1、“太空婚礼 ”2002年 12月 30日， 两场筹备了 10年的 “太空婚礼 ”首次在神舟四号飞船上举行， 植物细胞“新人 ” （黄花烟草和革新一号烟草叶肉细胞 原生质体） ， 动物细胞 “新人 ” （ 小鼠 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞），两批新人同时在 “产房 ” 电融合仪内孕育新生命。这两场这两场 “太空婚礼太空婚礼 ”实质是哪两项细胞工程技术实质是哪两项细胞工程技术 ?植物体细胞杂交技术 动物细胞融合技术(1)(1)(2) (3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？动物细胞也能融合吗？专题专题 2 细胞工
2、程细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体教学目标： 了解动物细胞融合的原理、过程和意义。 理解单克隆抗体制备的过程和应用。(重难点 )A细胞 B细胞人工诱导1.动物 细胞融合的概念杂交细胞动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指 两个或多个细胞 融合形成一个 单核细胞 的过程。融合后的细胞具有原来两个或者多个细胞的遗传信息。一、动物细胞融合诱导方法1.2动物细胞融合过程电激灭活的病毒PEG诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法诱导方法灭活丧失感染性，保留融合活性。1.2动物细胞融合过程原理：融合后细胞的类型：A B细胞膜的流动性五种 AA、 AB、 BB（ A、 B）用灭活的病毒诱导动物
3、细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核1.2动物细胞融合过程A BAB杂种细胞遗传物质有什么特点？含两种生物的遗传物质融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞A B比 较项 目 植物体 细 胞 杂 交 动 物 细 胞融合融合原理融合前 处 理诱导 融合的方法主要用途细胞膜的流动性细胞的全能性细胞膜的流动性物理方法（ 离心、振荡、电激）化学方法（ PEG）物理、化学方法灭活的病毒获得杂种植株 制备单克隆抗体纤维素酶、果胶酶 去除细胞壁后诱导原生质体融合胰蛋白酶 使细胞分散后诱导细胞融合1.3 比较动、植物细胞杂交技术1.4动物 细胞融合技术的意义和应用强调：强调： 效应效应 B淋巴细胞是淋巴细胞是
4、能够产生抗体的能够产生抗体的 B淋巴细淋巴细胞，下文将其简称为胞，下文将其简称为 B淋淋巴细胞。巴细胞。 抗体：能够与抗原发生特异性结合的 免疫球蛋白 。能产生抗体的细胞是 浆细胞（即效应 B细胞）。二、单克隆抗体分化分化效应效应 B淋巴淋巴细胞细胞记忆记忆 B淋巴淋巴细胞细胞B淋巴细胞淋巴细胞抗体的传统生产方法抗原 反复注射动物从动物的 血清 中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。单克隆抗体单克隆抗体读下面一段资料， 找出单克隆抗体的概念人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的 B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个 B细胞只分泌一种化学性
5、质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个 B细胞进行无性繁殖，即克隆。2.1单克隆抗体的概念单克隆 抗体：单个 B细胞克隆产生的 化学性质单一、特异性强 的抗体。提示 1：对 B细胞进行细胞培养可行吗？提示 2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？问题： 如何大量生产单克隆抗体？请尝试设计一个方案。2.2单克隆抗体的制备过程提示 3：有什么方法能使 B细胞产生抗体的能力和骨髓瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 利用 B淋巴细胞产生抗体的功能。 利用骨髓瘤细胞无限增殖的特性。 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞。 利用动物细胞培养技术大
6、量培养杂交瘤细胞。一个 B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术设计方案：动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体， 又能大量增殖的细胞1975年英国科学家年英国科学家 米尔斯坦米尔斯坦 和和 科勒科勒 的实验的实验单克隆抗体的制备过程1、注射抗原的目的是什么？2、诱导其融合的方法有哪些？3、融合后培养液中有几种细胞？4、第一次 筛选的方法和目的5、第二次筛选的方法和目的6、杂交瘤细胞有什么特点？7、本过程利用了哪些技术？、本过程利用了哪些技术？单克隆抗体制备过程示意图BB 、 B瘤 、 瘤瘤 （ B、瘤）（一选） 选择性培养基： 只有 杂交瘤细胞才能存
7、活获得产生相应抗体的 B细胞（二选） 克隆化培养和抗体检测： 选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞体外培养体外培养小鼠腹腔内培养小鼠腹腔内培养杂交瘤细胞特点杂交瘤细胞特点： 既能产生特异既能产生特异性抗体，又能大性抗体，又能大量增殖。量增殖。单抗制备过程分哪几步？ 请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？ 单克隆抗体的制备原理： 杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体。单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、可大量制备2.3单克隆抗体的应用1、 诊断试剂 最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点： 特异性强，灵敏度高，
8、并能大量制备。“生物导弹 ” 单克隆抗体药物单抗导向，药物为弹头2、 治疗疾病和运载药物治疗疾病和运载药物主要用于治疗 癌症治疗 ，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成 “生物导弹 ”， 准确杀伤癌变细胞。两个过程 动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个 “一 ”一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒一个新细胞杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势小结：动物细胞融合 过程动物细胞 A动物细胞 B诱导，融合 筛选 杂交细胞 AB有丝分裂注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞。小结：单克隆抗体的制备过程B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合B-B细胞B-瘤细胞瘤 -瘤细胞选择培养 杂交瘤细胞 （ B-瘤细胞）克隆化培养专一抗体检测能产生特异性抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内增殖单克隆抗体
