1、肝肾阴虚证大鼠下丘脑单胺类神经递质的变化及中药对其调节作用?768?中国中医药信息杂志 2004 年 9 月第 11 卷第 9 期肝肾阴虚证大鼠下丘脑单胺类神经递质的变化及中药对其调节作用金培志,岳广欣(1.广州中医药大学第二附属医院,广东广州 510405;2.河南中医学院,河南郑州450000)摘要:目的探讨肝肾阴虚证大鼠下丘脑单胺类神经递质的变化及中药对其调节作用.方法以激怒法制造大鼠肝肾阴虚证模型,研究下丘脑单胺类神经递质的变化.结果肝肾阴虚证模型组大鼠下丘脑 NADA 及 DOPC,HVA 明显上升(PO.05),5-HT 明显下降(尸 O.05);递质间平衡关系失调.应用滋补肝肾方
2、药能够减轻这种激怒应激反应,滋补肝肾方药组各指标与模型组比较差异显着(PO.05),与正常组比较无显着差异,而柴胡疏肝散无明显作用.结论下丘脑一垂体一甲状腺轴下丘脑水平亢进可能是肝肾阴虚证发生的关键.关键词:肝肾阴虚证;下丘脑水平亢进;大鼠中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:10055304(2004)09076802a 瑚略_RltM 胡 dwlfla 一珊 m 哪碍 ofrmadhbySlowh 商 atIon蚰 theOmltof 珏 otjhal 硼血 M 伽伽衄 II 五眦 Trlmmlittrsandlt.咀 l|It0 巧黝 0f 岫JINPeizlIi,YUEG
3、uangxinrJ.TheSecondAffiliatedHospitalofGuangzh014UniversityofTCM,Guangzhou510405,China2.HenanColgeofTCM,ZhengzhOU450000,China)AbT-ct:ObjtlveToexplorechangwhicharatmodelwithYindifflencyofliverandkidenyinducedbyslowirritationonthecontentofhypothalamicmonomaniactransmittersandregulatoryeffectofherbs.Mh
4、odTostudychangeofvariousindexeswhicharatmodelwimYindiffiencyofliverrandkidneywasmadebywayfslowirritation.R 髑咂 hThemodelgroupishigherinthelewisofnorepinephrine,dopamine,3,4 一 dihydrophenylaamineandhomovamiUicacidfP0.05)andlowerinthelevelof5 一 hydroxytyptamine,compared 丽mthenirmalgroup.Thepreseription
5、fornourishingliverandkidneyhadtheregnlatingfunctionwhilethebypleuripowderfordredingliverrhasnt.CoJThekeytothequestionofyin?dilliencyofliverandkidneyisthehyperactivityoftheHypothalamusofthehypothalamus?-pituitary?-thypoidgland.Key:Yindifencyofliverrandkidney;hyperactivityofthehypothalamus:rat肝肾阴虚证是临床
6、上常见的复合证型,对于其本质的研肝散:柴胡,陈皮,香附,川芎,枳壳,白芍,甘草.上药究报道较多,都能从某-,J 面反映这一状态,但从整体上,本均由河南省药材公司提供,滋补肝肾方常规煎煮 3 次,滤渣,质上反映其内涵的研究报道很少.肝肾阴虚证临床表现为多浓缩至含原药材2.0g/mL.柴胡疏肝散经蒸馏,提取挥发油汗,喜凉怕热,消瘦,颧红,烦燥不安,多梦,肌肉震颤等,后,浓缩至含原药材 0.75g/mL,兑入挥发油.这与现代医学下丘脑一垂体一甲状腺轴功能紊乱有关.而其 1.3 主要试剂中下丘脑是神经和内分泌系统的高级整和中枢,起着“神经一去甲肾上腺素(NA),多巴胺(DA),3,4 二羟基苯乙酸内分
7、泌换能器“的作用.故我们从下丘脑方面探讨该证的本(DOPAC),5-羟吲哚醋酸(5 一 HI 从 ),高香草酸(HVA),5-羟色质.胺(5 一 HT)均为 Fluka 公司生产.1 实验材料 1.4 主要仪器1.1 动物 WATERS 一 6000A 衡流泵;BASLC 一 4c 电化学检测器: 氧化健康 sD 大鼠,雄性,体重(220+20)g,河南医科大学实验法,17.5V,20nA,0.3Hz:分相色谱柱:0DS,10H 无定型 C.固动物中心提供.饲养条件为 2028,每天黑暗 12h(19:定相,0.46 25;记录仪:YEW3066 型.007:O0),光照 12h(7:00-1
