1、 310 311 CHINESE JOURNAL OF ANATOMY V ol.46 No.4 2023 解剖学杂志 2023 年第 46 卷第 4 期miR-17-5p对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其对 细胞外调节蛋白激酶1/2信号通路的影响*杨 华1，2 李金波1，2（1 天津中医药大学第一附属医院脑病康复病区，2 国家中医针灸临床医学研究中心，天津 300193）摘要 目的：观察miR-17-5p 对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其对胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）信号通路的影响。方法：将大鼠随机数字法分为模型组、miR-17-5p mimics 组、miR-17-5p i
2、nhibitor 组。建模后，模型组经尾静脉注射10 mL/kg 生理盐水，miR-17-5p mimics 组、miR-17-5p inhibitor 组分别经尾静脉注射7 L miR-17-5p mimics、miR-17-5p inhibitor 与 RNAi 脂质体转染试剂的混合溶液。各组大鼠苏醒后的24 h 进行神经功能评分，测定脑梗死体积、大鼠脑组织含水量，检测缺血侧大脑皮质细胞凋亡率，caspase-3、Bax、Bcl-2 和 ERK1/2蛋白表达。结果：miR-17-5p mimics 组的神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织含水量、缺血侧大脑皮质细胞凋亡率明显低于模型组，mi
3、R-17-5p inhibitor 组的神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织含水量、缺血侧大脑皮质细胞凋亡率显著高于其他2 组；miR-17-5p mimics 组大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax 蛋白表达明显低于模型组，Bcl-2、p-ERK1/2 蛋白表达高于模型组；miR-17-5p inhibitor 组大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax、p-ERK1/2蛋白表达显著高于其他2 组，Bcl-2 蛋白表达低于其他2 组。结论：miR-17-5p 对缺血性脑卒中大鼠的脑损伤具有一定的保护作用，miR-17-5p 可抑制ERK1/2 信号通路激活。关键词 miR-17-5p
4、；缺血性脑卒中；神经保护；细胞外调节蛋白激酶1/2；大鼠Neuroprotective effect of miR-17-5p on rats with ischemic stroke and its influence on extracellular regulatory protein kinase 1/2 signal pathway*Yang Hua1，2，Li Jinbo1，2（1.Department of Encephalopathy Rehabilitation，First Teaching Hospital of Tianjin University of Traditio
5、nal Chinese Medicine，2.National Clinical Research Center for Chinese Medicine Acupuncture and Moxibustion，Tianjin 300193，China）Abstract Objective：To observe the neuroprotective effect of miR-17-5p on ischemic stroke rats and its influence on the extracellular regulatory protein kinase 1/2（ERK1/2）sig
6、naling pathway.Methods：Sixty-nine rats were randomly divided into three groups，the model group，the miR-17-5p mimics group，and the miR-17-5p inhibitor group，with 23 rats in each group.After modeling，the model group was injected with 10 ml/kg saline，the miR-17-5p mimics group was injected with 7 L miR
