2017届高考生物一轮复习 专题1-4（课件+试题）（打包8套）新人教版选修3.zip

1基因工程1．(2016·陕西师大附中月考)植酸酶，是酶的品种之一，在动物饲料加工中发挥重要作用。植酸酶能分离出植酸分子中的磷，将植酸(盐)降解为肌醇和无机磷，同时释放出与植酸(盐)结合的其它营养物质。(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的 ________，最终通过改变植酸酶的________，再通过基因工程得到新的植酸酶。(2)培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞最常用的方法是________。(3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过________方法转入猪的________中。将早期胚胎培养至一定时期通过 ________方法，从而一次得到多个转基因猪个体。(4)若这些转基因植物被推广种植，可能会对生态环境产生怎样的影响？______________________________。【解析】 (1)蛋白质工程是根据蛋白质预期功能推断出相关结构，再根据结构推测氨基酸序列从而找到相同脱氧核苷酸序列，得到相关基因，通过该基因合成预期蛋白质。(2)目的基因导入植物细胞通常用农杆菌转化法。(3)目的基因导入动物受精卵通常用显微注射法。对转基因猪桑葚胚和囊胚进行胚胎分割和胚胎移植，可以一次得到多个转基因猪个体。(4)转基因植物能够分离出植酸分子中的磷，将植酸(盐)降解为肌醇和无机磷，从而减少磷肥使用，降低环境中磷污染程度；不利方面是该基因可能会随个体的杂交，扩散到环境中去，造成基因污染。【答案】 (1)空间结构 基因序列(结构)(2)农杆菌转化法 (3)显微注射 受精卵 胚胎分割和胚胎移植(4)减少磷肥使用，降低环境中磷污染程度；该基因可能会随个体的杂交，扩散到环境中去，造成基因污染。2．(2016·黄石期中)通过基因工程的方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并获得成功表达。棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞中，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。请回答下列问题：(1)下列所示的黏性末端是由________种限制性核酸内切酶作用产生的。(2)利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因工程操作步骤中的第三步，即________。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，则可以通过DNA 合成仪用化学方法直接________。(3)该目的基因在导入受体细胞前需要与载体结合，目前经常使用的载体是________。(4)基因工程操作的第四步是目的基因的检测与鉴定，其中分子水平的检测又分三步：首先要检测转基因生物的 DNA 上是否插入了目的基因，采用的技术是________；其次还要检测________，方法同样是采用分子杂交技术；最后检测________，方法是 ________杂交。【解析】 (1)限制性核酸内切酶能识别特定的核苷酸序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键。题图显示的黏性末端有 4 种，因此是由 4 种限制性核酸内切酶作用产生的。(2)基因工程操作步骤中的第三步是：将目的基因导入受体细胞。获取目的基因时，如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过 DNA 合成仪用化学方法直接人工合成。(3)质粒是基因工程中经常使用的载体。(4)检测转基因生物的 DNA 上是否插入了目的基因，采用 DNA 分子杂交技术；检测目的基因是否转录出了 mRNA，采用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗原2—抗体杂交技术。【答案】 (1)4(2)将目的基因导入受体细胞 人工合成(3)质粒(其他合理答案也可)(4)DNA 分子杂交技术 目的基因是否转录出了 mRNA 目的基因是否翻译成蛋白质 抗原—抗体3．(2016·上海七校联考)图 1 表示含有目的基因 D 的 DNA 片段长度(bp 即碱基对)和部分碱基序列，图 2 表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有 Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4 种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。请回答下列问题：(1)图 1 的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由________(基团)连接。(2)若用限制酶 Sma Ⅰ完全切割图 1 中 DNA 片段，产生的末端是________末端，其产物长度为________。(3)若图 1 中虚线方框内的碱基对被 T－A 碱基对替换，那么基因 D 就突变为基因 d。从杂合子分离出图 1 及其对应的 DNA 片段，用限制酶 Sma Ⅰ完全切割，产物中共有________种不同 DNA 片段。(4)若将图 2 中质粒和目的基因 D 通过同种限制酶处理后进行，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是________。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加 ________的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因 D 不能正确表达，其最可能的原因是________。(5)有关质粒描述错误的是( )A．质粒是能够自我复制的环状 DNA 分子 B．质粒是唯一的运载体C．质粒上有多个酶切位点 D．质粒可在宿主外单独复制【解析】 (1)基因重组技术的结构基础是 DNA 具有相同的结构。(2)将目的基因导入棉花的方法是农杆菌转化法；目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体 DNA 上，检测其方法是 DNA分子杂交技术。(3)基因工程育种的优点是目的性强，能打破物种的生殖隔离界限。(4)过敏反应的特点是发作迅速、消退快。【答案】 (1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖(2)平 537bp、790bp、661bp(3)4(4)BamH Ⅰ 抗生素 B 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因 D 与质粒反向连接(5)BD4．