1、复方木枣口服液改善小鼠睡眠作用的研究2009 年 1O 月第 29 卷第 5 期Oct.2009Vo1.29No.5湖南中医药大学JournalofTCMUniv.ofHunan45复方木枣口服液改善小鼠睡眠作用的研究李兴旺,尹进,邹瑾(1.湖南省汨罗市中医院,湖南汨罗 414400;2.湖南省疾病预防控制中心 ,湖南长沙410005;3.湖南科技职业技术学院,湖南长沙 410004)【摘要目的探讨复方木枣口服液对小鼠睡眠的影响.方法将 160 只小鼠被随机分为 4 组,分别为对照组,复方木枣口履液高,中,低剂量 1.44,4.33,12.98g/(kg?d)给小鼠灌胃 30d,进行直接睡眠实
2、验,巴比妥钠睡眠潜伏期实验,戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验和延长戊巴比妥钠睡眠时间实验.结果与对照组比较.中,高荆量组能显着延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间;高剂量组小鼠睡眠潜伏期显着缩短 ,差异具有统计学意义(PO.05).各剂量组无直接催眠作用.对小鼠体质量增长,戊巴比妥钠阈下剂量催眠均无明显的影响,差异无统计学意义(P0.O5).结论复方木枣口服液能显着改善小鼠睡眠作用.关键词 复方木枣口服液 ;睡眠;木枣;酸枣仁;小鼠中图分类号R285.5(文献标识码)A( 文章编号1674070X(2009)05004503Studyofjujubeoralcompoundonimprovingslee
3、pofmiceLIXing-wang,(MiluoTraditionalChineseMedicineYINJin.ZOUJinHospital,MiluoHunan,414400,China)AbstractObjectiveTostudytheeffectofjujubeoralcompound(JOC)toimprovesleepofmice.Methods160micewererandomlydividedintofourgroups,feedingwithJOChigh,mediumandlowdosesrespectively30day,thenexperimentsofdirec
4、tsleep,sodiumsleeplatencytest,sodiumpentobarbitalhypnosissubliminaldoseandextendingthesleeptimeinducedbypentobarbitalsodiumexperimenta1.ResultsComparedwiththecontrolgroup,JOCcouldobviouslyextendspentobarbitalsodiuminducedsleeptimeinmice.Shoenedsleeplatencyinmicef 尸 l0.05).Othertargetsareinsignifican
5、t.ConclusionJOCcanimproyeobviouslythesleepinmice.Keywordsjujubeoralcompound;sleep;jujube;semenzizyphispinosae;mice复方木枣口服液主要成分为木枣,酸枣仁等.临床主治失眠多梦等证,其疗效显着.木枣为大枣的一种.大枣为鼠李科植物枣 ZiziphusjujubaMil1.var.inemfis(Bge,)Rehd.的成熟果实.亦名红枣(医学入门),干枣( 名医别录)等 .味甘,性温.入脾,胃经.功能:补中益气,养血安神.主治:胃虚食少,失眠多梦,脾弱便溏,气血津液不足 ,营卫不和,心悸怔忡
