1、 基 金 项 目：国 家 自 然 科 学 基 金（、）；江 苏 省 市 场 监 督 管 理 局 科 技 计 划 项 目（）；国 家 药 品 监 督 管 理局 化 学 药 品 杂 质 谱 研 究 重 点 实 验 室 开 放 课 题（）；同 为 通 信 作 者 作 者 简 介：李 昕 冉，女，研 究 方 向：药 物 分 析 研 究，：通 信 作 者：郭 娜，女，主 管 药 师，研 究 方 向：药 品 检 验，：，：；吴 春 勇，男，教 授，博 士 生 导 师，研 究 方 向：药 物分 析 研 究，：，：加 合 物 组 的 预 处 理 及 检 测 方 法 研 究 进 展李 昕 冉，孙 铜，郭 娜，张
2、 峻 颖，吴 春 勇，（中 国 药 科 大 学 药 物 质 量 与 安 全 预 警 教 育 部 重 点 实 验 室，江 苏 南 京；中 国 药 科 大 学 药 物 分 析 教 研 室，江 苏 南 京；山 东 省 食 品 药 品 检 验 研 究 院，山 东 济 南；济 南 市 食 品 药 品 检 验 检 测 中 心，山 东 济 南；中 国 药 科 大 学 中 药 制 剂 教 研 室，江 苏 南 京）摘 要：加 合 物 为 亲 电 性 物 质 与 共 价 结 合 形 成 的 一 类 损 伤，若 不 能 及 时 修 复 可 能 会 引 发 癌 症。具 有 高 灵 敏 度、高 选 择 性 的 液 质
3、联 用 技 术 已 成 为 加 合 物 检 测 的 主 流 方 法。加 合 物 组 学 能 同 时 测 定 复 杂生 物 基 质 中 多 种 已 知 的 加 合 物，扫 描 和 鉴 定 未 知 加 合 物，因 此 可 以 更 全 面 的 阐 释 遗 传 毒 性 物 质 的 毒 性。虽 然 近 年 来 在 水 解、加 合 物 纯 化 富 集、液 相 分 离、质 谱 扫 描 策 略 和 数 据 处 理 等 方 面 不 断 优 化，加 合 物 组 学检 测 仍 面 临 着 巨 大 的 挑 战。关 键 词：加 合 物；遗 传 毒 性；水 解；液 质 联 用中 图 分 类 号：文 献 标 识 码：文 章
4、 编 号：（）：，（，；，；，；，；，）：，：；近 年 来，缬 沙 坦、雷 尼 替 丁 和 二 甲 双 胍 等 已 上 市 药 物 中意 外 发 现 遗 传 毒 性 杂 质 引 发 了 人 们 的 极 大 关 注。研 究 发 现，遗 传 毒 性 物 质 广 泛 存 在 于 环 境 中，譬 如 汽 车 尾 气、香 烟、烧 烤中 的 氨 基 联 苯、苯 并 芘 等 多 种 多 环 芳 烃、真 菌 产生 的 黄 曲 霉 素、染 料 中 萘 胺、马 兜 铃 酸 和 他 莫昔 芬 等。除 了 外 源 性 暴 露，内 源 性 因 素 如 脂 质 过 氧 化 产 生的 低 分 子 量 醛 类 也 能 造 成
5、 遗 传 毒 性。加 合 物 是 导 致 遗 传 毒 性 的 重 要 原 因 之 一。所 谓 加 合 物，是 指 暴 露 于 外 源 或 内 源 的 亲 电 性 物 质 或 经 代 谢激 活 后 具 有 亲 电 性 的 物 质 与 亲 核 位 点 共 价 结 合 形 成 的 药 学 研 究.1，.1 化 合 物。若 不 能 及 时 修 复 损 伤，修 饰 核 苷 酸 可 能 会 妨 碍 正 常的 未 修 饰 核 苷 酸 配 对，从 而 导 致 碱 基 的 错 配、置 换；大 体 积的 修 饰 物 或 链 内 交 联 可 能 使 链 扭 曲 甚 至 断 裂，干 扰 复 制 和 转 录。原 癌 基
