1、第五章 细菌的遗传分析 一、 细菌的一般特性及基因组,细菌的培养方式,大 肠 杆 菌,E.coli 4.6Mb. 4288genesE.coli K12 DNA sequence，1997 90% encode protein8 locations of remnants of bacteriophage genomes.Insertion sequences (IS),大肠杆菌基因组结构,二、大肠杆菌的有性生殖 1、F质粒的结构 （1）转移区（transfer region） （2）复制区（replication region） （3）插入区（insertion region）,2、F质粒在
2、细胞内的存在形式,三、大肠杆菌的突变型及其筛选,四、接合与染色体作图,杂交实验 Lederberg 和 Tatum 1946 , E.coli K12,U型管实验排除转化,2、 F+F-,3、Hfr F-,4、F F-,五、 中断杂交试验（interrupted mating experiment）和基因定位 1957，Wollman and Jacob,六、转化（transformation）和转导作图 （一）转化 概念：转化是指某一基因型的细胞从周围介质中吸收来自另一基因型细胞的DNA而使受体的基因型和表型发生相应变化的现象。 1、自然转化 感受态的出现 双链DNA的接合和进入 DNA的整
3、合,2、人工转化 PEG介导的转化 电穿孔法 基因枪法,（三）利用转化绘制遗传图,（二）、转导 概念：以噬菌体为媒介，将供体菌的部分DNA转移到受体菌内的现象。 1、普遍性转导（generalized transduction) （1）转导现象的发现 1951年，J.Lederberg 和 N.Zinder沙门氏菌 用Phe- trp- tyr- his 与 Phe trp tyrhis- 原养型菌落10-5 回复突变率为10-8,U型管实验 A:Phe- trp- tyr- his 与B: Phe trp tyrhis-,可滤因子（FA）,FA与沙门氏菌的温和噬菌体P22在生物学特性上的一致
4、性： (1)P22的侵染力与和FA的遗传力均可被脱氧核糖核酸酶和胰蛋白酶破坏 (2)用抗P22或用加热的处理均可使P22的侵染力和FA的遗传能力失活，失活速率相同。 (3)用抗P22的菌株作亲本进行上述混合培养，FA丧失侵染能力，不能出现重组体。 (4)P22和FA在大小和质量上相同。,FA的生物学特性,普遍性转导（generalized transduction),A 细菌,B 细菌,进入裂解周期时， 由于噬菌体颗粒的 错误包装，将A菌 部分染色体片段 包装入噬菌体，形成 转导噬菌体。,普遍性转导的应用 共转导 是指两个处在同一个转导片段上的基因一起整合进受体染色体中。共转导频率越高，两个基因间的距离越近，连锁越紧密。 共转导判断基因间连锁关系,2、局限性转导（specialized transduction) 只能使供体一个或少数几个基因转移到受体的转导作用称为局限性转导。 以噬菌体为例：,噬菌体简介 （1）形态及遗传物质,相关功能的基因聚集成簇,七、细菌同源重组的机制,（一）细菌同源重组的特点 （二）细菌同源重组的分子基础 1、重组热点chi序列5 GCTGGTGG 33 CGACCACC 5 2、重组相关的酶RecBCD, RecA, RuvA, RuvB, RuvC,
