1、2 0 9 CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESIS论 著癌变 畸变 突变2023 年 5 月 第 35 卷 第 3 期剪接因子SF 2/ASF在胰腺癌中的表达及其临床意义孟 琳1，杨华宇1，马秀梅1，2，*(1 内蒙古医科大学，内蒙古 呼和浩特 010110；2 内蒙古医科大学附属医院，内蒙古呼和浩特 010050)Expression of the splicing factorSF2/ASF in pancreatic cancertissues and its relationship withclinicopathological featur
2、esMENGLin1,YANGHuayu1,MAXiumei1,2,*(1.Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010110;2.AffiliatedHospital of Inner Mongolia Medical University,Hohhot 010050,Inner Mongolia,China)收稿日期：2023-03-08；修订日期：2023-04-26基金项目：内蒙古自治区自然科学基金(2018 MS 08021)作者信息：孟 琳，E-mail：1063623418。*通 信 作 者，马 秀 梅，E-mail：doctormax
3、iumei 0471【摘 要】目 的：探 讨 胰 腺 癌 组 织 中 剪 接 因 子 2/选 择 性 剪 接 因 子(SF 2/ASF)的 表 达，及 其 与 抑 癌 基 因 P 53(突 变 型)、增 殖 标 志 物 Ki 67 和患 者 临 床 病 理 指 标 之 间 的 相 关 性。方 法：采 用 GEPIA 数 据 库 分 析 350 例 胰 腺 癌 组 织 和 癌 旁 正 常 组 织 中 SRSF 1 基 因(SF 2/ASF 的 编 码 基因)的 表 达 差 异，以 及 SRSF 1 与 TP 53 和 MKi 67(Ki 67 的 编 码 基 因)的 相 关 性；采 用 免 疫
4、组 织 化 学 法 检 测 60 例 胰 腺 癌 组 织 及 对 应 的 癌 旁正 常 组 织 中 SF 2/ASF、突 变 型 P 53 和 Ki 67 蛋 白 的 表 达，采 用 Pearson 相 关 性 分 析 研 究 SF 2/ASF 与 突 变 型 P 53 和 Ki 67 的 相 关 性，以 及SF 2/AFS 蛋白表达水平 与胰腺癌患者 临床病理学指 标的关系；采用 Cox 比例风险回归 模型进行预后 分析。结果：GEPIA 数据库分析结 果 表 明，与 癌 旁 正 常 组 织 相 比，SRSF 1 基 因 在 胰 腺 癌 组 织 中 的 表 达 水 平 显 著 升 高(P 0
5、.01)，SRSF 1 与 TP 53 和 MKi 67 的 表 达 水 平 均相 关(r 分 别 为 0.28 和 0.32，均 为 P 0.01)；免 疫 组 化 检 测 结 果 显 示，与 癌 旁 正 常 组 织 相 比，SF 2/ASF 蛋 白、突 变 型 P 53 和 Ki 67 蛋 白 在胰 腺 癌 组 织 中 的 表 达 水 平 显 著 升 高(P 0.01)。Pearson 相 关 性 分 析 结 果 表 明 胰 腺 癌 组 织 中，SF 2/ASF 蛋 白 表 达 水 平 与 突 变 型 P 53 蛋 白及 Ki 67 增 殖 指 数 有 关(r 分 别 为-0.386 和
6、0.275，均 为 P 0.05)。卡 方 检 验 结 果 表 明 SF 2/ASF 在 胰 腺 癌 中 的 表 达 水 平 与 胰 腺 癌 分 化 程度、淋 巴 结 转 移 情 况 以 及 有 无 远 端 脏 器 转 移 有 关(均 为 P 0.05)。Cox 风 险 回 归分 析 表 明，SF 2/ASF 高 表 达 和 患 者 年 龄 是 影 响 患 者 总 生 存 期 的 独 立 危 险 因 素(均 为 P 0.01)。结 论：SF 2/ASF、突 变 型 P 53 和 Ki 67 蛋 白在 胰 腺 癌 中 高 表 达，且 SF 2/ASF 的 表 达 与 突 变 型 P 53 和 K