6、 因、抑 癌 基因 等 重 要 基 因 的 突 变 以 及 突 变 蛋 白 引 起 的 表 型 改 变 在 肿 瘤的 发 展 过 程 中 具 有 重 要 作 用，。因 此，加 合 物 被 认 为是 癌 症 的 早 期 生 物 标 志 物 以 及 必 要 不 充 分 条 件。加 合 物 的 形 成许 多 致癌物都需 要代谢激 活 才 能 反 应 形 成 加合 物，譬如苯并 芘（）、萘 胺（）、硝基 苯并蒽 酮（）、氨基，二甲基 咪唑 并，喹 喔啉（）、氨 基 甲 基 咪 唑 并，喹 啉（）等 多环 芳烃或芳香 胺、亚 硝 基 二 甲 胺（）和 亚 硝基二乙 胺（）等 亚硝胺类 物质、二 氯 甲
7、烷 和 二 氯乙 烷等烷 基 卤化物、马兜 铃酸 等。相 和 相 代谢酶在遗传 毒性物 质代 谢中的 作用 是 复 杂 的，体 内 酶 的 解 毒 与代谢 激活作 用并 存，代谢 平 衡影 响其 遗 传毒性。相 比 中 其 他 位 点，碱 基 加 合 物 的 发 生 频 率 更高。修 饰物最 常 加 合 在 碱 基 的 氮 氧 原 子、嘌 呤 的 原 子以及 嘧啶的 和 上（见 图）。由 于 亲 核 性 最 高，鸟 嘌呤 的（如 黄 曲霉 素 的加 合物）和 腺 嘌 呤 的 是最易 被攻 击 的 位 点，且 位 于 双 螺 旋 大 沟 中 的 鸟 嘌呤 比 位于 小沟 的 腺嘌 呤 位点更 容
8、易 形成加 合物。多环芳 烃、芳香胺 等遗 传毒性 物质 更多加 合在 嘌呤的 位（如 氨基联 苯的 加合物）。乙 醛、巴 豆 醛 等醛类 物质还 可以 与鸟嘌 呤的 和环 外氮成 环（如形 成加 合 物，）。氮 芥（）形 成 单 加 合 物 后又形 成了新 的亲 电中 间 体（），可 以 与 蛋 白 质 亲 核 侧链 反应产 生 蛋白质交 联 或攻 击另 一个碱 基形 成 链内 或链间 交联。图 常 见 的 反 应 位 点 及 加 合 物，加 合 物 的 分 析 方 法 加 合 物 的 发 生 频 率 很 低，个 核 苷 中 才 会 产生 一 个 加 合 物，因 此 加 合 物 分 析 极
9、具 挑 战 性。后 标 记法 曾 经 是 最 常 使 用 的 检 测 方 法，可 以 检 测到 个 加 合 物 个 碱 基。但 后 标 记 操 作 烦 琐，不同 加 合 物 的 酶 解 和 标 记 效 率 不 同，重 现 性 较 差，放 射 性 元素 的 使 用 也 大 大 限 制 了 此 法 的 使 用，。免 疫 分 析 方 法 利用 抗 原 抗 体 的 特 异 性 结 合，将 加 合 物 的 定 量 信 息 转 化 为 荧 光或 放 射 信 号，可 对 加 合 物 进 行 原 位 分 析，观 察 其 在 组 织 或 细胞 中 的 分 布。免 疫 分 析 不 需 要 酶 解，操 作 简 便，
10、结 合校 正 曲 线 可 实 现 加 合 物 的 半 定 量。但 此 法 所 需 的 样 品 量较 大，需 要 有 待 测 加 合 物 对 应 的 特 异 性 抗 体，可 能 存 在 的 交叉 免 疫 反 应 也 会 出 现 高 估 情 况。液 质 联 用 法 具 有 优 秀 的 选 择 性 以 及 与 后 标 记 法 相 当的 灵 敏 度，加 之 能 提 供 加 合 物 的 结 构 信 息，近 来 已 成 为 加 合 物 最 广 泛 使 用 的 检 测 方 法，。提 取 的 进 行 水解，得 到 脱 氧 核 苷 混 合 物，经 液 相 分 离 后 进 入 质 谱 检 测器，由 于 含 有 能
