著,本实验结果与民间临床使用基本一致。本实验为古钩藤的进一步开发及临床应用提供了一定的理论依据。【 参考文献】1全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编,下册M.北京:人民卫生出版社,1976:1702张兴燊,周 芳,廖日葵,等.古钩滕镇痛抗炎药理作用的实验研究J时珍国医国药,2007,18(7):1603.3陈 奇,沈映君,刘青云,等.中药药理学实验,第1 版M.上海:上海科学技术出版社,2001:24.