1、申请代码：受理部门： 收件日期：受理编号：检 查 保 护国家自然科学基金申 请 书资助类别： 亚类说明： 附注说明： 项目名称： 申 请 者： 电话： 依托单位： 通讯地址： 邮政编码： 单位电话： 电子邮件： 申报日期： 2004 年 3 月 12 日国家自然科学基金委员会您现在不能检查保护文档或打印文档，请根据以下三个步骤操作：1)如果您是 Word2000 或以上版本用户，请把 Word 宏的安全性设为:“中“方法: Word 菜单-工具-宏-安全性-安全级,设置为“中“(如果您是 Word97 用户，继续执行以下步骤)2)关闭本文档，重新打开本文档3)点击“启用宏“按钮，即可开始填写本
2、文档或打印了国家自然科学基金申请书第 2 页 版本 1.005.544基本信息 yoKWWfXs姓名 汪 灏 性别 男 出生年月 1971 年 1 月 民族 汉族学位 博士 职称 主治医师 主要研究领域 营养及移植免疫 电话 025-80860962 电子邮件 传真 个人网页 工作单位 中国人民解放军南京军区南京总医院 /普通外科研究所申 请 者 信 息在研项目批准号 名称 中 国 人 民 解 放 军 南 京 军 区 南 京 总 医 院 代 码 21000290 联系人 郑均 电子邮件 依托单位信息电话 025482680858225 网站地址 单 位 名 称 代 码在 此 录 入 修 改
3、 合作单位信息在 此 录 入 修 改 项目名称 -3多 不 饱 和 脂 肪 酸 对 树 突 状 细 胞 成 熟 及 其 细 胞 内 信 号 传 导 通 路 的 影 响资助类别 面上项目 亚类说明 青年科学基金项目 附注说明 申请代码 C03010301:营养学 C03020504:移植免疫学基地类别 预计研究年限 2004 年 4 月 2006 年 4 月 研究属性 基础研究 项 目 基 本 信 息摘 要项目研究内容和意义简介（限 400 字）：本课题以人外周血单核细胞来源的树突状细胞为研究对象,从细胞膜结构组成，细胞免疫表型,抗原提呈功能以及相关细胞因子的表达等多方面观察 -3 多不饱和脂肪
4、酸对树突状细胞功能的影响,并对树突状细胞内 p38 SAP 激酶信号通路的影响进行初步探讨。以明确-3 PUFAs 对树突状细胞的抑制作用及其可能机制。从而为树突状细胞寻求一种简单有效的抑制性物质。以期为 -3 多不饱和脂肪酸在临床器官移植领域的应用提供理论依据。关 键 词(用分号分开，最多 5 个) -3 多不饱和脂肪酸；树突状细胞;信号传导 国家自然科学基金申请书第 3 页 版本 1.005.544项目组主要成 员 (杰 出 青 年 科 学 基 金 不 填 此 栏 )编号 姓 名 出生年月 性别 职 称 学 位 单位名称 电话 电子邮件 项目分工每年工作时间（月）1郝 群 1973-4-1
5、3 女 主治医师 博士 中国人民解放军南京军区南京总医院 025-80860452 细胞培养 5 2于 宝 军 1968-12-19 男 副主任医师 博士中国人民解放军南京军区南京总医院 025-80860064 northern 杂交 4 3乔 安 意 1967-12-12 男 主治医师 博士 中国人民解放军南京军区南京总医院 025-80860962 western 杂交 5 4刘 放 南 1956-5-12 女 副主任技师 其他中国人民解放军南京军区南京总医院 025-80860064 脂肪酸的检测 3 5在 此 录 入 修 改 6在 此 录 入 修 改 7在 此 录 入 修 改
6、 8在 此 录 入 修 改 9在 此 录 入 修 改 总人数 高级 中级 初级 博士后 博士生 硕士生5 2 1 2 说明: 1. 高级、中级、初级、博士后、博士生、硕士生人员数由申请者负责填报，总人数自动生成。说明: 2. 项目组主要成员不包括项目申请者。国家自然科学基金申请书第 4 页 版本 1.005.544经费申请表 （金额单位：万元）科目 申请经费 备注（计算依据与说明）一.研究经费 18.5000 1.科研业务费 3.5000 （1）测试/计算/分析费 1.5000 （2）能源/动力费 0.5000 （3）会议费/差旅费 0.5000 （4）出版物/文献/信息传播费 0.5000