11、 量 较 低 的 糖 苷 键，容 易 失 去 脱 氧 核 糖 部 分（），从 而 发 生（高 分 辨 率）的 中 性 丢失，利 用 这 一 特 征 可 对 加 合 物 进 行 定 性 定 量 分 析。有 的 加 合 物 在 热 解 或 中 度 酸 性 条 件 下 稳 定 性 较 差，碱 基 易 从加 合 物 上 脱 落，质 谱 分 析 还 可 以 对 碱 基 的 中 性 丢 失 进 行扫 描，。已 知 加 合 物 的 检 测 可 以 根 据 其 分 子 量、热 稳 定 性等 性 质，设 计 具 体 的 靶 向 检 测 方 案。然 而，环 境 中 的 遗 传 毒性 物 质 来 源 复 杂，仅 从
12、 个 别 加 合 物 的 角 度 解 释 其 与 特定 肿 瘤 之 间 的 关 系 可 能 并 不 全 面，有 必 要 同 时 检 测 多 个 已 知或 未 知 的 加 合 物，筛 查 潜 在 的 遗 传 毒 性 物 质。“组 学”能 从 整 体 角 度 研 究 机 体 变 化，其 概 念 早 已 运 用 于 基 因 组 学、蛋 白 组 学 和 代 谢 组 学，也 适 用 于 加 合 物 的 检 测。等 以 此 法 在 香 烟 浸 出 物 孵 育 的 卵 泡 细 胞（）中 鉴 定 出 种 与 苯 并 芘 和 氨 基 联 苯 有 关 的 加 合物。加 合 物 组 学 可 以 通 过 同 时 检
13、测 多 个 已 知 或 未 知 的 加 合 物 水 平 来 预 测 遗 传 毒 性 风 险，加 深 加 合 物 在肿 瘤 发 展 进 程 作 用 的 理 解，未 来 很 可 能 成 为 比 单 一 加 合 物 更可 靠 的 生 物 标 志 物。液 质 联 用 加 合 物 组 的 研 究 进 展液 质 联 用 法 检 测 加 合 物，首 先 需 要 将 从 待 测样 本 中 提 取 出 来，水 解 成 单 核 苷，经 过 富 集 纯 化 后 使 用 液 质联 用 法 对 加 合 物 进 行 检 测，其 中 每 个 步 骤 都 可 能 影 响 到 分 析结 果，譬 如 不 同 的 提 取 方 法
14、影 响 的 纯 度 和 得 率，在 线 富集 可 以 减 少 离 线 纯 化 加 合 物 的 损 失，不 同 溶 剂 富 集 加 合 物 效 药 学 研 究.1，.1 果 以 及 引 入 的 基 质 效 应 各 有 不 同，甚 至 不 同 品 牌 的 玻 璃 内 衬管 也 会 影 响 样 品 的 清 洁 度 和 提 取 回 收 率，。水 解 目 前 直 接 分 析 链 和 寡 核 苷 酸 上 甲 基以 外 的 修 饰 物 或 其 他 结 构 变 化 还 较 为 困 难，研 究 者可 以 通 过 核 酸 酶、酸 或 热 等 手 段 将 水 解 为 易 于 分 析 的小 分 子，不 过 水 解 的
15、 同 时 也 丢 失 了 加 合 物 在 序 列 中 的位 置 信 息。甲 酸 或 盐 酸 配 合 的 高 温 是 常 用 的 酸 水 解 方 法，等 将 细 胞 和 细 胞 用 致癌 性 烷 基 化 试 剂 甲 基 亚 硝 基 脲（）、甲 磺 酸 甲 酯（）和 甲 基 亚 硝 胺 基 吡 啶 基 丁 酮（）孵育，然 后 从 细 胞 中 提 取 加 入 的 盐 酸，酸 水 解，测 得 的 烷 基 化 核 苷 加 合 物 的 浓 度 小 于。然 而，高 温 和 酸 性 条 件 有 较 大 的 降 解 风 险，相 较 而 言，酶 解 条件 更 加 温 和，因 此 更 常 用 于 的 处 理（见 表