(2016·三明一中月考)为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶 D 基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。(1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用________法从陆地棉基因文库中获取酶 D 基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因。所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如下图所示。则用________和________酶处理两个基因后，可得到________(填图中字母)端相连的融合基因。3(2)将上述融合基因插入右上图所示质粒的 T－DNA 中，构建________并导入农杆菌中，将获得的农杆菌接种在含________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。(3)剪取油菜的叶片放入染液中一段时间后筛选获得转基因油菜细胞。该细胞通过________技术。可培育成转基因油菜植株。(4)提取上述转基因油菜的 mRNA，在逆转录酶的作用下获得 cDNA，再依据________的DNA 片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检侧，可判断融合基因是否完成________。【解析】 (1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用 PCR 法从陆地棉基因文库中获取酶 D 基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，在上述引物设计时，分别在引物中加入如图甲所示酶的识别序列，这样可以用 ClaⅠ限制酶和 DNA 连接酶处理两个基因后，得到 A、D 端相连的融合基因。(2)将上述融合基因插入图乙所示 Ti 质粒的 T－DNA 中，构建表达载体即重组质粒并导入农杆菌中，将获得的农杆菌接种在含四环素的固体平板上培养得到单菌落，再利用液体培养基震荡培养，可以得到用于转化的浸染液。(3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是利用农杆菌将融合基因导入油菜细胞，进一步筛选后获得转基因油菜。(4)提取上述转基因油菜的 mRNA，在逆转录酶的作用下获得 cDNA，再依据融合基因的DNA 片段设计引物进行扩增，对扩增结果进行检测，可判断融合基因是否完成转录。【答案】 (1)PCR(聚合酶链式反应/多聚酶链式反应) ClaⅠ DNA 连接(答“连接”也计分) A、D(全对才得分)(2)基因表达载体(重组质粒/表达载体) 四环素(3)植物组织培养(4)融合基因 转录5．(2016·泰安二中检测)抗草胺磷(一种除草剂)转基因大豆的培育过程如图所示。(1)用________处理，获得上图中所示的“来自矮牵牛的抗草胺磷基因” 、含有抗四环素基因的“质粒” 。其中质粒上“抗四环素基因”的作用是________。(2)图中①应为______________________。(3)部分农杆菌不能在培养基(含四环素)上生长的原因是________________________。(4)在 A→D 过程中，A→B 过程在恒温箱中________(填“避光”或“光照”)培养，注意观察、记录________的生长情况。(5)转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，其高效表达的观察指标是________。(6)从某种蛋白质的氨基酸序列出发，利用________方法获得目的基因，通过基因工程可以生产自然界中不存在的蛋白质。下列有关基因工程中运载体的描述，正确的是________。(多选)A．能够在宿主细胞中复制并稳定保存是运载体的必备条件之一B．一种运载体只能运载一种目的基因C．使用的运载体有质粒、λ 噬菌体衍生物和动植物病毒等D．基因表达载体的构建是一样的，不因受体细胞种类、目的基因导入方法的不同而有所差异【解析】 据图分析，来自矮牵牛的抗草胺磷基因属于目的基因，质粒中的抗性基因属于标记基因，①表示基因表达载体的构建；大豆细胞属于受体细胞，将重组质粒导入大4豆细胞的方法是农杆菌转化法；A→B 表示脱分化，B→C 表示再分化，C→D 表示形成试管苗。(1)用同一种限制酶处理“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”和含有抗四环素基因的“质粒”，便于形成相同的黏性末端。质粒上的“抗四环素基因”属于标记基因，作用是供重组质粒的鉴定和选择。(2)图中①是由“来自矮牵牛的抗草胺磷基因”和质粒形成的重组质粒。(3)未导入重组质粒的农杆菌不能在含有四环素的培养基上生长。(4)A→B 过程表示脱分化，在恒温箱中避光培养，有光时形成维管组织，而不能形成愈伤组织。(5)转抗草胺磷基因成功的大豆植株内，抗草胺磷基因能够高效表达，观察指标是大豆植株对草胺磷有抗性。(6)从某蛋白质的氨基酸序列出发，利用人工合成方法获得目的基因。常见的运载体是质粒、λ 噬菌体衍生物和动植物病毒；作为运载体的必备条件是：能够在宿主细胞中复制并稳定保存，要有限制酶的切割位点，具有标记基因等；由于受体细胞有植物、动物、微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不同，因此，基因表达载体的构建上也有所差异，不可能千篇一律；故选 AC。【答案】 (1)同一种限制酶 供重组质粒的鉴定和选择(2)重组质粒(3)重组质粒未导入(4)避光 愈伤组织(5)大豆植株对草胺磷有抗性(6)人工合成 AC6．某研究小组欲将已知抗盐基因导入原生质体培育抗盐菊科植物。请回答：(1)为获得大量抗盐基因，可通过________技术进行扩增，也可将其连接到________上，通过大肠杆菌培养扩增。(2)制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体________。酶混合液需通过________灭菌，才能用于无菌原生质体的制备，整个无菌操作过程需在________中进行。(3)可通过________方法，直接将抗盐基因导入原生质体的细胞核。此外，还可用聚乙二醇融合、电击等方法导入。导入后的原生质体需再生出________，经持续分裂获得愈伤组织，进一步分化获得再生植株并扩大繁殖。(4)利用带有标记的抗盐基因特殊片段与从转基因植株提取的 RNA 进行________，验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。通过将扩大繁殖的再生植株转接到含有________的培养基，根据生长状况初步筛选出抗盐植株。