1、福州市健康儿童口咽部流感嗜血杆菌带菌调查福州总医院 2002 年 3 月第 9 卷第 1 期?9?福州市健康儿童口咽部流感嗜血杆菌带菌调查赖国祥张鸿文叶礼燕黄梁浒林茂英曹慧琴陈新民【摘要】且的:了解福州市健康儿童口咽部流感嗜血杆菌(haemophilusinfluenzae,Hi)带菌情况及菌型特点,提供 Hi 感染的临床防治依据.方法:选择幼儿园健康日托儿童 603 名,进行口咽部 Hi携带率四季监测,Hi 分离株进一步作血清学分型及生物学分型.结果:健康日托儿童口咽部 Hi 携带率以冬季最高(36.7%),秋季次之(18.O%),春季(10.9%)和夏季(12.4%)相近.Hi 分离株血清
2、型秋季以 Hib 携带率最高(6.9%),冬季以不可分型 Hi(NTHi)为主.携带率占 17.1%,Hib 携带率 5.4%,秋,冬季其它各血清型携带率较低.Hi 分离株生物型在秋,春,夏季分布较为一致,以生物,型占优势;冬季生物,型明显减少 .结论: 健康儿童口咽部Hi 定殖菌携带率及菌型有季节变迁现象,以冬,秋季 Hi 携带率较高.提示,在重视 Hib 结合菌苗接种的同时,应加强 Hi 新型菌苗的研究.【关键词】流感嗜血杆菌;儿童;携带率TheStudyOntheOralPharyngealCarriageofHaemophiluslnflaenzaeinHealthyPreschool
3、ChildrenInFuzhouLaiGuoxiang,ZhangHongwen.YeLiyan,eta1.DepartmentofRespiratory,FuzhouGeneralHospital,Fuzhou350025【Abstract】Objective:Toinvestigatetheoralpharyngealcarriageandcharacteristicsofhaemophilusinfluanzae(Hi)inhealthypreschoolchildreninFushou,andfortheclinicalpreventionandcureofHiinfection.Me
4、thods:Take603healthychildrenintworepresentativekindergartensinFuzhouastheresearchsubjects,andtheoralphaDmgeaIcarriageofHiweresupervisedinfoursea3orls.AllHistrainswereotypedandbtyped.Results:TheoralpharyngealcarriageofHiindaynursedhealthychildrenWaS36.7%inwinter.18.O%inautumn,12.4%insummerand10.9%ins
5、pringre-spectively.SerotypeHwaspreponderantinautumn(6.9%).Inwinter,thecaeofNTHiwas17.1%,whileHibWAq5.4%TheotlTeofotherserotypeswerelow.Biotypeand werepreponderantinautumn.springandsum-mer;butinwinterbiotypeandweredecreasingevidently.Conclasions:ThereWasevidentdifferencebetweendiffer-entseasonsintheo
6、ralpharyngeaIcarriageandtypeofHiinhealthypreschoolchildren.TheotlTeofHistrainswashighinautumnandwinter.ThestudyonnewbacterialvaccineofHishoudbeaugmented.whileHibbindingbacterialvaccineshouldbeenhanced.【Keywork】Haemophilusinfluermae;Children;Carlerate流感嗜血杆菌(haemophilusinfluenzae,Hi)是人体鼻咽部常见的定殖菌,正常人群特
7、别是儿童鼻咽部 Hi 携带率约 20%一 40%.常引起儿童中耳炎,肺炎,脑膜炎等疾病.近年来研究发现,Hi 肺炎发生率明显增加,约占社区获得性肺炎的 8%20%,与上呼吸道定殖的 Hi 条件致病密切相关.近几年,我们在制备了 Hi 分离培养基和提高分离率的基础作者单位:1.福州总医院呼吸内科2.福州总医院儿科上11,1998 年 9 月至 1999 年 9 月对福州市两所日托幼儿园健康儿童口咽部 Hi 携带率,菌型特点进行四季连续监测,以期对 Hi 感染的临床防治诊疗提供参考,报告如下.1 对象与方法1.1 对象:选择福州市幼儿园日托儿童 603 名,年龄 36岁,其中男 326 名,女 2
8、77 名.取材前 3 日均无上呼吸道感染,无抗生素应用史.取材分秋,冬,春,夏四季一个学年进行,在每个季度的第 1 个月取材(分别为 1998 年 9 月,12 月,1999 年 3 月,6 月).共取样?10?2053 份,平均取材率为 85.1%,其中秋季 522 份,冬季 520 份,春季 503 份,夏季 508 份.部分标本落选原因为:儿童转学及儿童患病.1.2 方法:1.2.1 取材接种:固定专人操作,在两餐间采集标本.清水漱口后,用消毒咽拭子擦拭儿童咽侧壁及后壁,接种在改良的哥伦比亚巧克力琼脂培养基(Improvedcolumbiachocolatedagar,ICCA)il,于