16、）。表 液 质 联 用 加 合 物 检 测 常 用 的 水 解 酶 种 类、孵 育 浓 度 及 时 间遗 传 毒 性 物 质 文 献 微 球 菌 核 酸 酶 核 酸 酶 磷 酸 二 酯 酶 磷 酸 二 酯 酶 碱 性 磷 酸 酶马 兜 铃 酸（，）（，）（，）（，）烷 基 化 氮 芥 前 药（）；（过 夜，；过 夜，）（过 夜，）（过 夜，）巴 豆 醛（），（）（）食 物 中 含 有 的 致 癌 物如 等，（，）（，）（，）（，）多 种 芳 香 胺或 多 环 芳 烃，（，）（，）（，）（，）环 丁 烷 嘧 啶 二 聚 体（）和 嘧 啶（）嘧 啶 酮 光 产 物（）（过 夜）（过 夜）（过 夜）
17、烯 丙 基 苯 甲 醚（）（，）（，）（，）（，）奥 沙 曲 霉 毒 素（）（，）（，）（，）（，）黄 樟 醚（）、苯 并 芘（），（，）（，）（，）丁 香 酚（）（，）（，）（过 夜，）芥 子 油 苷（）（，）（，）（，）乙 醛（，）（，）（，）注：除 另 有 说 明，酶 用 量 单 位 为；脱 氧 核 糖 核 酸 酶（牛 胰 腺）；核 酸 酶（橘 青 霉 菌，）；磷酸 二 酯 酶（蛇 毒，）；磷 酸 二 酯 酶（牛 脾，）；重 组 酶（大 肠 杆 菌，）。括 号 中 的 时间 表 示 不 同 核 酸 酶 的 孵 育 时 间；、表 示 不 同 核 酸 酶 的 孵 育 顺 序。碱 性 磷 酸
18、酶（大 肠 杆 菌，）；来 源 未 知；碱 性 磷 酸 酶（牛 小 肠，）；蛋 白 磷 酸 二 酯 酶 可 酶 解 核 苷 酸 之 间 的 磷 酸 二 酯 键，是 水 解 过 程 中 常 用 的 核 酸 外 切 酶。磷 酸 二 酯 酶（）的酶 解 方 向 为 到，将 核 苷 酸 游 离 出 来。磷 酸 二 酯 酶（）酶 解 方 向 则 相 反，酶 解 产 物 为 核 苷 酸。常 与 脱 氧 核 糖 核 酸 酶（）和 核 酸 酶（）配 合使 用，其 中 的 作 用 是 将 长 链 酶 解 成 寡 核 苷 酸，则 是 酶 解 寡 核 苷 酸 和 单 链，有 些 序 列 的 具 有 磷 酸 二 酯
19、酶 抗 性，无 法 完 全 水 解 寡 核 苷 酸，加 入 有 助 于 寡 核 苷 酸 完 全 水 解；则 常 搭 配 非特 异 性 核 酸 酶 微 球 菌 核 酸 酶（），；两 种 磷 酸 二 酯 酶有 时 也 会 同 时 使 用。为 了 便 于 质 谱 分 析，生 成 的 核 苷酸 还 要 经 过 碱 性 磷 酸 酶（）水 解 为 核 苷。动 物 来 源 的 较 为 复 杂，研 究 发 现 是 加合 物 检 测 中 引 起 背 景 干 扰 和 基 质 效 应 的 重 要 因 素 之 一。等，将 酶 解 方 案 中 的 用 量 降 低 或 者 换成 纯 度 更 高 的 重 组 内 切 酶，发