7、-17-5p mimics mixed solution via the tail vein，and the miR-17-5p inhibitor group was injected with 7 L miR-17-5p inhibitors mixed solution via the tail vein.The rats in each group were evaluated for neurological function 24 hours after awakening，the cerebral infarction volume，and the water content o
8、f rat brain tissue were measured，the apoptosis rate of cerebral cortex of the ischemic side，caspase-3，Bax，Bcl-2 and ERK1/2 protein were measured.Results：The neurological dysfunction score，cerebral infarction volume，brain tissue water content，and apoptosis rate of ischemic cortical cells in the miR-1
9、7-5p mimics group were significantly lower than those in the model group.The neurological dysfunction score，cerebral infarction volume，brain tissue water content，and apoptosis rate of ischemic cortical cells in the miR-17-5p inhibitor group were significantly higher than those in the other two group
10、s.The expression of caspase-3 and Bax protein in the ischemic brain tissue of miR-17-5p mimics group was significantly lower than that in the model group，while the expression of Bcl-2 and p-ERK1/2 protein was higher than that of the model group.The expression of caspase-3，Bax，and p-ERK1/2 proteins i
11、n the ischemic brain tissue of miR-17-5p inhibitor group rats was significantly higher than that of the other two groups，while the expression of Bcl-2 protein was lower than that of the other two groups.Conclusion：miR-17-5p has a certain protective effect on brain injury in ischemic stroke rats，and
12、miR-17-5p doi：10.3969/j.issn.1001-1633.2023.04.007 论 著*国家中医药管理局临床研究基地业务建设科研项目（JDZX2015022）第 1 作者 E-mail：收稿日期：2022-03-28；修回日期：2023-03-08 312 313 can inhibit the activation of ERK1/2 signaling pathway.Key words miR-17-5p；ischemic stroke；neuroprotection；extracellular regulatory protein kinase 1/2；rat缺血
13、性脑卒中发生后，脑组织处于缺血或者缺氧甚至是失代偿状态1。神经元细胞的凋亡坏死是脑卒中的发病机制之一2。减少神经细胞凋亡对缺血性脑损伤具有神经保护作用3。脑卒中患者发病后，给患者、家属带来了一定的经济和精神负担4，因此寻找改善脑缺血损伤的治疗靶点具有重要意义。脑缺血损伤导致脑组织缺血缺氧，其中的miRNA 表达水平发生变化5。研究表明，miRNA 是调节神经细胞存活的关键介质，miRNA 通过靶向调节基因的表达从而发挥抗凋亡或促凋亡的作用6。miR-17-5p 是 miR-17-92 家族重要的成员，miR-17-5p 在多种恶性肿瘤内表达上调，并发挥明显的促癌作用7。也有研究表明miR-17