9、采样后 1h 内置 5%CO2,37孵育 24h 观察.1.2.2Hi 分离株鉴定:培养基上 Hi 呈优势生长的无色透明或灰白半透明,湿润,具有特殊闪光现象的直径为 0.30.7mm 菌落,显微镜检查为革兰阴性短杆菌,血琼脂平皿上不溶血,生长需要 V,X因子(分别以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和血红素代替),“卫星试验 “阳性.转种 Hi 分离株作传代培养.1.2.3Hi 分离株生物学分型:挑取 Hi 分离株菌落常规接种于吲哚试验,脲酶试验和鸟氨酸脱羧酶试验三种生化试验培养基中,置 5%CO2,37孵育 24h 观察,按国际标准分 8 个生物型【.1.2.4Hi 分离株血清型鉴定:诊断试剂盒购自卫生部
10、生物制品研究所.采用反向间接血凝方法:将传代培养 Hi 分离株菌落 35 个加入无菌生理盐水 2ml 中,昆匀,2000r/min 离心 15min 后取上清液备用,以微量移液器滴加上述离心后上清液50ul 于微量反应板振荡混匀,2h 后观察结果,以未致敏的红细胞悬液作为阴性对照.与多价抗体致敏红细胞不凝集者判为不可分型 Hi(NTHi),与多价抗体凝集者则依次用 b,f,e,d,a,c 抗体进行试验,与相应抗体致敏的红细胞发生凝集者即判定为相应的血清型.1.2.4 统计学分析:采用卡方检验及秩和检福州总医院 2002 年 3 月第 9 卷第 1 期2 结果2.1 不同季节健康儿童口咽部 Hi
11、 携带率:2053 份标本中,分离出 Hi403 株,阳性率为 19.6%,其中以冬季最高(36.7%,191/520),秋季次之(18.0%,94/522),春季 10.9%(55/503),夏季 12.4%(63/508).经统计学处理 ,健康儿童口咽部 Hi携带率在秋季,冬季与春季和夏季间差异有非常显着性(P0.01),而春季与夏季之间无明显差异(P0.05).2.2 不同季节 Hi 分离株血清型分布:见表 1.冬季 Hi 分离株中以 NTHi 为主,NTHi 携带率 17.1%,高于 Hib 携带率(5.4%) 及其它血清型 Hi 携带率(P0.01);秋季 Hi 分离株则以 Hib
12、携带率最高(6.9%),其它血清型及 NTHi 携带率相对较低(P0.05),秋 ,冬两季 Hib 携带率相近(P0.05).表 1 秋季和冬季健康儿童口咽部 Hi 分离株血清型分布情况注:NTHi 为不司分型流感嗜血杆菌2.3 不同季节 Hi 分离株生物型分布状况:见表 2.Hi 分离株生物型在秋,春,夏季分布较为一致(P0.05),秋,春,夏三季 Hi 分离株生物型,阳性率高于冬季(P0.01),而冬季 Hi 生物型 I,V,阳性率则高于另三个季节(P0.01),春季 Hi 生物型型较秋,冬,夏季的携带率低(P验,应用统计学软件 SPSS8.0 处理.0.01).表 2403 株 Hi 分
13、离株四季生物型分布情况生物型一一一菌株数I2II6IlI112V322048合计秋季冬季春季夏季菌株数构成比(%)构成比(%)菌株数构成比(%)菌株数构成比(%)合计2.16.411.72.13.22.121.351.116352722212513328.418.314.111.511.013.16.816.8052215172309.13.63.61.89.130.941.813721111371.64.811.13.21.61.617.458.755100.063钉“ 一们福州总医院 2002 年 3 月第 9 卷第 1 期3 讨论无症状的上呼吸道 Hi 携带者是局部或侵入性Hi 感染如中
14、耳炎,脑膜炎,肺炎,会厌炎等疾病的高危人群,同时亦可造成健康人群之间的传播.近年来研究认为 Hi 是社区获得性肺炎的主要病原菌31.国内目前尚无完整的健康儿童上呼吸道 Hi携带情况的流行病学资料【训.本研究表明,福州市日托健康儿童口咽部 Hi 携带率以冬季最高,秋季,春季及夏季相对较低,其中冬季 Hi 携带率为 36.7%,与笔者报道的冬季上海地区同龄组儿童 El 咽部 Hi 携带率 39.0%一致【5】5.表明健康儿童口咽部 Hi 携带率在冬季较高,Hi 在健康儿童口咽部的定殖是一个动态过程,定殖菌消失或获得的原因可能与气候因素,生活空间或局部免疫反应有关【6】6.国内临床调查显示【训,儿童
15、社区获得性肺炎中,Hi 感染率居首位达 29.0%与健康儿童口咽部 Hi 携带率较高有一定关系.近年普遍认为下呼吸道感染的 Hi 大多数是NTHi,本研究结果冬季健康儿童口咽部 Hi 分离株以 NTHi 为主,携带率 17.1%,占 Hi 分离株 46.6%(89/191),而冬季是小儿肺炎发病的高峰季节,提示上呼吸道定殖的 Hi 具有致病倾向 17】.由于 Hib 致病力最强,80 年代开始,欧美许多国家使用 Hib 结合疫苗,使健康儿童口咽部 Hib 携带率和 Hib 感染的发生率显着下降.福州市健康儿童口咽部 Hi 监测结果表明,秋季和冬季健康儿童 Hib 携带率分别为 6.9%和 5.