7、（5）其它 0.5000 2.实验材料费 13.0000 （1）原材料/试剂/药品购置费 12.5000 （2）其它 0.5000 3.仪器设备费 0.5000 （1）购置 0.5000 （2）试制 4.实验室改装费 1.0000 5.协作费 0.5000 二.国际合作与交流费 1.0000 1.项目组成员出国合作交流 1.0000 2.境外专家来华合作交流 三.劳务费 0.5000 四.管理费 0.5000 合 计 20.5000 国家其他计划资助经费 0.0000其他经费资助（含部门匹配） 0.0000与本项目相关的 其他经费来源其他经费来源合计 0.0000国家自然科学基金申请书第 5
8、页 版本 1.005.544报告正文查 看 报 告 正 文 撰 写 提 纲（一）立项依据与研究内容（4000-8000 字）： 1、 项目的立项依据（ 附主要的参考文献目 录 ）。移植排斥反应是目前器官移植领域所面临的一大难题 ,诱导移植耐受是人们在器官移植中的追求目标。近年来 ,随着移植免疫反应机制研究的逐步深入 ,人们发现树突状细胞（Dendritic cells,DCs）的成熟状态是机体诱导移植排斥反应或是诱导移植耐受的关键环节 1。树突状细胞是机体的专职抗原提成细胞，其在外周组织遭遇供体器官来源的抗原后，将其吞噬并提呈于细胞表面，并通过引流淋巴管移行至次级淋巴组织。同时，在炎症因子或内
9、毒素 LPS 等因素的作用下，树突状细胞逐渐成熟并高表达 MHC 分子和共刺激分子 CD40、CD80、CD86 等，成熟树突状细胞通过 MHC 分子及共刺激分子分别向 T 细胞提供第一信号和第二信号,并通过 IL-12 的分泌共同导致抗原特异性初始型 Th 细胞的激活 ,并发育为效应性 T 细胞及记忆性 T 细胞。由此 ,淋巴结内抗原特异性初始型 T 细胞 ,可以不需要直接与抗原物质接触 ,就被抗原特异性致敏。大量研究发现，采用非成熟 DCs即阻断 DCs 共刺激信号的表达及 IL-12 的分泌，可以特异性诱导受体 T 细胞失活或无能，进而诱导对移植物的免疫耐受 2，3 。因此，寻求各种方法
10、阻断 DCs 的成熟已成为诱导 T 细胞无能和免疫耐受的有效途径之一。-3 多不饱和脂肪酸（-3 polyunsaturated fatty acids, -3 PUFAs）是人体的必需脂肪酸之一，主要包含二十碳五烯酸( eicosapetaenoic acid，EPA)和二十二碳六烯酸 ( docosahexaeoic ，DHA) , 鱼油中富含 EPA 和 DHA。在临床实践中人们发现，-3 多不饱和脂肪酸作为人体的营养物质，不但可以在体内氧化供能，而且对类风湿性关节炎，溃疡性结肠炎等多种自体免疫性疾病具有一定的治疗作用，可以缓解上述疾病的病程进展 4。提示其可能与自体免疫反应的抑制有关。
11、进一步的研究证实，-3 PUFAs 可以在体内，体外对 T 细胞淋巴细胞产生明显抑制作用。-3 多不饱和脂肪酸可以降低 T 细胞 IL-2 的分泌水平，抑制丝分裂素诱导的 T 细胞增殖和抗原特异性的迟发型过敏性反应 5，6 ，-3 PUFAs 融入到脂质双分子层，可以显著改变 T 淋巴细胞的细胞膜脂质的磷脂的组成，影响细胞膜的流动性，并发现这一结构上的改变可能是导致细胞内信号传导途径变化的原因 7。以上结果提示 -3 PUFAs 是调节机体免疫功能的一种重要因子，有可能在抗免疫排斥反应中具有很大的应用潜能。国家自然科学基金申请书第 6 页 版本 1.005.544-3 PUFAs 对树突状细胞
12、成熟及功能的确切影响目前还没有明确的结论。鉴于-3 PUFAs 对 T 淋巴细胞功能的抑制及细胞膜脂质结构的影响，我们因此提出如下假设：-3 PUFAs 对树突状细胞的成熟及功能也可能具有潜在的抑制作用,并且这种抑制作用与 -3 PUFAs 对树突状细胞的成熟过程中信号传导通路的干预有关。细胞的一切生命活动都与信号传导有关。在目前人们研究的数条细胞信号通路中，丝裂原活化蛋白激酶家族即 MAPK 信号通路参与了细胞生长、发育、分裂及细胞间的功能同步等多种生理过程，是细胞信号传导研究的热点领域。在真核细胞中 ,已确定出四条 MAPK 信号转导通路 ,即 ERK 通路、JNK 通路、 p38 通路和
13、 ERK5 通路。大量资料证实 ,细菌内毒素 (LPS)与其受体结合后可通过细胞内酪氨酸激酶或 G 蛋白耦联的信号途径激活细胞内 MAPK 激酶,最终导致各种转录因子的核转录。p38 是 MAPK 家族最重要的成员之一，是 LPS 诱导细胞反应的重要信号环节。由于在人的许多细胞因子基因的启动子上存在多种转录因子的结合位点 ,而这些转录因子又是 p38 的磷酸化作用底物 ,因此 p38 就是通过活化这些转录因子来调节细胞因子的基因转录。LPS 刺激、生理应激等因素均可导致细胞内 p38 的迅速活化,进而诱导下游细胞因子的产生及各种细胞反应。已有研究表明，p38 激酶在 LPS、TNF-a 或 C