20、 现 上 述 问 题 得 到 了很 大 改 善。此 外，来 自 不 同 品 牌 的 核 酸 酶 也 可 能 影 响 加 合 物 的 检 测，来 自 和 两 个 品 牌 的 具 有 不 同 的 脱 氧 腺 苷 脱 氨 酶 活 性 和 磷 酸 酶 活 性，可 能对 碱 基 上 含 有 裸 露 环 外 氨 基 的 加 合 物 有 不 同 影 响。不 论是 酸 水 解 还 是 酶 解，应 考 虑 处 理 过 程 中 加 合 物 的 稳 定性。为 更 好 保 证 结 果 的 可 靠 性，最 好 有 同 位 素 标 记 的 加 合 物内 标 进 行 校 正。液 相 色 谱 条 件 十 八 烷 基 硅 烷
21、键 合 硅 胶 为 填 充 剂 的 色谱 柱 在 加 合 物 及 加 合 物 组 学 的 分 析 中 最 为 常用，。此 外，等 使 用 酰 胺 柱 分 离 了 种 烷 基化 修 饰 核 苷 和 未 修 饰 核 苷。等 则 使 用 氨 基 甲 酰基 键 合 的 亲 水 相 互 作 用 色 谱（）柱，将 有 机 相 比 例 提 高到，从 而 提 高 电 喷 雾 离 子 源（）的 离 子 化 效 率。等，以 巴 豆 醛 或 丙 烯 醛的 加合 物为 对象，比较 了 液 质 色 谱 法 中 常 用的流 动 相 添 加 剂 对 加 合 物 质 谱 响应 的 影 响，发 现 与 甲 酸 铵、乙 酸 铵
22、和 甲 酸 相 比，流 动 相 中 加 入 碳 药 学 研 究.1，.1 酸 氢 铵 后 的 检 测 灵 敏 度最高，推 测 碳 酸 氢 铵 抑 制 了 质 谱 响 应 较差 的 金 属 阳 离 子 加 合 物 的 形 成，且 在 离 子 源 中 降解 形 成 和 水，有 利 于 加 合物的 质子化。等 发现高 比 例 有 机 溶 剂（乙 腈）的 流 动 相 中 加 入 碳 酸 氢 铵，也 可 以提 高 乙 基 加 合 物 和 巴 豆 醛 加 合 物 的 质 谱 响 应。有 研 究 报 道 乙 腈作 为 流 动 相 质 谱 响 应 高 于 甲 醇，但 甲 醇 洗 脱 能 力 弱 于 乙 腈，达
23、 到 相 同 的 保 留 时 间 所 需的 有机 相 比 例 更 高，有 机 相 的 选 择 还需 针 对 具 体 情 况 进 行 优 化。电 离 效 率 随 着 流 速 降 低 而 提 高，将 色 谱 柱 内 径 减 小至 毛 细 管 尺 寸，流 动 相 流 速 降 低 至 以 为 单 位（），与 特 制 的 微 米 级 甚 至 纳 米 级 离 子 源（）配 合，产 生 更 小 的 初 始 液 滴，可 以 提 高 电 离 过 程 中 的 去 溶 剂作 用，而 且 更 小 的 液 滴 包 含 更 少 的 待 测 物，减 少 了 待 测 物 电荷 之 间 的 聚 集 和 竞 争，可 以 极 大
24、提 升 检 测 灵 敏 度。等 使 用 分 析 了 前 列 腺 癌 症 患 者 切除 的 前 列 腺 中 的 加 合 物，采 用，定 量 限 为 个 加 合 物 个 核 苷。等 换 用 离 子源，将 分 析 灵 敏 度 在 原 有 方 法 的 基 础 上 提 高 了 倍。质 谱 扫 描 模 式 除 了靶 向 检 测 待 测 加 合 物 或 利 用中 性丢失 扫 描模式（）筛 选 未 知 加 合 物 外，还 有 许 多基 于中性 丢 失 原 理 优 化 和 发 展 而 来 的 质 谱 扫 描 模 式（图）。等 使 用 电喷 雾 串联质谱的 多反应监 测 模 式（），在 的范 围内检测了 个 离