(5)为了获得大量该转基因植株，可将带腋芽的茎段转入适宜培养基中，获得大量________，然后转入生根培养基中诱导生根，形成再生植株。再生植株需进行 ________(不定项选择)。A．无菌处理B．锻炼C．去除根部残留的培养基D．逐步提高湿度处理后才能移种大田。【解析】 (1)为获得大量抗盐基因，可通过 PCR 技术进行扩增，也可将其连接到质粒上，通过大肠杆菌培养扩增。(2)制备叶片原生质体的酶混合液中，一般含较高浓度的甘露醇，其目的是避免制备的原生质体吸水胀破。为了防止酶加热变性和原生质体加热失活，需要单独用 G6玻璃砂漏斗过滤灭菌，才能用于无菌原生质体的制备；为了避免杂菌污染，整个无菌操作过程需在超净台中进行。(3) 将抗盐基因直接导入原生质体的细胞核，可采用显微注射方法。导入后的原生质体再生出细胞壁，并且通过植物组织培养技术使其脱分化形成愈伤组织，再分化获得再生植株并扩大繁殖。(4)可通过分子杂交技术来验证抗盐基因是否被整合到受体的细胞中并转录。欲初步筛5选出抗盐植株，可将扩大繁殖的再生植株转接到含有较高浓度 NaCl(盐)的培养基上继续培养，观察其生长状况。(5)为了获得大量该转基因植株，可借助植物组织培养技术，将带腋芽的茎段转入适宜培养基中培养以获得大量丛状苗，然后转入生根培养基中诱导生根，形成再生植株。再生植株移种大田前，需去除根部残留的培养基，并进行锻炼，以使其能够适应移栽后的环境，提高成活率。【答案】 (1)PCR 质粒(2)吸水胀破 过滤(G6 玻璃砂漏斗) 超净台(3)显微注射 细胞壁(4)分子杂交 较高浓度 NaCl(盐)(5)丛状苗 BC(答案不全不得分)7．(2016·天津联考)科学家通过基因工程，成功培育出能抗棉铃虫的棉花植株——抗虫棉，其过程大致如图所示。下列是有关基因工程和细胞工程的问题，请据图分析回答：(1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是________________________。(2)上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了 ________法，这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是________，还需要通过检测才能知道，检测采用的方法是________。(3)利用基因工程技术培育抗虫棉，相比诱变育种和传统的杂交育种方法，具有________和________等突出的优点，但是目前基因工程仍不能取代传统的杂交育种和诱变育种。与基因工程技术相比，杂交育种和诱变育种方法主要具有______________的优点。(4)某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤瘙痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失，该现象很可能是_________________________。【解析】 (1)细菌的基因之所以能“嫁接”到棉花细胞内，原因是组成细菌和植物的DNA 分子的空间结构和化学组成相同。(2)述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用了农杆菌转化法；目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体 DNA 上，检测采用的方法是 DNA 分子杂交技术。(3)与诱变育种和传统的杂交育种方法相比，利用基因工程技术培育抗虫棉具有目的性强和能有效地打破物种的生殖隔离界限等突出的优点；与基因工程技术相比，杂交育种和诱变育种方法主要具有操作简便易行的优点。(4)某棉农在食用该抗虫棉种子压榨的棉籽油炒芹菜后，出现鼻塞流涕，皮肤瘙痒难忍症状。停用一段时间后这些症状会自然消失，该现象很可能是过敏反应。【答案】 (1)组成细菌和植物的 DNA 分子的空间结构和化学组成相同(2)农杆菌转化 目的基因是否插入到受体细胞染色体 DNA 上 DNA 分子杂交技术(3)目的性强 能有效地打破物种的生殖隔离界限 操作简便易行(4)过敏反应1胚胎工程、生物技术的安全性和伦理问题1．(2016·揭阳一中期中)Rag 2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES 细胞)对 Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：(1)步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的________，此技术属于________工程范畴。(2)步骤②中，重组胚胎培养到________期时，可从其________中分离出 ES细胞。培养 ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是________。(3)步骤③中，在构建含有 Rag2基因的表达载体时，可以根据 Rag2基因的________设计引物，利用________技术扩增 Rag2基因片段。并且同时用 HindIII和 PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得 Rag2基因片段，这样做的目的是：________。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有________酶的酶切位点。(4)为检测 Rag2基因的表达情况，可提取治疗后的小鼠骨髓细胞的蛋白质，用________进行杂交实验。【解析】 (1)核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中，所以实验前要去除卵母细胞的细胞核；此技术属于细胞工程的范畴。(2)内细胞团位于囊胚中，所以重组胚胎培养到囊胚期；培养 ES细胞时，为满足细胞代谢的需要，可在培养基中加入的天然成分是动物血清。(3)设计引物要遵循碱基互补配对原则，所以根据 Rag2基因的核苷酸序列进行设计；Rag2基因是利用限制酶 HindⅢ和 PstⅠ切割获得的，这样可以防止 DNA片段的自身环化，同时表达载体应具有 HindⅢ和 PstⅠ的酶切位点。(4)基因表达的产物是蛋白质，所以提取小鼠骨髓细胞的蛋白质进行抗原—抗体杂交。【答案】 (1)细胞核 细胞(2)囊胚 内细胞团 动物血清(3)脱氧核苷酸序列 PCR 防止 DNA片段的自身环化 HindⅢ和 PstⅠ(4)蛋白的抗体2．(2016·柳铁一中月考)下图为经过体外受精和胚胎分割移植培育优质奶牛的过程，请回答下列问题。(1)A细胞是________，在进行体外受精前要对精子进行________处理。(2)进行胚胎分割时，应选择发育到________时期的胚胎进行操作。(3)②指的是________。(4)通过胚胎分割产生的两个或多个个体具有相同遗传性状的根本原因是________。