6、,妇人脏燥.今就其改善小鼠睡眠进行试验研究,现将实验方法及结果报道如下:1 材料与方法1.1 材料1.1.1 药物复方木枣口服液.主要由木枣,枣仁等组成.采用药材均由泪罗市中医院药剂科提供,经鉴定均属真品.提取工艺为:第 1 次 6 倍药物体积蒸馏水浸泡40min,回流提取,煮沸 15min,过滤.药渣加入 3 倍体积蒸馏水提取,方法同前.合并过滤后的药液,减压浓缩成(收稿日期2009 一 Ol 一 16基金项目 湖南省教育厅科研资助项目(08D007).(作者简介) 李兴旺 (1974 一), 男,湖南泪罗人,主管中药师,主要从事中药临床药理学,药剂学基础研究.湖南中医药大学 2009 年第
7、 29 卷1.0s/mE(每毫升药液相当于 1.0g 生药),4冰箱保存.临用前取浓缩液 7.2,21.7,64.9mL 加蒸馏水定容至100mL,摇匀,得 7.2,21.7,64.9%的药液供灌胃.1.1.2 动物.长沙市开福区东创实验动物科技服务部提供的清洁级昆明种雄性小鼠 160 只,体质量 1822g.160只动物分 4 个实验组,每组 40 只.实验动物生产许可证号为 SCXK(湘)2006-0001,饲料由同一单位提供.1.1I3 仪器与试剂 AEU210 电子天平.湘平科技发展有限公司生产.戊巴比妥钠,巴比妥钠.1.2 方法【】,l-2.1 直接睡眠实验将实验动物 40 只动物按
8、体质量排序,按随机数字表法随机分为 4 组:空白对照组和复方木枣口服液低,中,高剂量组,每组 1O 只小鼠.剂量按照6okg 成人与 2Og 小鼠体表面积换算,则复方木枣口服液低,中,高剂量分别为 1.44,4.33,12.98g/(kg?d)f 分别相当于临床推荐剂量的 1,3,9 倍),取 7.2%,21.7%,64.9%的药液,按 0.2nflJl0g 体积给小鼠灌胃上述药液,1 次/d,连续 30d.空白对照组灌胃予以等体积的蒸馏水.以翻正反射消失.小鼠背卧位超过 3O60s 不能翻正为指标,翻正反射恢复.被卧小鼠能立即翻正身位即为动物觉醒,翻正反射消失至恢复这段时间为动物睡眠时间.观
9、察记录空白对照组与受试药物组入睡动物数及睡眠时间.1.2.2 延长戊巴比妥钠睡日民时间实验动物分组,给药方法同“1.2.1“.于末次给药后 15rain,给各组动物按40mgks 剂量腹腔注射戊巴比妥钠,注射量为 0.1mIJkg.以小鼠翻正反射消失为睡眠指标,观察受试物对戊巴比妥钠睡眠时间的延长作用.1.2.3 戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验动物分组,给药方法同“1.2_1“.于末次给药后 15min,给各组动物按 30mg/kg 剂量腹腔注射戊巴比妥钠,注射量为 0.1mlJkg,以小鼠翻正反射消失达 1min 以上作为入睡判断标准.观察给戊巴比妥钠 30min 内各组动物发生睡眠的动物数.1
10、.2.4 巴比妥钠睡眠潜伏期实验动物分组,给药方法同“1.2.1“.于末次给药后 15min,给各组动物按 300mg/kg剂量腹腔注射巴比妥钠,注射量为 0.1mU10g,以翻正反射消失为指标.观察受试样品对巴比妥钠睡眠潜伏期的影响.1.3 统计学分析用 SPSSl1.0 统计软件处理实验数据 .计量资料多组间两两比较用单因素方差分析,方差齐时,两两比较用 q检验;方差不齐时用秩和检验.计数资料采用)(2 检验.2 结果2.1 复方木枣口服液对小鼠直接睡眠的影响复方木枣口服液低,中,高剂量给小鼠灌胃后,小鼠未出现睡眠现象.2.2 复方木枣口服液对戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间的影响经方差齐性检