7、i 67 具 有 相 关 性，提 示 SF 2/ASF 有 望 成 为 胰 腺 癌 诊 治 的 新 靶 点。【关键词】胰腺癌；剪接因子 2/选择性剪接因子；突变型 P 53；Ki 67；免疫组织化学中图分类号：R 735.9 文献标志码：A 文章编号：1004-616 X(2023)03-0 209-06 doi：10.3969/j.issn.1004-616 x.2023.03.009【ABSTRACT】OBJECTIVE：To investigate expression of the splicing factor 2/alternative splicing factor(SF 2/A
8、SF)in pancreatic cancer tissues and its correlation with oncogene P 53(mutant type)，proliferation markerKi 67 and clinicopathological features.METHODS：Differences in expression of the SRSF 1 gene(the geneencoding SF 2/ASF)in 350 pancreatic cancer tissues and normal tissues adjacent to the cancer wer
9、e evaluatedbased on GEPIA database analysis；and correlations with SRSF 1 and TP 53 and MKi 67 were analyzed.Inaddition，expression of SF 2/ASF，mutant P 53 and Ki 67 protein in 60 pancreatic cancer tissues andcorresponding normal tissues were evaluated，as well as correlations between SF 2/ASF and muta
10、nt P 53 andKi 67 using Pearson correlation analysis，and correlations between SF 2/AFS protein expression levels andclinicopathological indices of pancreatic cancer patients，and prognostic analysis using Cox proportional riskregression model.RESULTS：Results from our database analysis show that expres
11、sion of the SRSF 1 gene wassignificantly higher in pancreatic cancer tissues compared with normal tissues(P 0.01)，and expression of theSRSF 1 was correlated with both TP 53 and MKi 67(r=0.28 and 0.32，respectively，both P 0.01).Results fromthe immunohistochemical assay and the Pearson correlation anal
12、ysis show that SF 2/ASF was correlated withmutant P 53 protein and Ki 67 proliferation index(r=-0.386 and 0.275，respectively，P 0.05)in pancreatic论 著癌变 畸 变 突变2 1 0 CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESISV o l.3 5 N o.3 M a y 2 0 2 3cancer tissues.The chi-square test show that expression of the SF 2/