14、-5p 表达上调对大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion，MCAO）大鼠神经具有保护作用8。细胞外调节蛋白激酶 1/2（extracellular regulatory protein kinase 1/2，ERK1/2）是 MAPKs 家族中最早被认识的激酶，是公认的经典MAPK 信号通路，会调节细胞的生长和分化9。近年来大量研究表明ERK1/2 也参与到长时程突触传递增强（LTP）和轴突生长的过程中，会促进突触蛋白的合成，并且在突触可塑性以及学习记忆中发挥着重要作用10。目前关于miR-17-5p 和 ERK1/2 在缺血性脑卒中的相关报道较少，所
15、以本研究观察miR-17-5p 对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用及其对ERK1/2 信号通路的影响，并探讨其机制。1 材料和方法1.1 实验动物与主要材料 69 只 SD 大鼠，体质量（27030）g，购买于北京维通利华实验动物技术有限公司（SCXK（京）2019-0016，常规实验动物室饲养，12 h 的昼夜交替，室内条件，温度为23 25，湿度控制在60%左右，自由饮食和饮水，并通过动物伦理委员会批准。ECL 化学试剂盒购自美国 Bio-Rad 公司；miR-17-5p mimics 和 miR-17-5p inhibitor 购自广州锐博公司；10%水合氯醛溶液购自国药集团公司；casp
16、ase-3、Bax、Bcl-2、ERK1/2、p-ERK1/2一抗购自碧云天生物技术有限公司；三苯基氯化四氮唑（TTC）购自美国 Pierce 公司。1.2 动物建模和分组将 69 只大鼠随机数字法分为3 组，模型组、miR-17-5p mimics 组和miR-17-5p inhibitor 组，每组 23 只。3 组动物术前禁食8 h，采用改良的Longa 法建立 MCAO 模型11，在缺血2 h 后再次进行开放血流，形成再灌注。采用10%的水合氯醛进行腹腔麻醉，将其头部和四肢固定，充分暴露手术部位，采用眼科剪沿着大鼠锁骨正中纵向切口，剪开浅筋膜，钝性分离颈部腺体与肌肉等周围组织，暴露左侧
17、颈总动脉并进行缓慢分离，沿着其左侧颈总动脉入颅的方向分离，可以观察到左侧颈内动脉和颈外动脉，将左侧颈总动脉的近心端结扎，剪开动脉壁是颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，同时结扎颈外动脉，夹闭左侧颈内动脉远心端，把线栓缓慢插入左侧颈内动脉，再将左侧颈总动脉向左侧牵拉，直到拴线标记处到达分叉口不能继续前行，说明线栓已经进入脑组织中的大脑中动脉。备线结扎固定，清理颈部血块，缝合筋膜与皮肤。术后 2 h，再次麻醉大鼠，同样的手术方式取出线栓，开放血流后缝合，模型组注射10 mL/kg 生理盐水，准备 2.5 L 的 LipofectamineTM RNAiMAX分别与9 L 的miR-17-5p mimic
18、s 和 miR-17-5p inhibitor 混匀，常温下静置120 min，miR-17-5p mimics 组经尾静脉注射7 L miR-17-5p mimics 的混合溶液，miR-17-5p inhibitor 组经尾静脉注射7 L miR-17-5p inhibitor 的混合溶液。1.3 神经功能评分各组大鼠苏醒后的24 h 进行神经功能评分，并记录评分结果。按照Longa 评分法进行评分，0 分表示神经功能正常，神经功能体征无受损；1 分表示神经功能轻度受损，肢体屈曲，不能正常伸展；2 分表示神经功能中度受损，大鼠活动时患侧出现旋转或者转圈；3 分表示神经功能重度受损，大鼠活动
19、时患侧出现摔倒；4 分表示大鼠已经无法自行活动。本实验排除因缺血相关而死亡的8 只的大鼠。1.4 脑梗死体积测定各组随机抽取4 只大鼠，手术后24 h，采用10%水合氯醛腹腔注射进行深度麻醉，取出大鼠完整的大脑放在培养皿中，在-20 的冰箱冷冻 20 min 后，做冠状位切片2 mm，将脑组织切片浸入 2%的 TTC 缓冲溶液中，37 孵育30 min，TTC 染色结束后，可观察到梗死组织红白相间，白色为梗死组织，拍照，采用Image J 系统计算大鼠脑梗死体积。312 313 1.5 大鼠脑组织含水量各组随机抽取4 只大鼠，采用10%水合氯醛腹腔注射进行深度麻醉，取出大鼠完整的大脑，切除小脑
20、和嗅球，冲洗表面，天平称重，标记湿重 A。之后将脑组织放于电热恒温干燥箱烘干，恒温50C，10 min，再次称重，记录干重 B。含水量计算公式=（A-B）/A100%。1.6 缺血侧脑皮质细胞凋亡率每组取出4 只大鼠，水合氯醛深度麻醉，取出完整脑组织，多聚甲醛溶液固定24 h。脑组织脱水，石蜡包埋，切片。石蜡切片脱蜡，加入蛋白酶工作液，常温下孵育30 min，PBS 洗涤后加入TUNEL液体（国药集团化学试剂有限责任公司)，常温无光孵育1 h，PBS 清洗，加 50 L convertr-POD，常温无光孵育0.5 h。PBS 清洗，DAB 液显色，苏木精复染，脱水透明，封固，在荧光显微镜下观