8、9:O0),普通饲料喂养.2 实验方法1.2 药品 2.1 分组及造摸滋补肝肾方:生地黄,熟地黄,北沙参,当归,麦冬,按随机数字法将大鼠分为空白对照组(A 组 ),肝肾阴虚川楝子,丹参,生麦芽,山药,山茱萸,牡丹皮等;柴胡疏模型组 (B 组), 滋补肝肾方治疗组(C 组),柴胡疏肝散治疗2004 年 9 月第 11 卷第 9 期中国中医药信息杂志?769?组(D 组 ),每组 8 只.除空白对照组外 ,其余各组大鼠均双后肢束缚,固定于盖网上,每 2 只一笼,引起明显激怒,表现为粗叫,扭打和撕咬.每日 1 次,首次应激20min,以后隔日增加lOmin,共 20d,对照组除不固定后肢外,余处理同
9、其他组.2.2 给药按人和大鼠体表面积系数换算方法计算.滋补肝肾方治疗组从第 1 天起以 20g/(kg?d)剂量灌服滋补肝肾方浓缩液:柴胡疏肝散治疗组以 7.5g/(kg?d)剂量灌服柴胡疏肝散:空白对照组和肝肾阴虚模型组灌服生理盐水,剂量为2.3 取材与样品制备于第 21,22 天 9:O011:O0 将动物处死取材,处死前间断给予铃声刺激 20min,作为新异刺激,为避免时差影响,把各组动物配组处死.大鼠处死后,迅速打开颅脑,分离出大脑,置沸腾的生理盐水中煮 5min,用小打孔器在大脑腹侧视交叉后,打孔取组织柱 23mm(即下丘脑),称重后,倒入小玻璃乳钵中,加入 0.1 高氯酸(含内标
10、 DHBA200ug/mL)0.5mL,研磨均匀,倒入 lL 小离心管中,14000r/min,离心 10min,取上清液,置一 60冰箱储存,待测.lOmE/(kg?d),共 20d.3 结果 (见表 1表 3)表 1 下丘脑单胺类递质及其代谢产物含量比较(Isn=8,2512,ng/g)注:与 A 组比较,APO.Ol;与 B 组比较,?尸0.Ol(下同)表 2 递质问平衡关系(In=8)表 3 递质与其代谢产物比值变化(_肚 n=8)4 讨论一般认为,应激状态下各种刺激通过传入神经通路进入大脑皮层边缘系统,通过交感一肾上腺髓质和下丘脑一垂体一肾上腺皮质系统使肾上腺皮质激素分泌增加,儿茶酚
11、胺,皮质酮水平升高,并抑制生长轴和生殖轴,以适应机体需要.当机体受到强烈刺激时,应激反应的主要神经内分泌改变为交感一肾上腺髓质系统和下丘脑一垂体一肾上腺皮质系统的强烈兴奋(中前期交感一肾上腺髓质系统兴奋为主,并伴有肾上腺皮质激素的增加,中期以后表现出肾上腺皮质激素分泌增多为主的适应性反应),多数应激反应的生理变化与外部表现皆与这两个系统的强烈兴奋有关 n.有资料表明,急性脑血管疾病应激状态下,血清 T,FT3,TSH 均下降,T4,FT4 无显着变化【2,而在束缚应激时,大鼠血浆中 T.,T 也明显下降,注入 TRH后血浆 T,T 浓度恢复正常.有实验显示,长期激怒应激状态下,血清 FT.,F
12、T,TSH 均下降,rT3 升高,肝细胞核 T3Rmax增高,表明应激状态下存在着 HPT 轴的紊乱【5.提示各种环境,心理应激不仅影响下丘脑肾上腺系统(船 A),而且也影响下丘脑甲状腺腺系统(职 T).一般在急性应激时,NA 影响 TRH,TSH 的分泌,使 TSH,T,L 升高以满足机体需要;当在慢性应激情况下,如长期激怒,饥饿,精神压抑等,中枢多巴胺通路被激活,使下丘脑 TRH 含量升高,而血清,垂体 TSH 下降怕.而另有实验发现 ,长期应激状态下,低水平 FL,FT 与低水平 TSH 同时存在,下丘脑 TRH含量升高,这说明长期应激使玎 PT 系统出现甲状腺水平部分抑制的现象.本次实
13、验中,长期激怒应激大鼠下丘脑 NA,DA 及其代谢产物 DOPC,HVA 含量升高,5-HT 及其代谢产物5 一 HI 从含量下降,5-HT/NA,5-HT/DA 比值明显降低,下丘脑NA,DA 神经元机能偏高,5-HT 神经元机能下降.NA 神经元与 5-HT 神经元有协同作用也有拮抗作用,总的说来,5 一rr 对中枢以抑制为主,NA 则以兴奋为主,二者相辅相成.可见,由于各类神经元的相对平衡关系失调,长期激怒应激大鼠下丘脑正常机能遭到破坏,出现相对亢进的状态.在运用滋补肝肾方药后,大鼠皮毛光泽,活动能力增强,NA,DA,5 一 HT 正常或接近正常,说明运用滋补肝肾方药对下丘脑机能的紊乱有
14、调整作用,亦说明下丘脑水平亢进可能是肝肾阴虚证本质之.参考文献:1金回铭.病理生理学 砌.北京:人民卫生出版社,1998.8.2刘俊艳.急性脑血管患者下丘脑一垂体一甲状腺轴的功能改变J.中华神经精神科杂志,1998,26(1):31-34.3彭康.乌龙丹治疗脑梗塞及对下丘脑一垂体一甲状腺轴的影响J.中国中西医结合杂志,1998,18(3):135.4刘振秀.促甲状腺释放激素对抗束缚应激的作用J.中国医学科学院,1992,14(2):u8.5樊蔚虹,岳广欣 ,任小巧,等.肝肾阴虚证大鼠下丘脑一垂体一甲状腺轴的变化及中药对其调节作用J.中国中医药信息杂志,2001,8(10):2l 一 22.【6陈家旭 .中医肝病本质现代研究进展【J.中国中医基础医学杂志,1998.4(7):58-61.(收稿日期:200305-12)