(5)在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意________。(6)受体母牛必须和供体牛属于________。移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是________。【解析】 将获能精子与处于减数第二次分裂中期的次级卵母细胞融合即可得到受精卵，受精卵经过体外培养形成早期胚胎，为了快速繁育优良品种，可以采用胚胎分割的技术手段，即选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚进行分割，分割后产生的个体因为所含的遗传物质相同，所以性状表现很相似。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内2细胞团均等分割，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。大量的研究已经证明，受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。【答案】 (1)(次级)卵母细胞 获能(2)桑椹胚或囊胚 (3)囊胚腔(4)具有相同的遗传物质(5)胚胎分割要将内细胞团均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育(6)同一物种 受体子宫对外来胚胎不发生排斥反应3．(2016·荆州中学月考)自然条件下，哺乳动物不发生孤雌生殖。2014 年 3月，云南农大科研团队把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理，使其发育成胚胎，移植到代孕母猪体内，获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪，现将两种技术进行比较。(1)图中过程①②③④是获得孤雌生殖克隆猪的技术流程，那么获得核移植克隆猪的技术流程是过程________(填序号)。(2)孤雌生殖克隆猪仍然是二倍体生物，但由于缺失________方亲本基因，导致其生长发育中出现多种问题，给研究者提供了很好的材料。(3)孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞________，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。(4)体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞，需要选择________________时期的卵母细胞，并用微型吸管吸出________。(5)早期胚胎移植时，必需移植到同种________ 的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。(6)可以从良种不同的克隆猪中提取 mRNA进行研究，也可通过________方法得到多种cDNA, 并通过________技术扩增产物。【解析】 (1)分析过程图可知，获得核移植克隆猪的技术流程是过程⑤核移植、⑥早期胚胎培养、③胚胎移植、④胚胎发育。(2)分析过程图可知，孤雌生殖克隆猪是二倍体生物，但基因全部来自母本，不含来自父方亲本的基因。(3)孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞细胞核的全能性，使其发育成早期胚胎，得到克隆猪。(4)体细胞核移植时需要选择处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，并用微型吸管吸出卵母细胞的细胞核和第一极体，再移入体细胞的细胞核。(5)早期胚胎移植时，必需移植到同种且生理状态相同的其他雌性动物子宫中，才可能移植成功。(6)通过反转录方法可得到多种 cDNA, 并通过 PCR技术扩增产物。【答案】 (1)⑤⑥③④(2)父(3)细胞核全能性(或增殖分化)(4)减数第二次分裂中期 细胞核和第一极体(5)生理状态相同(6)反转录 PCR4．(2016·三明一中月考)下面是畜牧业生产上培育某种优良种牛的两种方法，请分析回答下列问题。3(1)方法Ⅰ和方法Ⅱ均用到的生物技术有________和________。(2)用激素处理的目的是使 B牛________，从 B牛体内获得的卵母细胞需要培养到________(时期)才能与精子结合。(3)A牛的精子必须在 B牛的生殖道中经过相应的生理变化后，才能与 B牛的卵细胞结合，完成受精作用，这个过程叫作________。卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙能够观察到________。(4)生产上常用________期的胚胎进行胚胎移植。若希望同时获得多个性状相同的家畜个体，可以使用 ________技术。【解析】 (1)试管动物技术涉及到的技术有体外受精、早期胚胎培养和核移植，克隆动物技术涉及的技术有核移植、动物细胞培养和胚胎移植，因此两者均用到的技术手段有动物细胞培养技术和胚胎移植技术。(2)用促性腺激素处理使得供体母牛超数排卵；卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中期才能与获能精子结合。(3)精子在生殖道内经过相应生理变化后，才能与卵子结合，称为精子获能；卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带的间隙能够观察到两个极体。(4)胚胎移植需选择处于桑椹胚或囊胚期的胚胎；来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此获得多个性状相同的家畜可用胚胎分割技术。【答案】 (1)动物细胞培养 胚胎移植(2)超数排卵 减数第二次分裂中期(MⅡ期)(3)精子获能 两个极体 (4)桑椹胚(或囊胚) 胚胎分割移植5．(2016·正定中学质检二)下图是将目的基因导入动物细胞，培育转基因动物的常用操作程序。根据图示过程和所学知识，将下面操作程序补充完整。(1)构建基因表达载体：在构建基因表达载体时常要用到________两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与________的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是________。(2)获得足够数量的受精卵：为了获得足够数量的受精卵，先利用________刺激超数排卵。雌鼠经过交配，将受精卵从输卵管中取出。(3)将目的基因导入细胞：通常采用 ________技术将目的基因导入受精卵。(4)早期胚胎培养：早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及________等物质。当胚胎培养到适宜的阶段时，可进行胚胎移植。