25、子 对，该 模 式 也 称 伪 中 性 丢 失 模 式（），符 合 条 件 的 离 子 结 合 人 工 筛 选、稳 定 同 位 素 稀 释 以 及 与 对 照品 比较，确 认 了 吸 烟 者 肺 组 织 中 多 个 氧 化 加 合 物 的 存 在。模 式 需 要 多 次 进 样，但 其 灵 敏 度 优 于 模式。譬 如，在 消 化 前 掺 入 相 同 量 的 加 合 物 对 照品，采用扫描 个 离 子 对 的 模 式，加 合 物 的 检测灵敏度 是 模式的 倍，而 加合物 在 模 式下甚 至无法检出。单个离子扫 描 时 间 越多，色谱峰越平 滑，背 景 信 号 越 低，因 此 需 要 平 衡
26、检 测 的 离 子对 数 与进 样 次数。需要 注意的是，仅 依靠 中性 丢 失 的特 征不足 以 确定色谱 峰对应 成 分 就 是 加 合 物，通 过 模式和 模 式发现 的 加 合物仍需 进 一 步 进 行鉴 定。等 率 先使用 线性离子肼 质谱（）对 产生 中 性丢失 的 产物离子进 行 三 级 扫 描（），发现 此法可 以 提供更多 的结构信息。等 改用 高分 辨质谱，为 加合 物鉴定 提 供 了 更 有 利 的 支 持。受 限 于现 有仪器 扫 描速度不 足，模 式 无 法 扫 描 所 有 离 子，数据 采 集 更 倾 向 于 丰 度 较 大 的 离 子，导 致 低 丰 度 加 合
27、物 的 信 息丢 失。与此 相比，数 据 非 依 赖 型 采 集 模 式（）不 依 赖 离 子丰 度，可以无偏向 的 收 集目 标 范 围 内 的 所 有 母 离 子（）及 其 光 谱。蛋 白 质 组 学 中 的（）扫描 模 式将 扫描分割成 更小的窗口，简化了 复杂的 数据处 理，同 时 提 高 的 质 量。等 借 鉴 并 优 化 了 扫 描模 式，将 扫 描 分 为 宽 度 为 扫 描 窗 口（），成 功 用 于 加 合 物 组 学 的 检 测，提 高 了母离 子和碎 片离 子的检 测灵 敏 度。该 扫 描 方 式 不 仅 可 以 检 测以糖 基中性 丢失 为特征 的 加 合 物，还 可
28、以 在 不 重 新 进 行数 据采 集的情 况下 挖 掘丢 失碱 基 或其 他质 谱 碎裂 模 式 的 加合 物相关 信息。数 据 处 理 等 开 发 了 一 种 新 的 检 测 算 法，结 合碎 片过 滤的开 源软 件，建 立了一 个筛 选和推定 加 合物 的自动 化数 据 分 析 流 程，减 少 了 数 据 分 析 的处理 时间和 难度（见 图）。和 实 验 室 为 促进 加合 物 鉴 定 和 数 据 挖 掘，联 合 多 个 合 作 者 建 立 一 个 加合 物开 源数据 库，其中 加 合 物对 照品 的 高 分 辨 质谱图 均来自 和 这两个最 常用 的高分 辨质 谱平台，为 加 合物
29、的检 测和鉴 定 提 供 了 方 便。高 分 辨 质 谱 仪对于 加 合物 的鉴定 具有 重 要 作 用，但 检 测 的 高 成 本 限 制了它 的广泛 使用。等 使用 组 学 分 析 方 法 中 常 用 到 的多变 量分析 方法 偏 最 小 二 乘 判 别 分 析 法（），有 效 排除了 的 假 阳 性 结 果，更 广 泛 使 用 的 低 分 辨 质 谱 结 合数据 处理，或 许 能提 供与 高 分辨 质谱 相 当的功能。中 性 丢 失 扫 描 模 式（）；伪 中 性 丢 失 扫 描 模 式（）；中 性 丢 失 触 发 三 级 质 谱 的 扫 描 方 式（）；（）扫 描 模 式；广 泛 选