21、察荧光情况，在 200 倍视野下拍摄3 个缺血大脑组织，使用Image J 软件计算大脑皮质细胞凋亡率。细胞凋亡率计算公式如下：凋亡率（%）=凋亡细胞数/总细胞数100%。1.7 免疫印迹检测caspase-3、Bax、Bcl-2 和 ERK1/2蛋白各组随机抽取4 只大鼠，采用水合氯醛腹腔注射进行深度麻醉，取大脑中缺血脑组织，加入含蛋白裂解液的匀浆器中匀浆，转入EP 管中进行离心处理，10 000 r/min 离心15 min。取上清液，BCA法检测脑组织总蛋白浓度。将提取出的蛋白溶液和缓冲溶液进行混匀，将其煮沸、变性、电泳，后移至PVDF 膜上，加脱脂奶粉封闭1 h。分别置于caspase
22、-3（1 500），Bax（1 500），Bcl-2（1 500），ERK1/2（1 1 000）一抗孵育液中，孵育过夜，漂洗 3 次，再置于山羊抗兔的二抗（1 2 000）孵育液中，常温孵育1 h，然后加入ECL 发光液发光。用 Quantity One 软件测量各组蛋白条带灰度值，计算靶蛋白表达水平。1.8 统计学处理采用SPSS 24.0 软件进行统计分析，所有数据以 xs 表示，多组间比较采用单因素方差分析，两组间比较采用LSD-t 检验。P0.05 为差异具有统计学意义。2 结果2.1 miR-17-5p 对各组神经功能障碍评分及脑梗死体积的影响miR-17-5p mimics 组的
23、神经功能障碍评分和脑梗死体积明显低于模型组（P0.001），miR-17-5p inhibitor 组的2 项指标显著高于其他2 组（P0.001）（表 1，图 1）。表 1 各组神经功能障碍评分及脑梗死体积对比（xs）组别 神经功能障碍评分脑梗死体积（V/cm3）模型组 2.630.5936.8213.71miR-17-5p mimics 组 1.390.4627.183.45miR-17-5p inhibitor 组 3.470.61*45.8211.39*P0.001 vs 模型组；P0.001 vs miR-17-5p inhibitor 组图1 TTC 染色测量脑梗死体积情况。A：模
24、型组；B：miR-17-5p mimics 组；C：miR-17-5p inhibitor 组.图 2 各组大鼠缺血侧脑组织皮质细胞凋亡情况，TUNEL（A1C1）、DAPI（A2C2）染色和 Merge（A3C3）。A：模型组；B：miR-17-5p mimics 组；C：miR-17-5p inhibitor 组.1A 2A3 2B3 2C32A2 2B2 2C22A1 2B1 2C11B 1C 314 315 2.2 miR-17-5p 对各组大鼠脑组织含水量的影响模型组、miR-17-5p mimics 组、miR-17-5p inhibitor组大鼠脑组织含水量分别为 84.27%2
25、.78%、78.63%1.94%和86.85%4.17%，miR-17-5p mimics组中大鼠脑组织含水量明显低于模型组（P0.001），miR-17-5p inhibitor 组中大鼠脑组织含水量显著高于 miR-17-5p mimics 组和模型组，差异具有统计学意义（P0.001）。2.3 miR-17-5p 对各组大鼠缺血侧大脑皮质细胞凋亡率的影响模型组、miR-17-5p mimics 组、miR-17-5p inhibitor组的凋亡率分别为12.87%4.16%、4.71%1.32%和21.64%5.24%，miR-17-5p mimics 组中大鼠缺血侧大脑皮质细胞凋亡率明
26、显低于模型组（P0.001），miR-17-5p inhibitor 组中大鼠缺血侧脑皮质细胞凋亡率显著高于其他2 组（P0.001）（图 2）。2.4 miR-17-5p 对各组大鼠缺血脑组织caspase-3、Bax、Bcl-2 蛋白表达的影响miR-17-5p mimics 组中大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax 蛋白表达明显低于模型组（P0.001），Bcl-2 蛋白表达高于模型组（P0.001）；miR-17-5p inhibitor组中大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax 蛋白表达显著高于其他2 组（P0.001），Bcl-2 蛋白表达低于其他 2 组（P0.001）
27、（表 2，图 3）。表 2 各组大鼠缺血侧脑组织 caspase-3、Bax、Bcl-2 蛋白表达水平对比（xs）组别 Caspase-3 Bax Bcl-2模型组 0.450.130.570.130.170.09miR-17-5p mimics 组 0.290.07*0.340.09*0.350.11*miR-17-5p inhibitor 组 0.560.15 0.680.17 0.120.07*P0.001 vs 模型组；P0.05），miR-17-5p mimics 组中大鼠脑组织p-ERK1/2 蛋白表达明显低于模型组（P0.001），miR-17-5p inhibitor 组中大鼠