(5)胚胎移植：在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行________处理。移植后，还要对受体雌鼠进行妊娠检查。(6)转基因鼠的检测：经过一段时间妊娠后，产下一群小鼠，为了检测哪些是转基因鼠，可以用________作探针，进行 DNA分子杂交检测。【解析】 (1)在构建基因表达载体时常要用到限制酶、DNA 连接酶两种工具酶。如果目的基因要在乳腺细胞中表达，基因表达载体构建时要将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子、标记基因和终止子等组件重组在一起，其中标记基因的作用是：鉴定目的基因是否导入受体细胞并将含有目的基因的细胞筛选出来。(2)可用促性腺激素对雌性鼠供体进行处理，使其超数排卵。(3)将目的基因导入动物细胞(受精卵)，通常采用显微注射技术。(4)早期胚胎培养的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及动物血清等物质。4(5)在胚胎移植前要对接受胚胎的受体进行同期发情处理，以保证胚胎移植前后所处的生理环境相同。(6)要想检测目的基因是否整合到受体细胞的染色体上，需要用放射性同位素等标记的目的基因做探针，与转基因小鼠细胞中提取的核 DNA分子进行 DNA分子杂交，如果出现杂交带，说明目的基因导入成功。【答案】 (1)限制酶、DNA 连接酶 乳腺蛋白基因 鉴定目的基因是否导入受体细胞并将含有目的基因的细胞筛选出来(2)促性腺激素(3)显微注射 (4)动物血清(1 分)(5)同期发情(6)放射性同位素等标记目的基因6．(2016·重庆一中月考)治疗性克隆的最终目的是用于干细胞治疗，而非得到克隆个体，下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。(1)过程 A表示________，是目前实现体细胞克隆的关键技术，正常情况下，细胞①采用________期的卵母细胞。(2)C表示定向诱导技术，其诱导的对象是从[ ]________分离出来的胚胎干细胞。([ ]内填数字，________填名称)(3)使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入________等天然成分。(4)在培养过程中，必须用________处理，使细胞分散。(5)在体外培养条件下， 为维持胚胎干细胞的不分化状态，通常在培养皿中铺上一层________细胞，或在培养液中添加抑制因子。(6)按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是 ________。(7)若将上述技术用于白血病人的骨髓移植，且图中患者是 A型血(Ⅰ Ai)，提供卵细胞的女性是 AB 型血(Ⅰ AⅠ B)的，则骨髓移植成功后患者的血型是________型。【解析】 (1)由图可知过程 A是将供体的细胞核与受体的细胞质重组构成的细胞核移植。而受体细胞通常用减数第二次分裂中期的细胞。(2)3是滋养层细胞，将来发育为胎盘和胎膜的，而 4是具有发育全能性的内细胞团，因此是从 4内细胞团分离出的胚胎干细胞。(3)培养胚胎干细胞时通常需要加入血清天然成分，是因为对动物细胞培养的条件目前还不是十分清楚，所以要加入天然成分。(4)在培养过程中要使细胞分散需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(5)如果要维持胚胎干细胞不分化状态，在培养皿中应铺上一层饲养层细胞，通常采用输卵管上皮细胞，或者是加入抑制因子，此时只分裂不分化。(6)因为器官最终来源属于是自身的，所以在器官移植过程中不会产生免疫排斥反应。(7)移植后病人自身的血型不会改变，所以仍然是 A型。【答案】 (1)细胞核移植 MⅡ(2)4 内细胞团(3)血清(4)胰蛋白酶(5)饲养层(或输卵管上皮)(6)不会产生排斥反应 5(7)A(1分)7．(2016·辽宁五校联考)胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件下进行的模拟操作。请根据动物受精和早期胚胎发育过程回答下列问题：(1)在动物体内卵子的发生过程中，减数第一次分裂完成的时间是在雌性个体________，当次级卵母细胞发育到________时，才具备与精子受精的能力，受精的场所是________，判断卵子是否受精的重要标志是________________________。(2)受精过程中防止多精入卵的两道屏障是________和________。(3)胚胎发育过程首先是卵裂，所得每个子细胞的体积比受精卵________，胚胎发育到 ________期会导致透明带破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做孵化。(4)胚胎干细胞是由囊胚的________或________中分离出来的一类细胞，在人类疾病治疗和科学研究中有着广泛的应用。【解析】 (1)减数第一次分裂完成是在雌性个体排卵前后，次级卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时，才具备受精能力，受精作用的场所是输卵管；卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带之间看到两个极体。(2)防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜封闭作用。(3)在卵裂期内，进行有丝分裂，子细胞的体积比受精卵小，当胚胎发育到囊胚期，透明带破裂。(4)胚胎干细胞是由囊胚的内细胞团或原始性腺中分离得出。【答案】 (1)排卵前后 MⅡ中期 输卵管 在卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到两个极体(2)透明带反应 卵细胞膜反应(顺序可颠倒)(3)小 囊胚(4)内细胞团 原始性腺8．(2016·重庆南开中学月考)科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用 iPS细胞培养出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：(1)从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为________，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为________。(2)图中 2－细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，这过程称为________，也可以从灰鼠体内取出卵子，通过 ________后进行早期胚胎培养获得。(3)图中重组囊胚通过 ________技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用________方法保存。