13、ASF in pancreatic cancer was correlatedwith the degree of pancreatic cancer differentiation(P 0.01)，whether with lymph node metastasis(P 0.01)andthe presence of distal organ metastasis(P 0.05).Cox risk regression analysis show that high expression of SF 2/ASF and patient age(bothP 0.01)were independ
14、ent risk factors for overall patient survival.CONCLUSION：SF 2/ASF，mutant P 53 andKi 67 proteins were highly expressed in pancreatic cancer，and SF 2/ASF correlates with mutant P 53 and Ki 67.Our findings suggest that SF 2/ASF can serve as a new target for pancreatic cancer diagnosis and treatment.【KE
15、Y WORDS】cancerous pancreatic；splicing factor 2/alternative splicing factor；mutant P 53；Ki 67；immunohistochemistry胰 腺 癌 是 目 前 全 球 第 四 大 癌 症 死 亡 原 因，近 年来，胰 腺 癌 的 发 病 率 呈 上 升 趋 势，约 占 肿 瘤 发 病 率 的2%1。胰 腺 癌 早 期 发 病 过 程 不 具 有 特 异 性 症 状，缺 乏早 期 诊 断 和 治 疗 方 法，受 关 注 度 相 对 较 低 2。因 此，探 讨 胰 腺 癌 发 病 原 因，积 极 寻 找 新
16、的 诊 断 标 志 物 和 治疗 靶 点，对 于 降 低 胰 腺 癌 患 者 死 亡 率 和 延 长 患 者 寿 命至关重要。剪 接 因 子 2/选 择 性 剪 接 因 子(splicing factor 2/alternative splicing factor，SF 2/ASF)是 一 种 高 度 保 守的、由 SRSF 1 基 因 编 码 的、参 与 组 成 性 剪 接 和 选 择 性剪 接 的 RNA 结 合 蛋 白，属 于 SR 蛋 白 家 族(serine/arginine-rich protein，SRp)3，被 定 义 为 癌 蛋 白，是 第1 个 被 证 实 与 肿 瘤 直
17、接 相 关 的 剪 接 因 子 4。P 53 是 一 种抑 癌 基 因，该 基 因 的 突 变 或 缺 失 是 导 致 许 多 肿 瘤 发 生的 原 因，50%以 上 的 恶 性 肿 瘤 都 出 现 过 P 53 突 变 5，是病 理 学 中 衡 量 肿 瘤 预 后 的 指 标 之 一。Ki 67 是 细 胞 增 殖的 核 蛋 白 标 记 物，可 表 达 于 除 G 0 期 以 外 的 处 于 其 它细 胞 周 期 的 增 殖 细 胞 中 6，是 判 断 恶 性 肿 瘤 预 后 的 可靠 标 志 物 7。本 实 验 通 过 采 用 生 物 信 息 学 方 法 分 析SRSF 1 基 因 在 胰
18、 腺 癌 组 织 及 癌 旁 正 常 组 织 中 的 表 达 差异，并 使 用 免 疫 组 织 化 学 法 检 测 人 胰 腺 癌 组 织 中 SF 2/ASF、突 变 型 P 53 以 及 Ki 67 蛋 白 的 表 达 情 况，探 讨SF 2/ASF 与 后 两 者 的 相 关 性，分 析 其 表 达 与 胰 腺 癌 患者 临 床 病 理 指 标 及 预 后 的 关 系，为 胰 腺 癌 的 早 期 诊 断和治疗方法的选择提供新思路。1 材料与方法1.1 数据来源GEPIA 数 据 库(http:/gepia.cancer-)是 由 北 京大 学 团 队 研 发，数 据 来 源 主 要 是
19、TCGA 数 据 库。在 首页 输 入 SRSF 1，在 Expression DIY 功 能 中 选 择 Profile，设 定 条 件 Dataste，选 择 PAAD，|log 2(FC)|Cut off 值 设置 为 1.0，q-v a l u e C u t o f f 值 设 置 为 0.0 1，在 D i f f e r e n t i a lMethods 中 选 择 ANOVA，得 出 SRSF 1 基 因 在 胰 腺 癌 组织 和 癌 旁 正 常 组 织 中 表 达 的 散 点 图。在 GEPIA 数 据 库首 页 输 入 SRSF 1，在 Expression DIY 功