14、D40 配体诱导的树突状细胞的成熟过程中具有重要的作用。采用 p38 激酶特异性的阻滞剂 SB203580 孵育树突状细胞，可以显著的阻断由 LPS 或 TNF-a 诱导的细胞成熟，其 CD80、CD86 等共刺激分子的表达及 T 细胞刺激能力明显下降 8，9 。可以认为，p38 激酶信号通路是树突状细胞成熟过程中最重要的一条信号通路，与树突状细胞的抗原提呈和 T 细胞刺激功能密切相关。近期已经有研究提示 -3 PUFAs 可以在细胞内信号传导水平干预 T 细胞的功能。但 -3 PUFAs 对细胞内 p38 激酶通路的影响尚无任何研究。因此，本课题拟以人外周血单核细胞来源的树突状细胞为研究对象
15、,从细胞膜结构组成，细胞免疫表型,抗原提呈功能以及相关细胞因子的表达等多方面观察 -3 多不饱和脂肪酸对树突状细胞功能的影响,并对其细胞内 p38 SAP 激酶信号通路的影响进行初步探讨。以明确 -3 多不饱和脂肪酸对树突状细胞的抑制作用，以期为 -3 多不饱和脂肪酸在临床器官移植领域的应用提供理论依据。主要参考文献1.Gad M, Claesson MH, Pedersen AE et al. Dendritic cells in peripheral tolerance and immunity. APMIS. 2003,111(7-8):766-7752.Toungouz M, Donc
16、kier V, Goldman M. Tolerance induction in clinical transplantation: the pending questions. Transplantation. 2003,75(9):58-60. 国家自然科学基金申请书第 7 页 版本 1.005.5443. Steinman RM, Hawiger D, Nussenzweig MC. Tolerogenic dendritic cells. Annu Rev Immunol. 2003,21:685-711. 4. Cleland LG, James MJ and Proudman S
17、M. The role of fish oils in the treatment of rheumatoid arthritis. Drugs. 2003;63(9):845-853.5.Arrington JL, McMurray DN, Switzer KC et al. Docosahexaenoic Acid Suppresses Function of the CD28 Costimulatory Membrane Receptor in Primary Murine and Jurkat T Cells. J Nutr. 2001,131:1147-1153.6. Pompos
18、LJ and Fritsche KL. Antigen-driven murine CD4+ T lymphocyte proliferation and interleukin-2 production are diminished by dietary (n-3) polyunsaturated fatty acids. J Nutr. 2002 ,132(11):3293-3300.7. Fan YY, McMurray DN, Ly LH et al. Dietary (n-3) polyunsaturated fatty acids remodel mouse T-cell lipi
19、d raftsJ. J Nutr. 2003 ,133(6):1913-1920.8. Kirit M. Ardeshna, Arnold R et al. The PI3 kinase, p38 SAP kinase, and NF-Kb signal transduction pathways are involved in the survival and maturation of lipopolysaccharide -stimulated human monocyte-derived dendritic cells. Blood, 2000, 96 (3):1039-10469.