16、4%,分别占 Hi 分离株的 38.3%和14.7%,提示健康儿童口咽部定殖的 Hi 中 Hib 占有?11?较大比例,与国内外学者报道一致,提示我国应尽快开展 Hib 结合疫苗的预防接种工作.Hi 分离株生物分型显示.秋,春,夏三季 Hi 分离株以,两种生物型占优,冬季则明显降低.与上海地区同龄组儿童在冬季 Hi 分离株以生物型占优势不同【5】,可能存在地理差异.Hi 分离株生物型的变化与 Hi 的季节变迁密切相关,亦为分析 Hi 感染特征和防治措施提供进一步研究的依据.以上研究结果表明,健康儿童口咽部 Hi 定殖菌携带率和菌型有季节变迁现象,秋,冬两季是预防Hi 感染的重要时节,Hib 和
17、 NTHi 是健康儿童口咽部携带率较高,且有致病倾向的 Hi 定殖菌.目前研究应用较多的是 Hib 结合疫苗,我们认为,不仅要重视 Hib 结合疫苗接种工作,而且要加强 Hi 新型疫苗的研究.参考文献1 修清玉,方正,赖国祥,等.改良流感嗜血杆菌培养基的实验研究与评价.中华医学检验杂志.1998.21:161163.2 徐红.嗜血杆菌的分离鉴定.中华医学检验杂志,1987.10:365 368.3MasoTD,NomaniNK,IshaqZ.eta1.Useofnasopharyngeiso.htesofseptococcuspneumoiaeandHaemophilusmfluenzaefr
18、omchildren-mPakistanforsurveillanceforantimicrobialristance.Pe.diatrInfectDisJ,1993,12:824830.4 杨永弘,沈叙庄.刘秀云.我国小儿流感嗜血杆菌疾病的研究历史及现状.中华儿科杂志,1997,35:216218.5 赖国祥,修清玉,颜泽敏,等.181 名健康儿童鼻咽部流感嗜血杆菌带菌状况调查.临床儿科杂志,1999,17:155157.6MoUerLVM,GtaSselierH,DankeJ,eta1.VariationTmmetaboUcenzymeactivityofperstentHaemophil
19、usiniluenzaeinreSpimt0rytractsofpafienwithcysticfibrosis.JClinMicrobiol,1996,34:19261929.7 赖国祥,叶礼燕,李玉德,等.儿童下呼吸道流感嗜血杆菌感染的临床调查.中华儿科杂志,1997,35:590592.(上接第 33 页)我们选择了阿米卡星或头孢三嗪作为气管内注入抗生素【2】,获得满意疗效.我们体会,气管内置管连续每日注药治疗异物性支气管肉芽肿具有以下特点:(1)支气管腔内注药提高了局部抗生素杀菌或抑菌浓度,弥补了全身抗炎治疗时抗生素对肺一血屏障渗透力弱,痰液中抗生素浓度和活性低的不足,增强了杀菌效果,有利于感染的控制.同时局部注药后,病变部位支气管腔内分泌物受稀释,有利于痰液引流和排出.(2)局部应用激素,可减少支气管粘膜血管通透性,减轻局部炎症反应,促进粘膜水肿的吸收.(3)利多卡因可减少导管和药液对支气管粘膜刺激所致的咳嗽等症状,必要时可重复使用.(4)减少全身抗生素用药剂量,减轻抗生素的毒副作用.(5)局部损伤小,疗效显着,缩短病程,节省医疗费用,多数病人免除了手术治疗,有利康复.(6)气管内置管治疗系微创治疗方法,病人有不同程度不适感,应有效地做好患者的心理疏导和配合工作.而研制组织相容性和患者顺从性更好的导管和药物气管内给予后