30、择 离 子 监 测串 联 质 谱（）图 加 合 物 检 测 中 常 用 的 质 谱 扫 描 模 式 总 结 与 展 望近 年 来 新 的 样 品 处 理 方 式、液 质 联 用 仪 器 和 扫 描 方 法、数 据 处 理 方 式 不 断 发 展，加 合 物 组 学 技 术 也 在 逐 渐 成 为多 种 加 合 物 同 时 检 测 以 及 未 知 加 合 物 筛 查 的 有 力 工具。加 合 物 的 样 品 前 处 理 较 为 烦 琐，水 解 时 间 长，修 饰核 苷 需 要 富 集 和 分 离。加 合 物 组 数 据，特 别 是 从 复 杂 基质 中 采 用 数 据 非 依 赖 模 式 采 集
31、 的 数 据，需 要 先 依 据 中 性 丢 失等 特 征 进 行 筛 选，再 结 合 碎 片 离 子 信 息 和 暴 露 源 等 情 况，才能 判 断 该 离 子 是 否 是 加 合 物 以 及 是 否 有 未 知 的 遗 传 毒性 物 质 存 在。更 加 简 便 易 行 的 样 品 处 理 标 准 流 程、数 据 处 理工 具 和 通 用 数 据 库 还 需 要 进 一 步 开 发，遗 传 毒 性 物 质 与 癌 症等 疾 病 之 间 更 深 层 次 的 关 联 以 及 损 伤 修 复 等 问 题 也 需要 更 深 入 的 研 究。参 考 文 献：，（）药 学 研 究.1，.1 ，（），（
32、）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）（）（），（）（）（），（），（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）（）（），（）：，（）：，（）（），（）：，（），（）：，（）：，（），（）：，（），（）：，（），（）：药 学 研 究.1，.1 ，（）：，（）：，（）：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：药 学 研 究.
33、1，.1 ，（），（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：，（）：，？，（）：，（），（）：，（）：（上 接 第 页），（）：刘 帆 甘 草 酸 自 组 装 体 系 对 中 药 单 体 成 分 的 增 溶 促 稳 作 用 及 其配 伍 机 制 研 究 天 津：天 津 中 医 药 大 学，马 璐 璐 甘 草 酸 的 纤 维 化 自 组 装 及 在 界 面 主 导 食 品 胶 体 的 应 用研 究 广 州：华 南 理 工 大 学，（）：王 文 苹，刘 珍 珍，常 道 潇，等 甘 草 酸 水 溶 液 的 凝 胶 化 特 性 中 国 医 院 药 学 杂 志，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，（）：武 金 丹 胆 甾 酸 骨 架 分 子 离 子 识 别 体 系 和 三 萜 骨 架 水 凝 胶 体 系研 究 北 京：清 华 大 学，（）：，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（）：孙 仪 萌 甘 草 酸 的 自 组 装 螺 旋 纳 米 结 构 作 为 催 化 不 对 称 反 应 的 骨 架 郑 州：郑 州 大 学，：，（）：，（）：许 格 甘 草 次 酸 环 糊 精 主 客 体 作 用 调 控 的 超 分 子 聚 合 物 水 凝胶 北 京：北 京 化 工 大 学，（）：药 学 研 究.1，.1