20、Amaya PK, Miguel R, Oskar FC et al. Extracellular signal-regulated protein kinase signaling pathway negatively regulates the phenotypic and functional maturation of monocyte-derived human dendritic cells. Blood, 2001, 98(7): 2175-2182 2、 项目的研究内容、研究目标,以及拟解决的关键问题。主 要 研 究 内 容 ：第一部分 人外周血单核细胞来源的 DCs 细胞的诱
21、导，培养及鉴定。外周全血分离白膜，GM-CSF，IL-4,LPS 诱导分化 DC,流式细胞术鉴定其细胞表型。第二部分 -3 多不饱和脂肪酸对 DCs 细胞膜脂质组成结构的影响观察 -3 多不饱和脂肪酸（EPA 和 DHA， ）对 DCs 细胞细胞膜脂质成分变化的影响。（气相色谱法）,探讨 DCs 体外培养条件下, -3 多不饱和脂肪酸是否可以直接改变细胞膜脂质的构成。第三部分 -3 多不饱和脂肪酸对 DCs 表型，抗原提呈功能及细胞因子分泌的影响: 1. 研究 -3 多不饱和脂肪酸（EPA 和 DHA）对 DCs 抗原提呈能力变化的影响。（混合淋巴细胞反应 H3法）2.观察 -3 多不饱和脂肪
22、酸（EPA 和 DHA）对 DCs 细胞免疫表型CD1a、CD40、CD80、CD83 、CD86 及 HLA-DR 表达率的影响,以期明确对 DCs 成熟和抗原提呈功能起重要作用的相关免疫因子的表达情况.（流式细胞术检测）3.研究 -3 多不饱和脂肪酸（EPA 和 DHA）对 DCs 细胞分泌 IL-12，IL-10 及 TNF-国家自然科学基金申请书第 8 页 版本 1.005.544a 的影响。 （northern blot 及 ELISA）,观察多不饱和脂肪酸是否可能通过对相关细胞因子的分泌影响了 T 细胞的 Th1/ Th2 平衡，这一平衡是机体细胞免疫增强或减弱的重要原因。第四部分
23、 -3 多不饱和脂肪酸对 LPS 诱导的 DCs 成熟过程中 p38 SAP 激酶信号传导通路的干预作用:研究 -3 多不饱和脂肪酸（EPA 和 DHA）对 DCs 细胞内 p38 SAP 激酶的影响（western blot） 。p38 SAP 信号通路参与了 LPS 诱导的 DCs 的成熟，p38 SAP 的激活可以导致许多重要的细胞因子和趋化因子基因的转录。了解 -3 多不饱和脂肪酸对p38 SAP 信号通路的影响将使我们能够从机制上解释 -3 多不饱和脂肪酸对树突状细胞潜在的抑制性作用。研究目标：通过本课题研究，希望了解 -3 多不饱和脂肪酸是否能够改变 DCs 细胞的免疫表型和抗原提
24、呈功能，并明确这种改变是否和 DCs 胞膜上脂质成分的改变以及细胞内信号转导途径 p38 SAP 激酶的参与有关。从而确定 -3 多不饱和脂肪酸对 DCs 的免疫功能的影响及可能的机制.本项目的完成，将进一步明确 -3 多不饱和脂肪酸对机体免疫系统的影响，使器官移植的术后营养支持的使用更有针对性，并可能为将来使用免疫营养制剂替代或部分替代目前价格昂贵,副作用明显的免疫抑制药物提供了可能.重 点 解 决 问 题 ：1.树 突 状 细 胞 细 胞 膜 脂 质 成 分 的 分 离 ， 提 取 及 各 种 脂 肪 酸 含 量 的 分 析 ；2.树 突 状 细 胞 非 成 熟 状 态 及 成 熟 状 态