20、 能 中 选 择Boxplot，设 定 条 件 Dataste Selection，选 择 PAAD，|log 2(FC)|Cut off 值 设 置 为 1.0，q-value Cut off 值 设 置为 0.01，Jitter Size 值 设 置 为 0.4，Matched Normaldata 中 选 择 Match TCGA normal and GTEx data，得出 SRSF 1 基 因 在 胰 腺 癌 组 织 和 癌 旁 正 常 组 织 中 表 达 的箱 形 图。在 GEPIA 数 据 库 首 页 输 入 SRSF 1，在Correlation 功 能 中 设 定 Gene
21、 1：SRSF 1，Gene 2：Tp 53或 MKi 67(Ki 67 的 编 码 基 因)，在 Correlation Coefficient选 择 Pearson，在 TCGA Tumor 中 选 择 PAAD Tumor，点 击 PLOT，得 出 SRSF 1 基 因 与 TP 53 和 MKi 67 之 间 的相关性。1.2 临床资料选 取 2016 年 1 月 2020 年 12 月 从 内 蒙 古 医 科 大 学附 属 医 院 病 理 中 心 存 档 的 胰 腺 癌 术 后 切 除 组 织 及 其 对应 的 癌 旁 正 常 组 织 共 60 例。男 性 患 者 30 例，女 性
22、患者 30 例；年 龄 13 80 岁；组 织 病 理 分 级(参 考 WHO 分级 标 准)：高 中 分 化 44 例，低 分 化 16 例；淋 巴 结 转 移14 例，无 淋 巴 结 转 移 46 例；远 端 脏 器 转 移 24 例，无远 端 脏 器 转 移 36 例；TNM 病 理 分 期 期 26 例，期 34 例。选 取 其 对 应 的 癌 旁 正 常 组 织 作 为 对 照组。标 本 均 经 10%福 尔 马 林 固 定，常 规 石 蜡 包 埋，4 m 厚 连 续 切 片。所 有 标 本 经 病 理 检 查 均 明 确 诊 断 为胰 腺 导 管 腺 癌。采 用 电 话 采 访 的
23、 方 式 对 入 选 患 者 进 行随 访，随 访 开 始 时 间 为 出 院 日 期，随 访 结 束 时 间 为 术后 死 亡 时 间 或 随 访 截 止 日 期，即 2022 年 9 月 1 日，随访 时 间 范 围 为 1 48 个 月，中 位 随 访 时 间 为 38 个 月。患 者 术 后 第 1 天 至 其 最 终 死 亡 时 间 或 到 随 访 截 止 时 间为 总 生 存 期(overall survival，OS)。本 研 究 获 得 患 者 知情同意和内蒙古医科大学附属医院伦理委员会批准。1.3 主要试剂及仪器SF 2/ASF 抗 体 购 自 美 国 Santa Cruz
24、公 司，P 53 抗体、Ki 67 抗 体、免 疫 组 化 SP 试 剂 盒 和 DAB 显 色 试 剂盒 均 购 自 福 州 迈 新 生 物 技 术 有 限 公 司。显 微 镜 购 于 江南永新，型号为 BM 2000。论 著癌变 畸变 突变2 1 1 CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESIS2023 年 5 月 第 35 卷 第 3 期1.4 免疫组织化学检测及结果判定1.4.1 免 疫 组 化 染 色 将 石 蜡 包 埋 的 胰 腺 癌 及 癌 旁 正常 组 织 切 片 浸 入 二 甲 苯 中 以 去 除 石 蜡，用 乙 醇 梯 度 重新 水 化，
25、滴 加 羊 抗 人 单 克 隆 抗 体(1 100 稀 释)，水 浴锅 孵 育 60 min，PBS 冲 洗 后，滴 加 二 抗，室 温 下 孵 育10 min，PBS 再 次 冲 洗 后，滴 加 链 霉 素，室 温 下 孵 育10 min，随 后 滴 加 DAB 工 作 液 进 行 复 染，经 梯 度 脱 水后光学显微镜下观察染色结果。1.4.2 结 果 判 定 对 染 色 结 果 进 行 评 分，评 分 过 程 由两 位 病 理 科 医 生 各 自 独 立 操 作，采 用 兼 顾 阳 性 细 胞 染色 的 强 度 及 数 量 作 为 判 定 标 准。按 染 色 深 浅 计 分：无 染 色