(4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由早期胚胎或者________分离培养获得。iPS 与 ES细胞同样具有发育的全能性，有望通过诱导 iPS细胞进行定向________后用于疾病的细胞治疗。【解析】 (1)原代培养指将动物组织用酶处理成单个细胞后进行的初次培养，接触抑制指贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。(2)将早期胚胎从母牛子宫中冲洗出来的方法叫冲卵。(3)暂不进行胚胎移植的胚胎可放入－196℃的液氮中冷冻保存。(4)胚胎干细胞简称 ES或 EK细胞，是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞，iPS 与 ES细胞一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。【答案】 (1)原代培养 接触抑制6(2)冲卵 体外受精 (3)胚胎移植 冷冻(或低温)(4)原始性腺 诱导分化1细胞工程1．(2016·重庆巴蜀中学期中)某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量________。(2)在动物细胞培养应在含 5%CO2的恒温培养箱中进行，CO 2的主要作用是______________________________。(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，会出现________现象，若乙细胞传代培养 10—50 代左右，发现增殖逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的________可能会发生变化。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞与乙细胞相比，可以传代次数更多的是________细胞。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用________消化处理。(4)理论上，甲细胞可与某种 B 淋巴细胞合成________细胞，从而来制备________，使患者获得特异性免疫。【解析】 (1) 将动物肝肿瘤细胞与正常肝细胞在相同条件下培养一段时间后，培养液中肝肿瘤细胞会比正常肝细胞多，原因是癌细胞的细胞周期比正常细胞短。(2)动物细胞培养过程中，需要保持适宜的培养条件，恒温培养箱中 CO2的主要作用是维持培养液的 pH。(3)动物细胞在培养容器中培养时具有贴壁生长和接触抑制的特点；动物细胞在最初的培养过程中能很好地保持遗传特性，随着分裂次数的增多，有部分细胞的遗传特性会发生改变，成为癌细胞；癌细胞在体外培养条件下能无限增殖，其传代次数多于正常细胞；动物细胞培养前可用胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)处理组织块，使细胞相互分散。(4)将癌细胞与浆细胞融合，得到的杂交瘤细胞可同时具有两种细胞的特性，在体外培养条件下既能无限增殖、又能产生单一抗体，杂交瘤细胞可用来制备单克隆抗体。【答案】 (1)多 (2)维持培养液的 pH (3)接触抑制 遗传特性 甲 胰蛋白酶(或胶原蛋白酶)(4)杂交瘤 单克隆抗体2．(2016·枣阳一中一模)在 20 世纪初，科学家用植物体细胞杂交的方法，将番茄的原生质体和马铃薯的原生质体融合，成功地培育出了“番茄—马铃薯”杂种植株。如下图，其中①—⑤表示过程，英文字母表示细胞、组织或植株。据图回答下列问题：(1)实现过程②的技术是________。与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为________。(2)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，依据的原理是________，其中过程④相当于________过程，⑤涉及的分裂方式为________。(3)若番茄细胞内有 m 条染色体，马铃薯细胞含 n 条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含________条染色体；若杂种细胞培育成为“番茄—马铃薯”植株为四倍体，则此杂种植株的花粉经离体培育得到的植株属于几倍体植株？________。(4)如果形成 c 细胞的 a、b 细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄植株 f 的处理方法是________。(5)若 a、b 依次为小鼠骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞，那么该方案的目的是________。【解析】 (1)过程②的技术是植物原生质体融合技术。过程③为杂种原生质体再生细胞壁，与植物细胞高尔基体密切相关。(2)利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程为植物组织培养，依据的原理是植物细胞全能性。过程④为高度分化的植物体细胞脱分化形成没有分化的愈伤组织，为脱分化。⑤为2愈伤组织再分化形成组织，进行有丝分裂。(3)“番茄—马铃薯”细胞内含(m＋n)条染色体。花粉经离体培育得到的植株属于单倍体，不管其花粉含几个染色体组。(4)诱导植物多倍体形成用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，诱导染色体组加倍，形成多倍体番茄植株 f。(5)制备单克隆抗体需要小鼠骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞，融合为杂交瘤细胞，生成单克隆抗体。【答案】 (1)原生质体融合 高尔基体(2)细胞的全能性 脱分化 有丝分裂(3)m＋n 单倍体(4)用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗(5)制备单克隆抗体3．(2016·云南师大附中月考)下图表示植物体细胞杂交技术的过程，请据图回答：(1)过程①使用________处理细胞，以去除植物细胞壁。(2)杂种细胞经过④和⑤过程可以培育成杂种植株，说明________。(3)过程②常用的物理诱导方法包括________等。化学方法一般用的诱导剂是________。(4)④过程中进行的细胞分裂方式是________，该过程形成愈伤组织后要将其转接到________的培养基上诱导其分化。(5)若番茄的体细胞内含 a 条染色体，马铃薯的体细胞内含 b 条染色体，则番茄—马铃薯的体细胞内含________条染色体；在自然状态下番茄和马铃薯不能有性杂交，原因是它们之间存在________。