25、 的 诱 导 ， 维 持 及 鉴 定 标 准 ；3.细 胞 内 p38 SAP 激酶磷酸化的检测。3、 拟采取的研究方案及可行性分析。研 究 步 骤第一部分 人外周血单核细胞来源的 DCs 细胞的诱导，培养及鉴定。外周全血分离白膜，帖壁法获取单核细胞，加入 GM-CSF，IL-4 诱导 DCs 的形成,培养第 7 天加入 LPS 诱导 DCs 的成熟,流式细胞术鉴定其细胞表型。第二部分 -3 多不饱和脂肪酸对 DCs 细胞膜脂质组成结构的影响分为 EPA、DHA、硬脂酸及空白对照四个组，将以上物质分别于细胞培养第五天加国家自然科学基金申请书第 9 页 版本 1.005.544入细胞培养液，作用
26、 48 小时后再加入 LPS 诱导 DCs 的成熟，然后获取细胞膜，气相色谱法分析 -3 多不饱和脂肪酸及其他脂肪酸的组成含量。第三部分 -3 多不饱和脂肪酸对 DCs 表型，抗原提呈及 T 细胞刺激能力功能的影响。细胞分组及处理同第二部分。收获细胞后，采用流式细胞术检测 -3 干预组和对照组之间 DCs 细胞表型 CD1a、CD40、CD80、CD83 、CD86 及 HLA-DR 表达情况。采用northern blot 及 ELISA 分别检测 IL-12、IL-10 及 TNF-a 的细胞内基因水平及细胞外分泌能力。采用混合淋巴细胞反应 H3法检测 DCs 刺激同种异体 T 细胞增殖的
27、能力。第四部分 -3 多不饱和脂肪酸（EPA 和 DHA）对 DCs 细胞内 p38 SAP 信号通路的影响分为 EPA、DHA、硬脂酸、空白对照及 SB203580（p38 SAP 阻滞剂）五个组，于细胞培养第五天将以上物质分别加入细胞培养液，作用 48 小时后再加入 LPS 诱导 DCs 的成熟后提取细胞蛋白，采用抗 p38 SAP 抗体和抗磷酸化的 p38 SAP 抗体分别检测 p38 SAP激酶和磷酸化的 p38 SAP 激酶的含量。技术路线结论树突状细胞的诱导，培养及鉴定细胞培养液中分别加入EPA，DHA 或对照检测细胞膜脂质组成成分观察 DCs 表型和抗原提呈能力检测 DCs 细胞
28、因子的分泌能力检测 p38 激酶的磷酸化国家自然科学基金申请书第 10 页 版本 1.005.544研 究 可 行 性 分 析 ：项 目 申 请 者 长 期 致 力 于 树 突 状 细 胞 的 临 床 、 科 研 研 究 ， 熟 悉 该 领 域 的 研 究 基 础及 发 展 动 态 ， 并 已 经 在 该 领 域 以 第 一 作 者 撰 写 和 发 表 多 篇 论 文 。 项 目 组 成 员 均 接 受 过比 较 正 规 及 全 面 的 科 研 训 练 ， 熟 练 掌 握 实 验 所 必 需 的 细 胞 生 物 学 及 分 子 生 物 学 实 验 技术 ； 本 研 究 所 为 全 军 普 通
29、外 科 研 究 所 和 普 通 外 科 国 家 重 点 实 验 室 ， 在 营 养 支 持 治 疗 和小 肠 移 植 方 面 具 有 丰 富 的 临 床 积 累 ， 治 疗 效 果 显 著 ， 实 验 室 设 备 先 进 、 齐 全 ， 能 满 足该 研 究 所 需 要 的 设 备 条 件 ， 部 分 指 标 在 校 内 其 他 实 验 室 均 可 完 成 检 测 ； 以 上 条 件 可 以保 证 该 研 究 的 顺 利 进 行 。4、 本项目的特色与创新之处。树突状细胞的成熟状态是机体诱导移植排斥反应或是诱导移植耐受的关键环节。该课题研究 -3 多不饱和脂肪酸对树突状细胞成熟和功能的影响并试
