1、尿液酶的检查,正常人每日排出的蛋白质成分中有少量的酶,尿液中也含有酶,主要有: N-乙酰-D氨基葡萄糖苷酶 -谷氨酰基转移酶 丙氨酸氨基肽酶 淀粉酶 胰蛋白酶II,尿液活性的计算方法,肌酐换算法 尿酶活性(U/g Cr或U/mmol Cr) 8小时尿量计算法 尿酶活性(U/8h)=酶单位/L*8h尿量(L) 酶清除率法,一、 N-乙酰-D氨基葡萄糖苷酶测定,简称NAG 一种位于细胞溶酶体内的酸性磷酸酶 有多种同工酶,A型、B型、I1型和I2型 肾损伤时以B型明显升高 化学性质稳定,不受尿中细菌及细胞成分破坏,体外冷冻或冷藏数日活性不变,测定方法及评价,对硝基酚比色法 对硝基苯酚(PNP)显色
2、同时测定Cr浓度 荧光光度法 4-甲基伞形酮(4-MU)变构产生荧光 电泳法,参考区间,对硝基酚比色法 NAG活性18.5/L尿 肌酐校正后: 1.4U/mmol Cr(16.1U/g Cr) 荧光光度法 6.393.19U/g Cr,质量控制,标本采集 标本处理 试剂处理 线性范围,临床意义,肾脏病变 肾移植排斥反应 上、下尿路感染的鉴别,二、 -谷氨酰基转移酶,催化谷氨酰基的转移 肾、肠、胆道均有 尿中是血清中的26倍 稳定,有四种同工酶 肾小管上皮细胞受损时释放入尿中,测定方法 对硝基苯胺比色法 速率法 重氮反应比色法,质量控制 标本要求 仪器校准 底物与试剂,临床意义 肾脏受损的早期诊
3、断 肾小球肾炎的疗效观察 肾癌的标志物 肾移植排斥反应观察指标,三、丙氨酸氨基肽酶测定,是一种水解酶,四种同工酶,分别存在于血清、肝、肾、尿中,分子量大,不能通过肾小球滤过膜,尿APP大部分来自肾近球小管刷状缘,是肾脏损害的指标。 对硝基苯胺速度法测定,临床意义 各种肾脏疾病诊断的辅助指标 肾移植术后排斥反应的观察 肾毒性损害的早期诊断,四、尿淀粉酶测定,能水解淀粉、糊精和糖原 -淀粉酶(内切酶)作用末端和内部 -淀粉酶(外切酶)作用末端 血清中-淀粉酶,主要来自胰腺和唾液腺,易通过肾小球滤过膜排出,当胰腺有炎症或胰液排出受阻时,胰腺的淀粉酶会进入血液,测定方法 碘-淀粉比色法 染色法 对硝基苯酚麦芽七糖法 免疫抑制法和电泳法,质量控制 标本处理 碘-淀粉法 染色法 临床意义 急性胰腺炎 慢性胰腺炎 其他,5、胰蛋白酶II检查,丝氨酸蛋白酶,由丝氨酸和组氨酸组成的活性中心完成催化作用,水解精氨酸或赖氨酶的羧基与其它氨基酸的氨基形成肽键 在胰腺腺泡中有两种酶原(I、II),I是II的两倍,血清中含量甚微 急性胰腺炎时大量释放并经肾小球滤出,肾小管对I的重吸收能力大,尿中II多,测定方法 放免法和连续监测法(血清) 免疫层析法(尿液) 质量控制 尿样采集时间 注意抗原与抗体的比例 结果判断 临床意义 急性胰腺炎,Thank you!,