28、脑组织p-ERK1/2 蛋白表达显著高于其他2 组（P0.001）（图4，表3）。3 讨论目前脑梗死的治疗一般以缓解急性期脑缺血为主，虽然溶栓治疗和急性期血管治疗在临床上取得了一定的进展，血管的再通率有了较大程度上的提高，但是脑组织对缺血损伤非常敏感，部分患者脑内仍会出现梗死灶，不同程度的影响了神经功能缺损后遗症12，所以如何预防和治疗缺血区神经功能缺失是目前亟待需要解决的问题。miRNA 属于小的非编码RNA 家族的一种，可以与靶基因的mRNA 结合，导致mRNA 转录和降解受到抑制13。miRNA 在中枢神经系统中表达广泛，在神经系统的发育和功能中起着重要的作用14。相关研究表明，脑卒中的
29、发生和发展的过程中miRNA 存在异常表达，包括脑卒中后细胞的增殖、免疫功能的变化和血管再生等病理过程15，miRNA都参与其中。相关研究表明，miR-532-5p 的表达异常可能参与了缺血性脑卒中的病理机制14。也有研究报道，miR-32-3p 与缺血的脑卒中具有一定的相关性16。抑制缺血性神经元凋亡可有效改善脑损伤。Caspase 是凋亡中比较重要的蛋白酶，可以协调多图 4 免疫印迹检测各组大鼠缺血脑组织 ERK1/2 蛋白的表达图 3 免疫印迹检测各组大鼠缺血脑组织 caspase-3、Bax、Bcl-2 蛋白的表达Caspase-3MaxBcl-2-actin模型组miR-17-5p
30、mimics 组miR-17-5p inhibitor 组模型组miR-17-5p mimics 组miR-17-5p inhibitor 组p-ERK1/2ERK1/2-actin表 3 各组大鼠缺血脑组织 p-ERK1/2、ERK1/2 表达水平 蛋白对比（xs）组别 p-ERK1/2 ERK1/2模型组 1.170.291.030.11miR-17-5p mimics 组 0.240.05*1.010.08miR-17-5p inhibitor 组 1.390.36 0.980.12*P0.001 vs 模型组；P0.001 vs miR-17-5p inhibitor 组 314 31
31、5 种蛋白因子进一步调控凋亡，改变其结构，促进凋亡17。Caspase 是细胞凋亡的关键执行者，它的激活表明细胞凋亡进入了不可逆的损伤阶段，Caspase-3 介导的信号通路是触发细胞凋亡的唯一途径18。Bax 是一种非活性单体，存在于细胞质中，在受到凋亡信号的刺激后，可发生分子构象改变，对抗凋亡抑制蛋白Bcl-2 等，通过影响线粒体信号通路，促进凋亡的发生19。Bcl-2 家族蛋白是一类凋亡蛋白，抗凋亡因子Bcl-2 具有抑制细胞凋亡的作用20。本研究造模后对神经功能障碍进行评分，并计算脑梗死体积和脑组织的含水量，结果显示，过表达miR-17-5p 大鼠的神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织
32、含水量、缺血侧脑皮质细胞凋亡率明显低于模型大鼠，抑制miR-17-5p 表达的神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织含水量、缺血侧脑皮质细胞凋亡率显著高于过表达miR-17-5p 的大鼠。过表达miR-17-5p 大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax 蛋白表达明显低于模型大鼠，Bcl-2蛋白表达高于模型大鼠；抑制miR-17-5p 表达大鼠缺血脑组织中caspase-3、Bax 蛋白表达显著高于过表达miR-17-5p 的大鼠，Bcl-2x 蛋白表达低于过表达 miR-17-5p 的大鼠。说明过表达miR-17-5p 可以降低神经功能障碍评分、脑梗死体积、脑组织含水量，改善凋亡相关蛋白的表
33、达，抑制miR-17-5p 则反之，提示miR-17-5p 可能对缺血性脑卒中大鼠的神经具有一定保护作用。相关研究表明，miR-17-5p 表达上调对MCAO 大鼠神经具有保护作用，其功能发挥可能与介导调控PTEN 信号通路相关21，与本研究结果类似。ERK 的信号转导途径是涉及调节细胞生长、发育及分裂的信号网络的核心，ERK 的活化可对抗氧化应激对细胞的损伤作用22。相关研究表明，ERK 的激活可以调节神经突触的相关功能蛋白，使海马神经细胞生成新的树突棘，该树突棘的主要功能为形成突触连接以及接受信息，说明 ERK 可能参与了神经元的形态学改变过程23。其中 ERKl/2 蛋白磷酸化在连接细胞
34、应答和细胞核基因调控中起到了承上启下的作用，ERKl/2 蛋白磷酸化的持续高水平是决定细胞分裂和分化的关键因素24。本研究进一步证明了miR-17-5p 与 ERK1/2 磷酸化的关系，结果表明，过表达miR-17-5p 能够有效抑制ERK1/2 磷酸化，抑制miR-17-5p 反之。综上所述，miR-17-5p 对缺血性脑卒中大鼠的神经损伤具有一定的保护作用，其机制可能通过抑制 ERK1/2 信号通路实现，为缺血性脑卒中疾病的治疗提供了试验依据。参考文献1 Jovin T G，Chamorro A，Cobo E，et al.Thrombectomy within 8 hours after