【解析】 (1)进行植物细胞杂交的第一步，就是要去掉位于细胞最外层的细胞壁，但在去掉细胞壁时又不能损伤细胞的内部结构和功能，细胞壁的主要成分是纤维素，利用酶的专一性，选用纤维素酶无疑是最佳方法；(2)去掉细胞壁以后的植物细胞称为原生质体，必须经过人工诱导后才能实现二者的融合，形成一个新的细胞，称为杂种细胞；杂种细胞再经过脱分化④后通过多次分裂，形成愈伤组织；愈伤组织经再分化⑤形成各种组织，最终形成一个完整的新个体，这说明杂种细胞具有全能性；(3)过程②是诱导原生质体融合的过程，常用的方法有：物理法(离心、振动、电刺激等)和化学法 [聚乙二醇(PEG)]；(4)④(脱分化)过程中进行的细胞分裂方式是有丝分裂，杂种细胞通过多次有丝分裂形成愈伤组织，然后将其转接到含有不同激素成分的培养基上诱导其分化；(5)番茄有 a 条染色体，马铃薯含 b 条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞内含 a＋b 条染色体；番茄与马铃薯是两个不同的物种，它们之间存在着生殖隔离，在自然状态下番茄和马铃薯不能进行有性杂交。【答案】 (1)纤维素酶(或纤维素酶和果胶酶)(2)杂种细胞具有全能性(3)离心、振动、电激 聚乙二醇(4)有丝分裂 含有不同激素成分(5)a＋b 生殖隔离4．(2016·玉溪一中月考)以下为植物体细胞杂交技术流程图，其中甲和乙分别表示两种二倍体植物细胞，其基因型分别是 AA 和 BB。据图分析回答。3(1)经过①过程得到的是________，此过程中用到的试剂是________。(2)将若干 a 和 b 等量混合后转移到培养基上培养，再经过②和③，得到的 c 细胞可能的类型有________(用基因型表示)。(3)植物体细胞融合成功的标志是________，其产生与细胞内________(细胞器)有关。(4)④和⑤过程分别是________，获得的杂种植物有________个染色体组。(5)植物体细胞杂交与自然状况下的杂交育种相比，前者的主要意义是________。【解析】 ①是用纤维素酶和果胶酶处理获得原生质体，②是采用物理或化学方法促进其融合，融合的细胞有三种，甲与甲、乙与乙和甲与乙融合，甲与乙融合的基因型为AaBb，化学方法通常用聚乙二醇处理，③是再生出新细胞壁，④是脱分化过程形成愈伤组织，⑤是再分化过程，细胞全能性降低，⑥是发育成幼苗，融合细胞中有同源染色体，所以是可育的，转基因植物防止基因污染，通常是导入到叶绿体或线粒体中。(1)①过程是利用酶的专一性原理，采用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。(2)诱导 a 和b 融合形成的 c 细胞有 5 种(只考虑不融合和两两融合的情况)，即AABB、AAAA、BBBB、AA、BB。(3)植物体细胞融合成功的标志是形成新的细胞壁，其产生与细胞内高尔基体有关。(4)④和⑤过程分别是脱分化和再分化，获得的杂种植物有四个染色体组。(5)植物体细胞杂交与自然状况下的生殖细胞杂交相比，前者能克服不同生物远缘杂交的障碍。【答案】 (1)原生质体 纤维素酶和果胶酶(2)AABB、AAAA、BBBB、AA、BB(3)形成新的细胞壁 高尔基体(4)脱分化和再分化 四(5)克服远缘杂交不亲和的障碍5．(2016·大庆铁人一中段考)科学家用番茄(2N)和马铃薯(4N)利用如图技术得到“番茄—马铃薯”植株。请回答下列问题：(1)获得 a、b 所选用的酶为________，c 和 d 的名称依次是________、________。(2)图示技术名称是________；由 d 培育成植株的过程运用的技术手段是________，其依据的原理是________。(3)过程②称为________，所用的化学诱导剂一般是________，③过程成功的标志是________。(4)过程④是________，⑤过程增殖的方式为________，诱导 f 中植株生根过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程________(高/低)；最终获得的“番茄—马铃薯”属于________倍体植株，则“番茄—马铃薯”植株的花粉经离体培育得到的植物属于________倍体植株。(5)如果过程②的 a、b 细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄多倍体植株的方法是________。【解析】 (1)a、b 是原生质体，获得原生质体需要去壁，植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，所以所选用的酶为纤维素酶和果胶酶，c 是正在融合的原生质体，d 是融合后获得的杂种细胞；(2)图示技术名称是植物体细胞杂交技术，包括植物细胞融合和植物组织培养；由 d 培育成植株的过程运用的技术手段是植物组织培养，其依据的原理是植物细胞全能型；(3)过程②称为原生质体融合，所用的化学诱导剂一般是 PEG，③过程成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁；(4)过程④是由分化状态回到未分化状态，即脱分化，图中细4胞是植物的体细胞，所以⑤过程增殖的方式为有丝分裂，诱导 f 中植株生根过程中培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程高，以促进生根；番茄是二倍体生物，马铃薯是四倍体生物，体细胞杂交后最终获得的“番茄—马铃薯”属于六倍体植株，花粉经离体培育得到的植物都属于单倍体植株；(5)如果过程②的 a、b 细胞都是番茄细胞，那么更简单的得到番茄多倍体植株的方法是用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗。【答案】 (1)纤维素酶和果胶酶 (正在融合的)原生质体 杂种细胞(2)植物体细胞杂交技术 植物组织培养 植物细胞全能性(3)原生质体融合 PEG(聚乙二醇) 杂种细胞再生出细胞壁(形成新的细胞壁)(4)脱分化 有丝分裂 高 六 单(5)用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗6．(2016·贵阳一中月考)如图甲表示利用生物技术制备抗 X 的单克隆抗体的过程；图乙表示体外受精培育优质奶牛的过程；图丙表示番茄和马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答下面的问题。(1)在图甲中注射到小鼠体内的物质是________。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是________。该过程所用的生物技术有________和________。(2)图乙中参与体外受精的精子需要经过成熟和________的过程，才能使卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图乙中囊胚中的________均等分割后进行胚胎移植。