1、血细胞手工检验血小板检验,临床检验基础,抗凝血系统,纤溶系统,凝血系统,抗凝,凝血,纤溶,第三节 血小板检查,概述血小板（platelet）是由骨髓中成熟的巨核细胞的胞质分割而生成。其生成受血小板生成素（thrombopoietin，TPO）的调节。血小板具有维持血管内皮完整性的功能、聚集、释放、促凝和血块收缩功能。,一、血小板计数,血小板计数（platelet count, PLT）是测定全血中血小板的浓度，是止血凝血检查最常见的试验之一。,血小板计数的适应证为： 不明原因的出血。 排除出血性疾病。 化疗和放疗病人的监测。 疑为骨髓造血系统疾病。 疑为血小板生成减少、血小板破坏增加、血小板消
2、耗过多或反应性血小板增多。,血小板计数检测原理,1血细胞分析仪计数法 ：简便、快速、重复性好，准确性高；可同时测定血小板、MPV及PDW等多个指标已广泛用于临床。但不能完全排除非血小板有形成分的干扰。 其异常结果仍需镜检复核。,方法学评价,2.普通光学显微镜直接计数法：原理 血液(20l)经稀释液(0.38ml)稀释和破坏红细胞后，充入血细胞计数板内，在显微镜下计数一定范围内(中央大方格内的中央及四角共5个中方格)的血小板数量，经换算求出每升血液中的血小板数量。参考值：（100300）109/L,2.普通光学显微镜直接计数法：优质的稀释液应同时是：1）有效地阻止凝血；2）很快地固定血小板，防止
3、血小板聚集和变形；3）溶血稀释液要求红细胞破坏完全；4）组成简单、容易保存、不长细菌。,2.普通光学显微镜直接计数法：稀释液,草酸铵 ：对红细胞破坏力强，血小板形态清楚。为常规计数方法，草酸铵为首选稀释液。,复方尿素：尿素可溶解红细胞、甲醛可固定血小板和防腐，稀释后血小板胀大易辨认 尿素容易分解，试剂容易失效。尿素不能完全破坏红细胞 。,不破坏红细胞稀释法：复方碘稀释液。红细胞未破坏，试剂 易长菌，干扰计数，已被淘汰 。,4.流式细胞仪法：特异、准确、但需特殊仪器和试剂。是目前血小板计数参考方法。,3.相差显微镜直接计数法： 准确性高，血小板易于识别，并可于照相后核对计数结果，是手工血小板计数
4、的参考方法。但由于所用仪器昂贵，临床上较少选用。,质量保证,检测前,采血 抗凝剂 储存时间,检测中,器 材 充池前 摇动血小板悬液2min或200次以上 充 池 充池后 静置15min 采血后1h内完成计数 计 数 光线 非血小板 病理干扰,检测后,核准血小板计数的方法：,用同1份血标本制备良好的血涂片，观察血小板数量、形态和分布情况，进行核对（正常可见815个/油镜视野、无大量大型血小板；无异常增多的红、白细胞碎片）。,用血小板计数的参考方法核对计数结果。,每份标本最好做2次计数，若2次计数误差小于10%，取其均值报告；若计数误差大于10%，应做第3次计数，取2次相近结果的均值报告。,生理性
5、改变 每天可有6%10%的变化。,临床意义,增多见于：午后、冬季、高原居民、月经后、妊娠中晚期运动、饱餐后静脉血。,减少见于：早晨、春季、平原居民、月经前、分娩后、休息后、毛细血管血。,病理性变化 减少与增多,血小板减少：血小板低于100109/L时为血小板减少（thrombocytopenia），为临床上出血主要原因之一。,当血小板低于（2050）109/L时，可引起创伤出血或手术后出血；血小板低于20109/L时有较严重出血。,输注血小板的指征：血小板低于20109/L，有出血难止症状。,病理性血小板减少的原因及意义,血小板增多：血小板超过400109/L时为血小板增多（thrombocy
6、tosis），血小板大于1000109/L常有血栓形成的危险。在原因未明的血小板增多的病人中，约有50%为恶性疾病。,病理性血小板增多的原因及意义,二、血小板形态检查（一）正常血小板形态 正常静息状态下，血小板为双面微凸的圆盘形，直径为1.53m、平均体积为7.2fl的非细胞结构成分。 染色后镜下可呈散在或成簇分布，圆形、椭圆或不规则。胞质呈淡蓝色或淡红，内含较多的细小紫红色颗粒。血涂片上，为红细胞数的1/301/20，通常每个油镜视野可见725个，分散或35成群分布。参考值： （100300）109/L,（二）异常血小板形态 1.大小异常 1）大血小板：直径7m、常为720m。见于巨大血小板
7、综合征、血小板无力症、ITP、MDS等。 2）小血小板：直径1.5m。假冒于缺铁贫、再障。 2.形态异常：超过10%才有临床意义。 1）血小板颗粒减少 2）血小板卫星现象 3）血小板“黏附”红细胞,3.聚集性和分布异常正常抗凝血外周血涂片可见35个聚集成簇或成团，聚集与散在血小板比为20：1 1）血小板聚集：多为血小板增多，大片聚集。见于：特发性血小板增多症、慢粒。 2）血小板成团或聚集减少：多为血小板减少。见于再障、ITP。 3）血小板散在分布：多为血小板聚集功能异常。见于血小板无力症。,三、血小板形态功能检查,粘附功能血小板GP Ib-经VWF介导粘附于胶原血小板GPIIb/IIIa经Fg介导相互粘附聚集功能释放功能,