30、图阐明其可能作用机制，这一结果可能为我们提供一条通过抑制树突状细胞诱导移植耐受的新方法。这一课题的研究将有助人们进一步理解 -3 PUFAs 造成免疫抑制的原因,从而为 -3 PUFAs 在临床免疫移植排斥反应中的应用提供理论依据。该课题所涉及的领域也是当前移植免疫研究中的重点和前沿，从小分子物质 -3 PUFAs 的角度来探讨其对树突状细胞成熟的影响，并对其相关信号转导机制进行研究具有一定的原始创新性，在该领域的国内外研究中尚未见报道。5、年度研究计划及预期研究结果。2004.042004.05 订购试剂、相关试验条件准备2004.062004.08 外周血 DC 分离、诱导培养及鉴定；20
31、04.082005.01 DCs 细胞膜脂质组成结构的检测；2005.012005.06 -3 多不饱和脂肪酸对 DCs 表型，抗原提呈及 T 细胞刺激能力功能的影响的检测；2005.7 2005.12 DCs 细胞内 p38 SAP 信号通路的分析。2006.012006.04 试验数据的整理、统计分析；试验结题报告、研究论文的书写及交流、投稿预期结果：-3 PUFAs 在多方面抑制了树突状细胞的成熟和功能，这种抑制作用与 -3 PUFAs 对细胞膜脂质成分的改变和细胞内信号通路 p38 激酶的参与有关。国家自然科学基金申请书第 11 页 版本 1.005.544（二）研究基础与工作条件1、
32、 工作基础项目申请者长期从事树突状细胞的临床应用及基础研究,熟悉树突状细胞的研究方法,对相关研究的国内外最新动态能近快了解.能够熟练的进行 DCs 的体外诱导和培养,掌握流式细胞检测技术，northern 杂交技术,western 杂交等常用实验技术。南京军区总医院普通外科研究所是国家卫生部临床药理基地（营养支持专业） ，全军器官移植重点实验室，江苏省代谢与营养重点实验室。学术带头人为著名普通外科专家黎介寿院士。长期从事肠内肠外营养的临床应用。本所先后获得全国科学大会奖、全军专业技术重大贡献奖、国家科技进步二等奖、军队科技进步一等奖、军队医疗成果一等奖、军队科技进步二等奖、国家教委与省级科技进
33、步二等奖等各种奖励 25 项。2、 工作条件本研究所涉及的细胞培养, 流式细胞检测等相关仪器（超净台，孵箱， PCR 扩增仪，稳压稳流电泳仪 ，凝胶摄像分析系统 ，高速冷冻离心机，紫外-可见分光光度计，流式细胞检测等相关仪）已基本到位。 northern 杂交所需相关器材可以进一步购买添置.分析脂质成分的高效气相色谱仪有专人操作,技术上有一定保证。实验所需各种单抗,荧光抗体,试剂盒,各种细胞因子,酶类均可从各试剂公司购买获得。诱导 DCs 所需健康成人外周血可从我院血库购买获得.3、 申请人简历汪灏，男，33 岁。 临床医学（普通外科）专业，博士后。1994 年毕业于第一军医大学医疗系。200
34、1 年获第三军医大学普通外科专业博士学位。现任南京军区南京总医院普通外科主治医师。研究生阶段分别主持完成了“肿瘤细胞对树突状细胞功能影响的研究” 及“树突状细胞疫苗抗胃癌作用的临床应用研究”等科研项目。自 2000年至今以第一作者发表或投稿论文 9 篇，其中英文论著 2 篇。2003 年获王宽成教育基金博士后奖学金一项。目前已投稿或发表的文章:1.汪灏.树突状细胞疫苗在肿瘤免疫治疗中的作用. 免疫学杂志 2000.08 128-130 2.汪灏 郝群. DC 疫苗在肿瘤临床治疗中的应用进展. 中国肿瘤临床 2003.12 901-9043.汪灏 余佩武 曾冬竹等. 临床用 DC 疫苗的制备及检
35、测. 第三军医大学学报 2004. 9 4.汪灏 余佩武 王月禾等. 树突状细胞疫苗对胃癌术外周血 IL-12 及 Th1/Th2 平衡的影响.中华普通外科杂5.汪灏 余佩武 张 坤 等. 树突状细胞疫苗对胃癌患者术后疗效的初步观察 . 中华胃肠外科杂国家自然科学基金申请书第 12 页 版本 1.005.544志6.汪灏 余佩武 曾冬竹等. 树突状细胞疫苗治疗胃癌患者后肿瘤特异性免疫反应的诱导. 中华肿瘤杂志7.汪灏 郝 群 曾冬竹等. 肿瘤细胞培养上清对 DC 细胞凋亡诱导的研究. 重庆医学.8. Wang hao, hao qun，yu peiwu. Induction of Tumor