26、为 0 分，淡 黄 色 染 色 为 1 分，棕 黄 色 染 色 为 2分，棕 褐 色 染 色 为 3 分；按 阳 性 表 达 细 胞 数 计 分：未 见 阳 性 表 达 细 胞 为 0 分，阳 性 细 胞 25%为 1 分，阳性 细 胞 在(25%，50%为 2 分，阳 性 细 胞 在(50%，75%为 3 分，阳 性 细 胞 75%为 4 分。按 两 个 结 果 评 分 相加 作 为 最 终 判 断，0 3 分 为 阴 性，4 7 分 为 阳 性。P 53和 Ki 67 的 免 疫 组 化 结 果 显 示 阳 性 颗 粒 均 定 位 于 细 胞 核中，突 变 型 P 53 在 细 胞 核 内
27、 高 表 达 是 判 断 肿 瘤 独 立 预后 指 标；而 Ki 67 高 表 达 则 提 示 肿 瘤 细 胞 增 殖 活 性 强，侵 袭 性 高，是 临 床 上 重 要 的 判 断 预 后 的 因 素。本 实 验只 单 纯 考 虑 阳 性 细 胞 核 染 色 的 数 量 为 标 准。P 53 分 级标 准 以 阳 性 细 胞 数 总 数 的 5%为 阴 性，5%为 阳 性。Ki 67 分 级 以 增 殖 指 数(proliferation index，PI)为 标 准，即 计 数 10 个 随 机 高 倍 视 野(400)下 1 000 个 肿 瘤 细 胞中的阳性细胞数，PI=阳性细胞总数/
28、1 000 100%。1.5 统计学方法使 用 SPSS 20.0 软 件 进 行 统 计 分 析。胰 腺 癌 组 织及 癌 旁 正 常 组 织 中 SF 2/ASF 高 表 达 率 的 比 较 使 用 配 对卡 方 检 验；SF 2/ASF、突 变 型 P 53 和 Ki 67 之 间 的 表 达的 相 关 性 用 Pearson 相 关 性 分 析；SF 2/ASF 的 表 达 与 临床 病 理 学 特 征 的 关 系 使 用 卡 方 检 验、连 续 性 校 正 卡 方检 验 或 Fisher 确 切 概 率 法 分 析；采 用 Kaplan-Meier 法绘 制 患 者 生 存 曲 线，
29、生 存 曲 线 的 比 较 采 用 Log-rank 检验；预 后 分 析 采 用 Cox 比 例 风 险 回 归 模 型，P 0.05 为差异有统计学意义。2 结 果2.1 SF 2/ASF 在 胰 腺 癌 组 织 和 癌 旁 正 常 组 织 中 的 表达差异在 GEPIA 数 据 库 中 选 择 匹 配 TCGA 和 GTEx 数 据 共包 含 胰 腺 癌 组 织 179 例，癌 旁 正 常 组 织 171 例，分 析结 果 显 示，胰 腺 癌 组 织 中 SRSF 1 基 因 的 表 达 水 平 显 著高于癌旁正常组织(P 0.01，图 1)。2.2 胰 腺 癌 组 织 中 SF 2/A
30、SF 与 P 53 和 Ki 67 表 达 的 相关性分析在 GEPIA 数 据 库 中 选 择 匹 配 TCGA 数 据，设 置 相关 系 数 为 Pearson，结 果 见 图 2，可 见 在 胰 腺 癌 中SRSF 1 基 因 与 TP 53 和 MKi 67 的 表 达 水 平 均 呈 正 相 关(r 分 别 为 0.28 和 0.32，均 为 P 0.01)。2.3 胰 腺 癌 中 SF 2/ASF、突 变 型 P 53 和 Ki 67 蛋 白 的表达免 疫 组 化 检 测 结 果 见 图 3 和 表 1，胰 腺 癌 组 织 中SF 2/ASF 和 P 53 蛋 白 的 阳 性 表
31、达 率 均 高 于 癌 旁 正 常 组织，差 异 均 有 统 计 学 意 义(P 0.01)。胰 腺 癌 组 织 中Ki 67 增 殖 指 数 为(32.4 19.9)%，而 癌 旁 正 常 组 织 中 为 0(P 0.01)。图 1 SRSF 1 基因在胰腺癌组织和癌旁正常组织中的表达水平A：散 点 图 示 SRSF 1 与 TP 53 的 相 关 性；B：散 点 图 示 SRSF 1 与 MKi 67 的相关性.图 2 SRSF 1 基因与 TP 53 和 Ki 67 的相关性论 著癌变 畸 变 突变2 1 2 CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESI
32、SV o l.3 5 N o.3 M a y 2 0 2 32.4 胰 腺 癌 中 SF 2/ASF 与 突 变 型 P 53 和 Ki 67 表 达 的相关性卡 方 检 验 分 析 结 果 见 表 2，表 明 SF 2/ASF 蛋 白 表达 水 平 与 突 变 型 P 53 呈 负 相 关(r=-0.386，P 0.05)，与Ki 67 增殖指数呈正相关(r=0.275，P 0.05)。2.5 SF 2/ASF 表达与胰腺癌临床病理特征的关系卡 方 检 验 分 析 结 果 见 表 3，可 见 SF 2/ASF 高 表 达与 胰 腺 癌 分 化 程 度、有 无 淋 巴 结 转 移 和 有 无
33、远 端 脏 器转 移 有 关(均 为 P 0.05)。2.6 胰 腺 癌 组 织 中 SF 2/ASF 的 表 达 与 患 者 生 存 率 的关系在 对 60 例 胰 腺 癌 患 者 的 随 访 过 程 中，根 据 SF 2/ASF 蛋 白 的 表 达 情 况 将 所 有 患 者 分 为 SF 2/ASF 高 表 达组(34 例)和 SF 2/ASF 低 表 达 组(26 例)，绘 制 生 存 曲 线，见图 4。*采用 Fisher 确切概率法.变量发生部位胰头胰体胰尾分化程度高中分化组低分化组淋巴结转移无有远端脏器转移无有TNM 分期 期组 期组n348184416461436242634S
34、F 2/ASF 蛋白阴性例数124102422602241214阳性例数2248201420141420142028.44711.5840.795P0.326*0.01 0.01*0.010.149表 3 SF 2/ASF 表达与胰腺癌临床病理学特征的关系A：SF 2/ASF 表 达 阳 性 的 高 分 化 胰 腺 癌 组 织；B：SF 2/ASF 表 达 阳 性 的 低 分 化 胰 腺 癌 组 织；C：SF 2/ASF 表 达 阴 性 的 癌 旁 正 常 组 织；D：胰 腺 癌 HE 染色；E：P 53 表 达 阳 性 的 胰 腺 癌 组 织；F：P 53 表 达 阴 性 的 癌 旁 正 常
35、 组 织；G：Ki 67 表 达 阳 性 的 胰 腺 癌 组 织；H：Ki 67 表 达 阴 性 的 癌 旁 正 常 组 织.图 3 SF 2/ASF、突变型 P 53 和 Ki 67 蛋白在胰腺癌组织与癌旁正常组织中的表达情况(400)组间比较采用卡方检验，与癌旁正常组织比较，*P 0.01.表 1 胰 腺 癌 和 癌 旁 正 常 组 织 中 SF 2/ASF、突 变 型 P 53 蛋 白 的 表 达 阳性率和 Ki 67 增殖指数组别癌旁正常组织胰腺癌组织SF 2/ASF 蛋白表达阳性率20.0%56.7%*P 53 蛋白表达阳性率10%63.3%*Ki 67增殖指数0(32.4 19.9
36、)%*表 2 胰腺癌中 SF 2/ASF 与突变型 P 53 和 Ki 67 表达的关系SF 2/ASF蛋白阴性例数阳性例数P 53 蛋白阴性例数418阳性例数2216r-0.386P0.02Ki 67 增殖指数 10%94 10%1730r0.275P0.034图 4 SF 2/ASF 蛋白表达与胰腺癌患者生存率的关系论 著癌变 畸变 突变2 1 3 CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESIS2023 年 5 月 第 35 卷 第 3 期2.7 SF 2/ASF 表达与胰腺癌预后的关系单 因 素 Cox 回 归 分 析 结 果 见 表 4，可 见 SF
37、2/ASF 阳性 表 达(HR=0.264，P 0.01)和 年 龄(HR=0.065，P 0.01)可 能 是 患 者 OS 的 影 响 因 素。多 因 素 Cox 回 归 分 析 表明，SF 2/ASF 阳 性 表 达(HR=0.336，P 0.01)和 年 龄(HR=1.057，P 0.01)是影响患者 OS 的独立危险因素。3 讨 论胰 腺 癌 是 消 化 系 统 恶 性 程 度 最 高 的 肿 瘤 之 一。它侵 袭 性 高，隐 匿 性 强，约 80%的 患 者 在 就 诊 时 已 处 于局 部 晚 期 或 发 生 远 处 转 移 8，5 年 生 存 率 仅 为 15%20%9。由 于
