1、 甘肃中医学院硕士学位论文甘肃濒危药用植物秦艽遗传多样性的等位酶分析及保护研究姓名：姜北岸申请学位级别：硕士专业：中药学指导教师：刘丽莎20080601符 号 说吩 嗪甲 硫 酸珼 。 签字日期 璐月玎日导师 签 名 ：合 体轻 微 过量 ， 杂 合 体略显 不 足 。三 秦艽 种群 保 护 策 略 苴虚逝筮 药用撞 物 蠢蕴遗笾墨 搓 性 的 僮 酶岔蚯 厘堡控 硒究 遗传 多样性 概 述谈 遗传 多样性 就 离 不开 生物 多样性 ， 说 到 生物 多样性 ， 人 们 总要提 到 一只 鸽子 。 和 景 观 多样性 不 同 。 但 某 些 种 类 ，特别是 种 下水平 的 居 群 间 ，其
2、 组 型和 染 色 体 特征 差别不 明显 ，则 必较为 普 遍 的 方法 ，等位 酶 分 析 的 遗传 学 基础 在于： 根 据中 心 法 则 ，组 成 蛋 白质 多肽 链 的氨 基酸 种 类 和 顺序是 由 塑 账 岬募 罨 龆 摹 缘 盌 链 上 结 构 基因发生 点突变 时 ，一个 或 多个 核 苷 酸 发生 了 置 换 ，就 会导 致 由它 编 码 的 氨 基酸 的 改 变 ，从 而可 以 直接影 响蛋 白质 的 构 型和 静电 荷 。 通 过电 泳 能 够 分 离 和 鉴 别这 种 蛋 白质 的 变 体 ，从 而推断假定酶 基因位 点的 所 有 等位 基因的 存 在。 使用 等位
3、酶 资 料的 一个 最 基本 的 依据就 是 ： 酶 婊 龆 嗵 訢 分 析 技术 自 年 由 及 叼等几 人发展 起 来 后 ，在分 析 生 物 遗传 多样性上 有 广泛 的 应用 。 技术 是 利 用 一个 随机序列 的 寡核 苷 酸 作 引物 ，通 常 为 个 核 苷 酸 ，以 生 物 的 基因组 髂 褰 蠵 扩增 反 应，经 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 来 检测 蛄 卸嗵 詎 。 它 不 需 要了 解基因组 的 构 成 ，而是 以 一种 概率上 的 可 能 性为 基础 的 扩 增 。 此 技术 适用 于种 质 资 源 的 鉴 定和 分 类 、 目 标性状 基因的 分 子标记 、 遗传
4、图谱 的 快 速 构 建等研 究，已 应用 于遗传 多样性检测 。 但 标记 为 显 性标记 ，不 能 有 效 识别杂 合 子； 易 受反 应条 件 的 影 响，稳定性较差。 马 小 军等在我国 高等 植 物 中 ，有 笥 业 闹掷嗫 赡 芙诮 甘 昴 诿鹁箬。 药 用植 物 如甘 草、“十 五期间，濒危 药物 资 源保 护 与 开发 研究 以 及 濒危 药材 繁 育 研究 相 继列 为 国 家 科 技中医药是中国的 四大国粹 之 一 ，中医治 病 主要 依 赖 于中药，而 中药大多数来自 于植物 、 动 物 、 矿 物 。 所 以 ，中药的 发 展 推 动 着中医的 发 展 ，药用 资源 的
5、 枯竭 也 在一 定 程 度上 影 响着中医。 而 药用 植 物 的 生 存 需 要 适宜的 环境 ，尽 管 人类 对 生 命给予 了高 度的 尊重 ，但 人类 还 继续 毁 灭 着其 它物 种 ，破坏 环境 。 所 有 的 生 物 都是相 互 依 存 、 紧 密 联 系的 ，一物 种 的 灭 绝 可能导 致其 它物 种 的 连 续 灭 绝 ，并 最 终 导 致整个生 态系统 的 波 动 或 崩溃 。 在药资源 的 可持 续 开发 利 用 密 切相 关，具有 十分 重 要 的 意义 。物的 迁 地保护就 有研 究报 道 防删剜。离体 保护我 国 药材 野 生 资 源 逐年 减 少 ， 如 麝香
6、 资 源 比年 前 减 少 了 ， 野 生 甘 草 的 蕴 藏量 也 比世 纪 年 代相应 减 少 了 以 上 ， 石 斛、 麻 黄 、 杜 仲等 野 生 资 源 破坏也 十 分严 重。以 天然 药材 为原 料的 紫杉醇 ， 在国 际市场上 热 销， 也 加 速了 我 国 野 生 药材 资 源 的耗 竭。因 此 ， 在利 用和 保护现 有中 药材 资 源 的 同 时 ， 开发新 的 药用资 源 势 在必行 。药用植物保护学与 相关 学科 关 系苴蕴逝蕉 药旦植物 塞蕴亟 佳垒搓 性 数 僮酶 盆板 壁堡芷婴童 肪 砶 爿生 态 效 益 米试纯 沙中 媚 絵爿社会效 益 资源可 持 续 利用土
7、药 用植物 资源 的可 持 续 利用药 用植物 保 护 生 物 学 研 究 药 用植物 濒危 原因 探 讨苴虚濒鱼 药 嗣 植物 蠢蕴遗 佳垒搓 蛙 的 僮 酶盆盘 盈握控班壅应 的 保 护 策 略 ； 高 连 明 阳 炔 捎 盟 降矸 勰 旱缬 炯 际 醵 种 杜鹃属 植物 的 遗 传分 化 进条 件 。秦 艽 种子 发芽适 温为 ， 用 保 护 生物学研究 究 翁庋 芯 克 悸 沸 见 图 二 、 实 验 研 究甘 肃 产 秦 艽 基 本情况调 查开 展 秦 艽 保 护 研究 势 在 必 行 。左 右 ，每个 小 居群 的 个 体数 不均，大 多 在 三 五 株 ，有 的 十 几 株 ；
8、分 布 地 区 的 昼 夜温差 较 ，一 磷 酸 ，一 磷 酸葡萄 糖脱 氢 酶 ，实 验 室并 低 温保 存 ，备 用 。丛 生 堂苴盎逝 鱼药 用 植 物 塞蕴亟佳墨搓 挂 的 僮酶 盆蚯 及 拯控砑冠经 冰镇 鹊 稳 匣掖 迹 俚稳 滴 崛 撼 逡 海 杆 傺心 得 凝胶 缓冲液芍 票 榻 。脱 氢 酶吩 嗪 甲 甲 硫 酸不同酶 系 统所对应 的 胶 染 配 方酶 系 统乙 醇 脱 氢 酶 滴 氯 化 镁胃 窱 ；滴 姿 崞 咸烟 峭 亚饷 单 位 ，；滴 咸烟 瓺 ：畏 脏 杭 琢蛩； 碇 磷 酸 葡萄 糖异 构酶 磷 酸 葡萄 糖脱 氢 酶 唬 痳，；缓冲液 甇 籌 氯 化 镁； 寸气一一甎田剑畂溢蛹疆瀣眯件 溢蛹婆程舞婶龌甾蓬譬对口辭蔯護山囹 惶畂盒鬲缲#畂縪诤猩唬畂。口口宴叠。殳】畂畂【 譬 星叠鹆撸甀盒鼍韭成玙畂量 羹 羹 委 蚕 【表 剀 粗 秩 焊魑 坏 慊 蚍 只 凳 腇 值 统 计
