1、医疗门诊发热病人疟原虫血检操作程序,襄阳区疾病预防控制中心,一、玻片清洗,1、将新玻片放入有液态洗涤剂清水中浸泡10-20分钟,然后用干净棉巾逐个擦拭,再用清水冲洗3-4次,晾干,最后用干净、柔软的棉巾将玻片擦亮。将洗净的玻片每10-20张用白纸包好放放塑料袋内,保存于干燥环境中备用。,一、玻片清洗,2、已用过的玻片浸泡于洗涤剂溶液中1-2天(或浸泡于煮沸的5%肥皂水中1-2小时),再移到新配置的洗涤剂溶液中1-2小时,逐个擦去玻片上旧的血膜痕迹,用清水冲洗3-4次,再将玻片擦干擦亮。将洗净的玻片每10-20张用白纸包好放放塑料袋内,保存于干燥环境中备用。,二、采血,部位以耳垂较为合适,也可在
2、手指末端采血。采血前,先用75%酒精棉球消毒采血部位,待干后,用左手拇指和食指紧捏耳垂上方或无名指指尖,右手持经消毒后的一次性采血针,迅速刺入取血部位1-2毫米深,然后用左手大拇指、食指和右手中指协同挤出血滴。,三、血片制作,1、将载片分为6等分,右第1、2格备贴标签;厚血膜涂在第3格中央,薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。,三、血片制作,2、取血:取推片一张,用右拇指和食指夹持推片侧缘中部,用推片的右下角刮取约火柴头大小血液4-5立方毫米,待涂制厚血膜;再用该端边缘中部刮取约1/4火柴头大小的1小滴血液1-1.5立方毫米,待涂制薄血膜。,发热病人疟原虫血检涂片姿势,厚薄血膜制作步骤,制作的标
3、准血片,四、染色前血膜处理及编号,1、血膜制成后,将未干的血片(血膜向上)平放在操作台上,让血膜自然干燥,切勿暴晒和烤干。在血膜自然干燥过程中,镜检员对被检者的信息应及时在疟原虫血检登记簿上进行详实、完整的填写登记,并按照血检登记簿的顺序号,将受检者的号码用铅笔对应写在该受检者血片的薄血膜上。,四、染色前血膜处理及编号,四、染色前血膜处理及编号,2、血膜完成干燥后,薄血膜用甲醇或无水乙醇固定(1-3分钟),过厚的厚血膜放在盛满清水的染色缸里进行溶血处理至乳白色(3-5分钟)。未处理的血膜放置时间夏天不宜超过48小时,冬天不宜超过72小时。,五、血片染色,使用吉氏染色法:常规染色:每张血片约需染
4、液2ml,染液现用现配。用量筒内量2ml蒸馏水或PH7.0-7.2缓冲液,直接滴加吉氏原液2滴,混匀,滴入待染标本的厚、薄血膜上,染色2030min,用清水细缓冲洗(冲洗染液时,不要冲走厚血膜)或清水轻漂冲洗,将染好后的血片倾斜放置,晾干镜检;快速染色:用量筒内量2ml缓冲液或PH7.0-7.2缓冲液,直接滴加吉氏原液7滴,混匀,滴入待染标本的厚薄血膜上,染色10min,用清水细缓冲洗(冲洗染液时,不要冲走厚血膜)或清水轻漂冲洗,将染好后的血片倾斜放置,晾干镜检。,五、血片染色,染液配制:2ml蒸溜水+2滴吉氏染液 将配好的染液用吸管吸出平铺到玻片上,血片的漂洗和晾干,染色后玻片的漂洗 玻片晾
5、干,六、血片镜检,以厚血膜为主,薄血膜仅作虫种鉴定。镜检时,在厚血膜上滴加镜油,用目镜5或10、物镜100的双目显微镜下,从血膜一端至上而下,至左而右,逐个视野顺序查看,至少要看完200个视野(或5-10分钟)以上,方可报告结果。对阳性血片的确认,至少要查出一个典型的疟原虫,并需鉴别虫种和虫期。对发现的阳性病人还要制作2个滤纸血膜。,六、血片镜检,七、血检结果报告,镜检结束后,镜检员要在被检者对应的血检单和疟原虫血检登记薄上填写血检结果,对查出的阳性病人,还应及时填写传染病报告卡,最迟不超过2小时报卫生院防保科,进行疫情网络直报,对查出的恶性疟病人立即上报上级疾控中心。每月血检结束后,镜检员应在次月2日前将血检数据及全部血片报送卫生院防保科,防保科及时填写发热病人血检月报表,于次月5日前将血检月报表及10%阴性血片送疾控中心复查。,七、血检结果报告,七、血检结果报告,七、血检结果报告,谢谢!,