1、流式细胞术淋巴瘤免疫分型,南京医科大学第一附属医院 江苏省人民医院血液科 李建勇 吴雨洁 范磊 徐卫,淋巴瘤,淋巴瘤分类：,B细胞淋巴瘤 1、前驱B淋巴母细胞白血病/淋巴瘤（ALL/LBL） 2、慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤(CLL/SLL) 3、B-前淋巴细胞白血病（B-PLL） 4、淋巴浆细胞淋巴瘤（LPL） 5、脾边缘区B细胞淋巴瘤，+/- 绒毛状淋巴细胞（SMZL） 6、毛细胞白血病（HCL） 7、浆细胞骨髓瘤/浆细胞瘤（PCM/PCL） 8、MALT型节外边缘区B 细胞淋巴瘤 （MALT-MZL） 9、淋巴结边缘区B 细胞淋巴瘤，+/- 单核细胞样B 细胞（MZL） 10、滤
2、泡淋巴瘤（FL） 11、套细胞淋巴瘤（MCL） 12、弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL） 13、伯基特淋巴瘤（BL）,T/NK细胞淋巴瘤 1、前驱T淋巴母细胞白血病/淋巴瘤（T-ALL/T-LBL） 2、母细胞性NK细胞淋巴瘤 3、慢性前淋巴细胞白血病/淋巴瘤（T-CLL/T-PLL） 4、颗粒淋巴细胞白血病（T-LGL） 5、侵袭性NK细胞白血病（ANKCL） 6、成人T细胞淋巴瘤/白血病（ATCL/L） 7、节外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型（NK/TCL） 8、肠病型T细胞淋巴瘤（ITCL） 9、肝脾T细胞淋巴瘤 10、皮下脂膜样T细胞淋巴瘤 11、菌样霉菌病/赛塞里(Sezary)综合征(MF
3、/SS) 12、间变性大细胞淋巴瘤(ALCL),T和非T非B细胞, 原发性皮肤型 13、周围T细胞淋巴瘤(PTL) 14、血管免疫母细胞T细胞淋巴瘤(AITCL) 15、间变性大细胞淋巴瘤(ALCL), T和非T非B细胞, 原发性全身型,淋巴瘤诊断 早期依赖于：细胞形态和免疫组织化学FCM：近来发展迅速，优点：1.高敏感性2.减少主观性导致人为误差3.更为快速4.更多优化组合的抗体及定量流式的采用(Ag弱表达时)5.样本来源多样：淋巴结,外周血,骨髓,脾脏,胸腹水等免疫表型依据:1.淋巴细胞某一亚群的扩增 2.Ig轻链缺失(单克隆) 3.异常抗原表达:高/低/缺失/异常共表达 4.细胞形态增大
4、,中枢（未成熟）淋巴组织骨髓（B细胞）胸腺（T细胞） 外周（成熟）淋巴组织淋巴结脾脏扁桃体皮肤、粘膜淋巴组织,淋巴组织的分布,正常淋巴组织免疫表型特点,正常外周血淋巴细胞免疫表型：呈现年龄动态相关性,1.5倍,6.5倍,3倍,3倍,其中CD25+CD4+T细胞:占1-2%,免疫耐受相关,3倍,2倍,B淋巴细胞:儿童淋巴细胞中占主要比例(主要表达:CD10)成人淋巴细胞中占1/3(主要表达:CD10-CD20+)CD19+细胞根据CD10逐渐丢失/CD20逐渐表达可分为4四种亚型:早前B细胞：CD34+/TdT+/CD10-。前B-1细胞： TdT+/CD10+ 前B-2细胞： TdT+/-/C
5、yIg+ /CD20+ 成熟B细胞：CD10-/CD20+/SmIgCD45,CD22表达随成熟度增加而增高,正常骨髓淋巴细胞免疫表型,小儿B细胞染色图谱,B-precursor ALL,CD19+B淋巴细胞为主: 55%, 成人中10%共表达CD5 CD3+T细胞:40%,CD4/CD8同PB 出现5%左右早期浆细胞:CD19+CD38+CD20-CD138-,脾 脏,75%CD4+CD8+(出生1月),表达CD3/TCR复合物5%CD4-CD8-5%CD4+CD8- 5%CD4-CD8+B淋巴细胞,NK细胞比例极低,胸 腺,CD8 CD3,CD4,Thymus / thymoma (loc
6、ation),CD8 CD3,CD4,Acute T-lymphoblastic Leukemia,B淋巴细胞:40%,滤泡边缘区:1/3共表达CD5滤泡中心:CD10+CD20+(bright) T淋巴细胞:55%,CD3+T细胞CD4/CD84 NK:1%,淋 巴 结,ALL/LBL,MCL，SLL/CLL,DLBCL，FL，BL，HL,MZL,SLL/CLL,DLBCL,LPL,PCM/PCL,非霍奇金淋巴瘤各型肿瘤发病机率,流式细胞术诊断淋巴瘤核心原则 （检测两步走）,第一步:快速识别恶性细胞及细胞起源 第二步:通过抗体组合进一步细分,数 据 调 查,N = 35,Cytometry
7、Part B (Clinical Cytometry) 72B:S14-S22 (2007),流式诊断B淋巴细胞淋巴瘤,B细胞成熟过程中抗原表达变化,Wood and Borowitz (2006) Henrys Laboratory Medicine,正常B细胞免疫蛋白重链表达情况,淋巴细胞,正常淋巴细胞,淋巴细胞增殖性疾病（克隆扩增）,滤泡性淋巴瘤（FL）,在我国约占NHL的10%，欧美占NHL的25%45%； 30%50%的患者可转化为DLBCL。,FL肿瘤细胞免疫表型,Follicular lymphoma,弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）,是最常见的NHL ，约占全部NHL的 30%
8、-40% 。它可原发于淋巴结或结外器官和组织，也可从惰性淋巴瘤转化而来。发病年龄：中位年龄 50-60 岁，男性略多於女性。,DLBCL肿瘤细胞免疫表型,DLBCL肿瘤细胞CD23-，CD5dim，DNA倍体分析出现异倍体峰。,DLBCL:CD20表达量的减少和预后不良,blood. 2009；113 (16):3773-3780,FCM比IHC更敏感！,Burkitt淋巴瘤（BL）免疫表型,免疫表型无法明确区分三者区分通过基因分析和病理检测,滤泡型淋巴瘤：惰性淋巴瘤（低危）,弥漫大B淋巴瘤：侵袭性淋巴瘤（中危）,Burkitt淋巴瘤（BL）：高度侵袭性淋巴瘤（高危）,DLBCL、 BL 、 FL三者之间关系,结外边缘区淋巴瘤（MALT）,占B细胞淋巴瘤的7%-8%，包括：边缘带细胞、单核样细胞、小淋巴细胞和散在的免疫母细胞样以及中心母细胞样细胞。大多发生于成人，中位年龄61岁，女性略多见。,