36、Specific Immune Response in Patients With Gastric Carcinoma After Vaccination With Tumor Antigen Pulsed Dendritic Cells. Chinese Journal of Medicine 9. Wang hao, hao qun, yu peiwu. Clinical and immunological effects of dendritic cells vaccine on patients with gastric cancer. World Journal of Gastroi
37、ntential.郝群 ，女，汉族， 医学博士。1994 年毕业于徐州医学院临床医学系获学士学位。2003 年毕业于上海复旦大学医学院妇产科专业获博士学位。目前在南京军区南京总医院任主治医师。主要从事妇科免疫方面的研究工作。近年已发表论文十余篇。主要负责细胞流式检测工作。于宝军，男，汉族，医学博士。1993 年毕业于第二军医大学，获学士学位，2001年毕业于第二军医大学获博士学位。2003 年 5 月在南京军区南京总医院博士后工作站工作期满出站。现在南京军区南京总医院普通外科研究所，主要从事外科感染、脓毒症、移植免疫分子机制的研究工作。近年发表论文二十余篇。负责转染表达及蛋白印记分析工作。4、
38、 承担科研项目情况研究生阶段完成了 “肿瘤细胞对树突状细胞功能影响的研究” 及“树突状细胞疫苗抗胃癌作用的临床应用研究”2 项科研项目。目前正在参与国家 973 项目：小分子物质与移植物慢性失功的研究。国家自然科学基金申请书第 13 页 版本 1.005.544签字和盖章页(此页不用填写!) 检 查 保 护申 请 者：汪灏 依托单位：中国人民解放军南京军区南京总医院 项目名称：-3 多不饱和脂肪酸对树突状细胞成熟及其细胞内信号传导通路的影响 资助类别：面上项目 亚类说明：青年科学基金项目 附注说明： 申请者承诺：我保证申请书内容的真实性。如果获得基金资助，我将履行项目负责人职责，严格遵守国家自
39、然科学基金委员会的有关规定，切实保证研究工作时间，认真开展工作，按时报送有关材料。若填报失实和违反规定，本人将承担全部责任。签字： 项目组主要成员承诺：我保证有关申报内容的真实性。如果获得基金资助，我将严格遵守国家自然科学基金委员会的有关规定，切实保证研究工作时间，加强合作、信息资源共享，认真开展工作，及时向项目负责人报送有关材料。若个人信息失实、执行项目中违反规定，本人将承担相关责任。编号 姓 名 工作单位名称 项目分工每年工作时间(月)签 字1 郝群 中国人民解放军南京军区南京总医院 细胞培养 5 2 于宝军 中国人民解放军南京军区南京总医院 northern 杂交 4 3 乔安意 中国人民解放军南京军区南京总医院 western 杂交 5 4 刘放南 中国人民解放军南京军区南京总医院 脂肪酸的检测 3 56789依托单位及合作单位承诺：已按填报说明对申请人的资格和申请书内容进行了审核。申请项目如获资助，我单位保证对研究计划实施所需要的人力、物力和工作时间等条件给予保障，严格遵守国家自然科学基金委员会有关规定，督促项目负责人和项目组成员以及本单位项目管理部门按照国家自然科学基金委员会的规定及时报送有关材料。依托单位公章 合作单位公章 1 合作单位公章 2 日期： 日期： 日期：