11、验,各组小鼠睡眠时间方差齐,单因素方差分析显示.各组之间总体比较差异具有统计学意义(PO.05).进一步用 Dunnett 法进行各剂量组与对照组均数间的两两比较,结果显示低剂量组与对照组比较无显着性差异(P0.05);中,高剂量组小鼠睡眠时间较对照组显着延长,差异具有统计学意义(P0.05).结果见表 1.表 1 复方木枣口服液对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响伍s,n=l0)注:与对照缀比较 P0.05.2.3 复方木枣口服液对小鼠戊巴比妥钠阈下剂量催眠的影响将各剂量组与对照组小鼠睡眠发生率进行四格表)(2检验,发现有理论频数小于 5,故采用确切概率法(FisherExactTest):i
12、行统计,结果显示,各剂量组小鼠睡眠发生率与对照组比较差异无统计学意义 0.05).结果见表 2.表 2 复方木枣口服液对阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠发生率的影响=1o)2.4 复方木枣口服液对小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期的影响经方差齐性检验,各组小鼠睡眠潜伏期方差齐,单因素方差分析显示,各组之间总体比较差异有统计学意义(1P0.05).进一步用 Dunnett 法进行各剂量组与对照组均数间的两两比较.结果显示高剂量组小鼠睡眠潜伏期较对照组显着缩短,差异有统计学意义 fP0.05).结果见表 3.表 3 复方木枣口服液对各组小鼠巴比妥钠睡眠潜伏期的影响s,n=10)注:与对照组比较 Po.05.3
13、讨论以低,中,高剂量的复方木枣口服液给小鼠灌胃第 5 期李兴旺.等复方木枣口服液改善小鼠睡眠作用的研究 4730d.各剂量对受试小鼠无直接睡眠作用,中,高剂量组能显着延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间.高剂量组能显着缩短巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期.各剂量对阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠发生率无显着影响.提示复方木枣口服液有改善睡眠作用.运用木枣治疗虚劳烦闷不得眠历史悠久,(备急千金要方)中: 大枣十二枚,葱白七茎.上二位,以水三升 ,煮一升,去渣顿服21.现代研究从大枣乙醇提取物中分离出来的黄酮一双葡萄糖苷 A 有镇静催眠和降压作用 .以延长硫贲妥钠作用作为指标,分离出苯甲醇糖苷,柚配质C
14、等多种化合物,已经确认柚配质 C 糖苷类有中枢抑制作用,即降低自发运动及刺激反射作用,强直木僵作用.故认为其为大枣镇静作用的有效成分.亦有人认为,从枣仁和枣树中分离出来的黄酮一 C 一葡萄糖苷 Spinosin 是产生镇静的有效成分口】.Byun 等对酸枣仁和大枣中分离得到的一系列生物碱进行了镇静研究.结果表明:sanjoinineA和 nucifcfine 均具有较强的镇静催眠活性.其中 san.ioinineA 在 3mg/kg 剂量下即有明显的催眠作用,说明这一类环肽生物碱可能是酸枣仁的有效成分.此外还发现sanjoinineA 和 nuciferine 之间有较强的协同作用41.另有甘
15、麦大枣汤为经典方剂.用于妇人脏燥等疾病,药理实验证-? ?.?.?-.?.?.,?.-_? ?._,? ?.?-.?.?. otto.-明:具有升高白细胞,镇静,催眠,抗惊厥,促进离体平滑肌收缩等作用51.延长戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间,增加入睡动物数:降低硝酸士的宁诱发的小鼠惊厥数旧 .同期进行了复方木枣口服液对小鼠免疫功能的影响实验,结果表明其能增强小鼠免疫功能【7】,其可能是改善小鼠睡眠机制之一.参考文献:【1】卫生部卫生法制与监督司.保健食品检验与评价技术规范sB京:人民卫生出版社,2003:8183.【2】马清钧.王淑玲.临床实用中药学【M】.南昌:江西科学技术出版社,2002:1