38、 该 肿 瘤 对 射 线、药 物 不 敏 感 等 特 点，导 致常 规 的 手 术 切 除、放 疗、化 疗，乃 至 靶 向 药 物 及 免 疫治 疗 疗 效 特 异 性 均 不 高 10，目 前 胰 腺 癌 早 期 诊 断 和 临床 治 疗 的 基 础 理 论 与 方 法 都 不 理 想，患 者 预 后 极 差。目 前，针 对 胰 腺 癌 早 期 诊 断 和 临 床 治 疗 的 措 施 较 少，提高胰腺癌患者总体生存率是人类面临的一个挑战。研 究 表 明 剪 接 因 子 在 多 种 肿 瘤 的 发 生 发 展 中 发 挥重 要 的 作 用。目 前 发 现 一 种 由 SRSF 1 基 因 编
39、码 的 剪 接因 子 SF 2/ASF 能 选 择 性 剪 接 致 癌 或 抑 癌 因 子，调 节 因子 活 性，从 而 加 快 肿 瘤 细 胞 生 物 学 行 为 11。研 究 发现，SF 2/ASF 在 人 结 肠 癌、小 肠 癌、肾 癌、宫 颈 癌、肺 癌 和 儿 童 白 血 病 等 多 种 恶 性 肿 瘤 中 呈 现 过 表 达 状态 12-13，但 经 治 疗 缓 解 后 则 其 表 达 水 平 降 低，提 示 其参 与 了 这 些 恶 性 肿 瘤 的 发 生 发 展 过 程。SF 2/ASF 在 建立 转 化 表 型、维 持 细 胞 生 长、增 殖 和 炎 症 中 发 挥 重 要作
40、 用 3，14，是 一 种 潜 在 的 肿 瘤 治 疗 靶 点。目 前，SF 2/ASF 在 人 类 多 种 癌 症 中 异 常 表 达 15，但 有 关 其 在 胰 腺癌 中 的 表 达 研 究 尚 未 见 相 关 报 道。P 53 是 一 种 抑 癌 基因，分 为 野 生 型 和 突 变 型 两 类，在 肿 瘤 生 长 过 程 中 主要 控 制 细 胞 周 期、DNA 复 制 和 细 胞 不 受 控 制 的 分裂 16。既 往 文 献 报 道，约 50%60%的 胰 腺 癌 中 存 在突 变 型 P 53 的 过 度 表 达，其 表 达 程 度 与 患 者 预 后 有关 17-18。Ki
41、67 属 于 核 抗 原，表 达 与 肿 瘤 细 胞 的 增 殖 和生 长 密 切 相 关 19，研 究 表 明，Ki 67 在 有 丝 分 裂 中 起 到了 维 持 DNA 结 构 的 作 用，作 为 一 种 增 殖 标 志 物 被 广 泛应 用 于 常 规 病 理 研 究，是 评 估 患 者 预 后 的 指 标。P 53和 Ki 67 均 参 与 调 控 胰 腺 癌 生 物 学 行 为，并 可 作 为 标 志物进行联合检测来评估胰腺癌的恶性程度及预后。SF 2/ASF 在 肿 瘤 中 表 达 及 意 义 的 相 关 性 研 究 较少，为 了 进 一 步 探 讨 SF 2/ASF 在 胰 腺
42、 癌 中 的 表 达 情况，本 研 究 通 过 数 据 库 分 析，结 果 显 示 胰 腺 癌 组 织 中SRSF 1 基 因 的 表 达 水 平 显 著 高 于 癌 旁 正 常 组 织，SRSF 1 的 表 达 与 TP 53 和 MKi 67 具 有 相 关 性；免 疫 组 化法 观 察 SF 2/ASF、突 变 型 P 53 和 Ki 67 蛋 白 在 胰 腺 癌 组织 中 的 表 达 水 平 明 显 高 于 癌 旁 正 常 组 织。为 了 明 确SF 2/ASF、突 变 型 P 53 和 Ki 67 三 者 之 间 的 相 关 性，经卡 方 检 验 分 析 发 现 SF 2/ASF 阳
43、 性 表 达 与 突 变 型 P 53 和Ki 67 增 殖 指 数 均 具 有 相 关 性，提 示 SF 2/ASF 与 突 变 型P 53 蛋 白 在 胰 腺 癌 的 发 生 发 展 中 可 能 是 相 互 协 同 作用，推 测 SF 2/ASF 可 能 通 过 调 节 突 变 型 P 53 和 Ki 67 增殖 指 数 而 产 生 致 癌 作 用。本 研 究 卡 方 检 验 分 析 SF 2/ASF 和 突 变 型 P 53 的 相 关 性 与 生 信 分 析 结 果 不 同，可能 与 此 数 据 库 分 析 较 为 单 薄，以 及 与 本 研 究 所 选 取 的临 床 数 据 较 少
44、有 关，有 待 进 行 后 续 进 一 步 研 究。为 了探 讨 SF 2/ASF 与 胰 腺 癌 临 床 病 理 指 标 的 关 系，经 过 进一 步 分 析 发 现 胰 腺 癌 高、中 分 化 组 中 SF 2/ASF 的 表 达明 显 高 于 低 分 化 组，淋 巴 转 移 组 和 远 端 脏 器 转 移 组 中SF 2/ASF 的 表 达 显 著 高 于 未 转 移 组，提 示 SF 2/ASF 与胰 腺 癌 的 侵 袭 转 移 能 力 有 关，可 能 对 判 断 患 者 的 预 后有 一 定 的 作 用。通 过 Cox 回 归 模 型 分 析 发 现 SF 2/ASF高 表 达 和