以上技术是在________(填“体内”或“体外”)完成的。(3)图丙中过程①是植物细胞形成________的阶段，该阶段所用的酶是________。【解析】 (1)图甲所示为单克隆抗体的制备过程。小鼠的 B 细胞经过免疫，再与能无限增殖的骨髓瘤细胞融合，形成的杂交瘤细胞同时具备了分泌抗体和无限增殖的能力。(2)图乙所示为胚胎工程中的体外受精和胚胎移植技术。精子只有经过获能处理后才具备使卵细胞受精的能力。将内细胞团进行均等切割后，每个部分都可以再发育成一个个体，以上操作过程都在体外进行。(3)图丙所示为植物体细胞杂交和植物组织培养过程。体细胞杂交的第一步就是制备原生质体，可以利用纤维素酶和果胶酶将植物细胞壁分解掉。【答案】 (1)抗原 X(1 分) 既能无限增殖又能产生抗 X 的抗体(2)获能 内细胞团 体外(3)原生质体 纤维素酶和果胶酶7．(2016·天津联考)犬细小病毒(Canine Parvovirus，CPV)主要感染幼犬，传染性极强，死亡率极高。犬细小病毒单克隆抗体(CPV McAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭犬体内病毒。请回答下列问题：(1)在单克隆抗体 CPV McAb 的制备过程中，所用到的细胞工程技术有________和________。(2)将经免疫处理后的犬的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌 CPV McAb 的杂交瘤细胞的过程中至少要进行两次筛选，一次是通过________培养基筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过________检测筛选出能分泌 CPV McAb 的杂交瘤细胞。(3)诱导 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合最常用的方法是________；对杂交细胞进行培养时，需要________的环境，及营养、温度、pH 和________环境适宜的条件。(4)通过上述方法得到的单克隆抗体可快速准确地识别 CPV，其原因是该抗体具有________的特点。5【解析】 (1)在单克隆抗体的制备过程中使用的细胞工程技术有动物细胞融合和动物细胞培养。(2)在单克隆抗体的制备过程中，至少需要进行两次筛选，第一次是通过选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选是通过抗体检测筛选出能分泌 CPV McAb 的杂交瘤细胞。(3)诱导 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合最常用的方法是灭活的病毒；对杂交细胞进行培养时，需要无菌无毒的的环境，及营养、温度、pH 和气体环境适宜的条件。(4)单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高，并可大量制备。【答案】 (1)动物细胞融合 动物细胞培养(2)选择 抗体(3)灭活的病毒 无菌无毒 气体(4)特异性强、灵敏度高8．(2016·珠海模拟)阅读如下资料：资料甲：科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中，得到了体型巨大的“超级小鼠” ；科学家用农杆菌转化法培育出了转基因烟草。资料乙：T 4溶菌酶在温度较高时容易失去活性。科学家对编码 T4溶菌酶的基因进行了改造，使其表达的 T4溶菌酶第 3 位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半胱氨酸与第 97 位的半胱氨酸之间形成一个二硫键，提高了 T4溶菌酶的耐热性。资料丙：植物甲、乙是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，甲含有效成分 A，乙含有效成分 B。某研究小组拟培育同时含有 A 和 B 的新型药用植物。回答下列问题：(1)资料甲属于基因工程范畴，将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用的方法是________。构建基因表达载体常用的工具酶是________ 和________ 。在培养有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是________ 。(2)资料乙中的技术属于________ 工程的范畴，该工程是以分子生物学相关理论为基础，通过________或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种________ 的技术。在该实例中，引起 T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶的肽链的________ 序列发生了改变。(3)资料丙属于细胞工程范畴。为了培育该新型药用植物，可取甲和乙的叶片，先用酶去除细胞壁，再用化学诱导剂诱导二者融合，形成的融合细胞进一步培养形成完整的杂种植株。这种培育技术称为________。这种杂种植株也可通过制作人工种子的方法来大量繁殖。经植物组织培养得到的________等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。【解析】 (1)将基因表达载体导入小鼠的受精卵中常用的方法是显微注射技术。构建基因表达载体常用的工具酶是限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶。在培养有些转基因植物时，常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是：农杆菌可感染植物，将目的基因转入到受体细胞中。(2)资料乙显示：科学家通过改造编码 T4溶菌酶的基因实现了对 T4溶菌酶结构的改造，从而提高了 T4溶菌酶的耐热性，该技术属于蛋白质工程的范畴。蛋白质工程是指以蛋白质分子结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需求。在该实例中，引起 T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶的肽链的氨基酸序列发生了改变。 (3)取植物甲和乙的叶片，先用酶去除细胞壁，再用化学诱导剂诱导二者融合，形成的融合细胞进一步培养形成完整的杂种植株，这种培育技术称为植物体细胞杂交技术。经植物组织培养得到的胚状体、不定芽、顶芽、腋芽等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子。【答案】 (1)显微注射技术(2 分) 限制性核酸内切酶(2 分) DNA 连接酶(2 分) 农杆菌可感染植物，将目的基因转入到受体细胞中(2 分)(2)蛋白质 基因修饰 新的蛋白质 氨基酸(3)植物体细胞杂交技术 胚状体、不定芽、顶芽、腋芽(2 分)