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44、层影像解剖学、神经解剖学、组织学、胚胎学、细胞生物学、再生医学、人类学等形态学方面的学术论著。主要栏目有专家论坛、专题报道、论著、研究快报、综述、技术方法、教学研究、问题讨论、变异畸形、简讯等。鼓励投送英文稿件。2 投寄要点2.1 投稿请登陆 解剖学杂志 网站http：/“作者投稿”，作者注册后按照网页上的提示进行网上投稿。请用Microsoft Word 的 A4 页面设置，中文用宋体，英文用Times New Roman 字体，行距1.5 倍，小四号字。编排顺序是：题名页，中、英文摘要，正文，参考文献，插图和图版说明，表格。将图和表均插入正文中，上传内容不超过5 MB。作者返修的稿件须提供
45、专业扩印后的清晰照片，并邮寄至编辑部。2.2 邮寄地址：200433 上海市国定东路200 号 2 号楼5 楼B109 室解剖学杂志编辑部。电子信箱：。2.3 来稿须经作者所在单位审查，提供加盖单位公章的单位介绍信（注明材料真实可靠、未一稿两投、不涉及保密、作者单位与署名无争议、第 1 作者与通信作者签名的单位证明），所有作者签名，第 1 作者和通信作者的电话（须包括手机）。受资助基金批复通知的复印件。单位介绍信及基金复印件可扫描后与稿件一同网上投稿，也可邮寄至编辑部。如发现一稿两用，本刊将发表该文重复发表的声明，并在2年内拒收第1 作者的任何来稿。2.4 稿件处理费150 元需转账至户名：中
46、国解剖学会，开户行：工商银行北京东四支行，账号：0200004109014480529。银行汇款时请注明：解剖学杂志处理费及稿件编号，如解剖学杂志出版费2019-020。汇款后将底单发至杂志电子信箱：，同时将汇款信息发送给中国解剖学会学会办公室霍爱民老师的电子信箱“”，请注明：解剖学杂志论文处理费及稿件编号、汇款人姓名（银行卡户名）、汇款数额、单位及开发票的台头、纳税人识别号、手机号码等。收到汇款后，将开具电子发票以电子邮件方式发至邮箱，请自行下载打印。2.5 收 到修 稿 电 子邮件 后，邮 件 提 示了编 辑 加 工 后 的 稿 件下载处，作 者修改 后，将返修 稿 上传网站的同时，需 邮
47、 寄一份 纸质返 修 稿和相关 材 料（尤其是 修改说 明）。返修 稿 件 时，务必认 真 阅读 编 辑 部 发 给作 者 的 修 改 稿 重 要注 意事 项，在 首页脚 注 处注明 第1 作者和 通 信 作者 的 电 子 信 箱，如系 基 金 资助 项目、重 大 科 研 项目的 论 文，注 明 项目的 全 称 和 编 号。请自留底 稿。2.6 编辑部一般约在3 个月内将审稿意见反馈给作者。作者在此期间请勿将稿件另投他刊。如果作者主动撤稿，请务必告知我刊编辑部。作者投稿2 3 个月后可依据论文编号向编辑部查询是否录用等信息。2.7 本刊对来稿有删改权。2.8 刊登的文稿在排版前1 个月通知付版
48、面费，逾期未付款者，视为弃登。文稿刊登后，给第1 作者赠送当期杂志2 本，并酌致稿酬（含 万方数据 数字化期刊群 中国学术期刊（光盘版）稿酬）。3 各类稿件的要求 仅专家论坛、专题报道、论著、综述需有中、英文摘要，其他类型论文不要摘要。3.1“专家论 坛”主要是约稿，内容是 作者本 人 专长研 究领域的新 进 展和 以本 人 系列研 究 工 作 为基 础的综 合 性 述 评。欢 迎资深学者 撰写 具 有 新 观点、新见解、有指导性的述 评，不超 过 6 000 字。3.2“论著”发表具有创新性的研究成果，不超过7 000 字（含摘要、图表和参考文献）。3.3“综述”主要以近1 3 年国内外知名
49、期刊论文为基础，不超过 6 000 字。3.4“技术方法”交流具有创新性的实验新技术和方法改进。方法介绍要详细、要突出创新和改进。组织学技术务必附照片。不超过3 000 字。3.5“教学研究”主要交流国内教学研究的创新性经验和研究成果，不超过3 000 字。3.6“问题讨论”主要交流学科建设、专业人才培养成果和教材撰写经验及其使用体会等，不超过3 000 字。3.7“变异畸形”发表未报道的人体变异或畸形，须提供审稿的照片，不讨论，不要参考文献，不超过700 字。4 文字和名词 文稿应精炼，语法和拼写正确，用词造句、行文等方面达到出版水准。在正文和摘要中，首次出现英文缩略语、略称、代号时必须写出
50、中英文全称，在括号内写英文全称、缩写或代号。国际学术界常用的英文词语可缩写，可参照有关缩略语词典。缩略语尽量少用，不超过5 个汉字的名词一般不用缩略语。不能随意创造非习惯、非常用的缩写词，以免给读者阅读造成困难。文稿内使用的名词以科学出版社出版的全国自然科学名词审定委员会公布的名词为准。5 文题名 文稿题名应简明，能反映论文核心内容，不宜超过20 个字。英文题目不超过150 个字母和空格。文题内不得使用未被国际公认的缩略语和英文简写，一般不使用副题名，避免用“的研究”、“的观察”和“的探索”等没有实质意义的词语。6 作者姓名和单位 作者姓名应全部列出，置于题名下方，不宜超过8 名，应是参与选题