45、患 者 年 龄 是 影 响 胰 腺 癌 患 者 OS 的 独 立 危 险因 素，提 示 SF 2/ASF 也 可 能 作 为 胰 腺 癌 预 后 评 估 的 新指 标。随 着 年 龄 的 增 长，胰 腺 癌 患 者 的 OS 较 短，推测 可 能 与 伴 随 其 他 基 础 疾 病、营 养 不 良、身 体 和 认 知功能受损等原因有关。综 上 所 述，SF 2/ASF 在 胰 腺 癌 组 织 中 高 表 达，有望 作 为 临 床 胰 腺 癌 诊 断 和 预 后 的 一 个 新 标 志 物，并 对评 判 肿 瘤 分 化 程 度、有 无 淋 巴 结 转 移 以 及 远 端 脏 器 转移 具 有 重
46、 要 意 义，可 能 为 胰 腺 癌 发 生 发 展 的 分 子 机 制提 供 新 的 理 论 和 思 路，为 胰 腺 癌 治 疗 提 供 新 方 案。但对 于 SF 2/ASF 在 胰 腺 癌 中 作 用 的 认 识 仍 较 局 限，后 续应进行进一步的探索。参考文献 1 GORAL V.Pancreatic cancer:pathogenesis and diagnosisJ.Asian Pac J Cancer Prev,2015,16(14):5619-5624.表 4 Cox 回归分析胰腺癌患者预后相关因素变量SF 2/ASF 表达年龄性别单因素分析-1.3320.0650.156H
47、R0.2641.0681.16995%CI(0.125，0.557)(1.033，1.103)(0.614，2.228)P 0.01 0.010.634多因素分析-1.0910.0560.260HR0.3361.0571.29795%CI(0.148，0.764)(1.022，1.093)(0.649，2.590)P 0.01 0.010.462论 著癌变 畸 变 突变2 1 4 CARCINOGENESIS，TERATOGENESIS&MUTAGENESISV o l.3 5 N o.3 M a y 2 0 2 3 2 NO M,HONG S M,WOOD L D,et al.Pancrea
48、tic cancerpathology viewed in the light of evolutionJ.Cancer MetastasisRev,2021,40(3):661-674.3 ZHAO Y W,ZHU T,ZHANG X Y,et al.Splicing factor 2/alternative splicing factor contributes to extracellular signal-regulated kinase activation in hepatocellular carcinoma cellsJ.Mol Med Rep,2015,12(3):3890-
49、3894.4 IBBA G,PIU C,ULERI E,et al.Disruption by SaCas 9endonuclease of HERV-K env,a retroviral gene with oncogenicand neuropathogenic potential,inhibits molecules involved incancer and amyotrophic lateral sclerosisJ.Viruses,2018,10(8):412.5 LIU J,ZHANG C,HU W W,et al.Tumor suppressor p 53 andmetabol
50、ismJ.J Mol Cell Biol,2019,11(4):284-292.6 LI J,WANG A R,CHEN X D,et al.Ki 67 for evaluating theprognosis of gastrointestinal stromal tumors:a systematicreview and meta-analysisJ.Oncol Lett,2022,23(6):189.7 YANG C,ZHANG J,DING M,et al.Ki 67 targeted strategiesfor cancer therapyJ.Clin Transl Oncol,201