16、53.【3】阴健,郭力弓.中药现代研究与临床应用【M】 .北京: 学苑出版社,1993:186.4】陈功 .枣属植物化学成分及药理活性概况【.I】.国外医药-植物药分册,1999,14(4):151157.5】张宏 ,王晓萍.甘麦大枣汤的药理研究与临床应用们.时珍国药研究,1997,8(1):2223.【6】李俊,袁灿兴,林秀凤.甘麦大枣汤及其不同加味对小鼠镇静催眠作用的比较明.上海中医药杂志,2003,37(8):16 一 l8.7李兴旺,尹进 ,邹瑾.复方木枣口服液对小鼠免疫功能的影响实验研究叨.中国热带医学,2009,9(8):144o_1441.(本文编辑彭芝配)(上接第 34 页 J
17、汤液本草载“主热痢下重“. 其主要成分为香豆素类(秦皮甲素,秦皮乙素,秦皮苷,秦皮素)及鞣质51.现代研究证明,秦皮具有抗炎镇痛和降低尿血酸的作用,用于治疗痛风甚佳;其煎剂对痢疾杆菌,大肠杆菌绿脓杆菌,金黄色葡萄球杆菌均有抑制作用:秦皮甲素 ,秦皮乙素,秦皮苷均有明显抗炎作用 1.5,61.椿皮味苦,涩,性寒;人大肠,肝经;功能清热燥湿,涩肠止泻,收敛止血,止带,杀虫.主治湿热泻痢,久泻久痢,赤白带下,崩漏经多,杀虫止痒等71.日华子本草 云:“ 止泻及肠风,能缩小便.“ 本草备要:“ 治湿热为病,泄泻,久痢,崩带,肠风,梦遗,便数.有断下之功.“现代药理研究表明椿皮具有抗菌抗病毒,解热镇痛,
18、镇咳平喘,镇静作用,其主要有效成分以酚性成分及生物碱为主,这些成分均溶于水.椿皮水醇提取物对金黄色葡萄球菌,绿脓杆菌,大肠杆菌均有抑杀作用;椿皮煎剂可以抑制和杀灭金黄色葡萄球菌 ,大肠杆菌绿脓杆菌,伤寒杆菌,痢疾杆菌等Sl.前期我们已经做了九香止泻片对副溶血弧菌,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,乙型副伤寒杆菌,痢疾杆菌,变形杆菌的体外抑菌实验,结果表明该药抑菌作用显着 Ol.本实验结果证明九香止泻片明显能提高腹腔注射致死量细菌模型小鼠的存活率,并能延长其存活时间,且具有一定的量效关系.表明其对感染模型小鼠具有较好的保护作用,对体内肠道常见致病菌具有较好抑制作用.而细菌感染是引起急性腹泻的主要病因.提
19、示九香止泻片可能通过抑制或杀灭致泻性肠道细菌从而达到止泻目的.为其治疗湿热泄泻具有良好效果提供了可靠的理论依据及实验依据.也为进一步阐明其治疗湿热泄泻的机制奠定良好的基础.参考文献:【1】陈奇.中药药理研究方法学(第 2 版)【M】.北京:人民卫生出版社.2006:264,278.2】张卓然 .医学微生物实验学【M】.北京:科学出版社,1998:26-27.57,216.【3】廖荣鑫,周福生,文小敏,等.脾胃湿热证大鼠湿偏重,热偏重模型尿液 AQP2 的变化及其在肾组织的表达.山东中医杂志 ,20o7,26(12):846-848.44 郭金龙.湿阻证病理造模的实验研究.中医杂志,1988,(
20、8):59.5】李存红 ,徐燕.秦皮的研究进展 L 玎.焦作大学,2004,1O(4):34.6】姚丽芳 ,杨逢春.秦皮类中草药抗菌作用的研究叨.中华医学丛刊,2003,(6):56.7】江苏新医学院.中药大辞典M】.上海:上海人民出版社,1997:2429.8】朱育风 ,周琴妹,丰国炳,等.香椿皮与臭椿皮的体外抗菌作用比较【J】.中国现代应用药学 j999,16(6):19-21.【9】彭芝配,膝久祥,伍参荣,等.九香止泻片对副溶血弧菌活性及小鼠小肠功能亢进模型的影响田.湖南中医药大学,2007,27(4):23.【1o1 张金慧,彭芝配,滕久祥,等.九香止泻片体外抑菌作用的实验研究J】.湖南中医药大学,2008,27(6):35.(本文编辑李路丹)
