1、中国实用医药2011年6月第6卷第18期China Prac MedJun 2011Vo16No18 主要致病菌细菌感染等密切相关。通常由急性胆囊炎合并胆 囊阻塞或结石压迫，炎症累及胆囊壁层，进而出现胆囊增大、 囊壁增厚，胆囊壁静脉回流障碍，囊壁出血、坏死、坏疽，进而 形成急性坏疽性胆囊炎。 近年来急性坏疽性胆囊炎手术治疗方式由最初的传统开 腹胆囊切除术，逐步转向对患者伤害小的小切口胆囊切除术 及腹腔镜胆囊切除术，各种术式都有其适应征及优缺点 。 胆囊大部分切除术对于肝硬化门静脉高压症、肝下侧支循环 丰富，术中有大出血风险的病例更加安全，可显著减少病死 率。且术后不易复发，更适用于年老体弱或伴
2、其他脏器疾病 的患者。对照组3O例患者中，60岁以上28例，术后患者恢复 良好，未见再复发者。 改良式顺逆结合胆囊切除术，在先分离胆囊管后结扎，然 后在分离胆囊底、胆囊体及胆囊壶腹、胆囊颈部，在分离过程 59 中可有效避免传统胆囊切除术可能损伤胆道及门静脉、肝动 脉，显著减少术中胆囊床出血状况，本组研究结果表明采用此 术式可有效缩短手术时间、术中出血量，操作方便简单，术后 患者恢复快，不良反应少，值得临床推广应用。 参考文献 1吴在德，吴肇汉外科学第7版北京：人民卫生出版社， 2008：435 2 汪中波，王锦波，卢文献，等胆囊大部分切除术治疗急性坏疽 性胆囊炎324例人民军医，2004，47
3、(12)：713-714 3 赵俊，邓友法168例改良式顺逆结合法胆囊切除术临床分析 中国实用医药，2007，2(21)：40-41 4包翔宁，王莉萍，张永吉，等急性坏疽性胆囊炎26例分析中 国当代医药，2010，17(16)：162166 结核分支杆菌两种耐药基因的快速检测 李玉 近年来，全球结核病呈现死灰复燃的趋势，其主要原因是 耐药(DR-TB)和耐多药(MDRTB)结核病 广泛分布和迅速 传播。作为一线抗结核药物，INH和RFP结核病的预防、治 疗方面起着重要作用。但由于单药化疗和不规则化疗，其耐 药情况越来越严重。有研究表明结核分杆菌耐异烟肼的产生 与过氧化氢酶-过氧化物酶的编码基因
4、KatG基因的缺失和突 变有关；而利福平耐药则与RNA聚合酶的P亚基的编码基因 rpoB突变有关。我们在用PCR-SSCP方法单独检测KatG和 rpoB基因突变时，发现在非变性聚丙烯酰胺凝胶中，这两种 基因的迁移率不同，且差异很大。因此，我们在一个反应中同 时扩增KatG和rpoB基因。再根据其SSCP图谱进行分析，这 样就可以同时检测异烟肼和利福平耐药性。我们采用PCR SSCP银染法直接检测临床分离株和临床痰标本中结核分支 杆菌rpoB基因和KatG基因突变，现将结果报告如下。 1资料与方法 11标本来源107株临床分离株和39例肺结核病患者涂 阳痰标本均来自吉林市结核病防治研究所。10
5、7株临床分离 株按结核病诊断细菌学规程进行菌种鉴定及药敏实验证实为 结核分支杆菌，其中63例耐RFP，55例耐INH，49例耐SM。 65例肺结核病患者涂阳痰标本根据临床症状、涂片结果、胸 部x线和培养结果确诊，其中33例耐RFP，27例耐INH，28 例耐SM。 12 引物序列为 rPOBI 5CGGATGACCACCCAGGAC。 rPOB2 5GGIIICGAIGGGCACAT KatG1 5GCGATCACTACCGTGATCACA， KatG2 5GTCAGGGCGTCAAGTCGACTG 13方法 131 dNA的提取 用传统酚氯仿抽提法提取标本 中DNA。 132 PCR扩增采用
6、25 l反应体系，4xdNrIPs终浓度为 02 mmolL，引物终浓度为02 IxmolL，扩增程序为94C变 性1 min，61退火1 min，72延伸1 min，循环30次，最后 72C延伸10 min。扩增产物经2琼脂糖凝胶电泳。紫外检 测rPOB出现258bp条带、KatG出现282bp条带即为扩增 阳性。 133 SSCP银染PCR扩增阳性的标本进行SSCP检测，扩 增产物加等量甲酰胺变性液95变性10 min，立即冰浴5 min，在8非变性聚丙烯酰胺凝胶中电泳，条件为6C100V 电压，电泳约23 h，电泳结束后，取凝胶板经硝酸银染色，观 察结果并照相。 2结果 21 61株结核
7、分支杆菌临床分离株中，26株药物敏感株中， 各有1株KatG基因和rpoB基因发生突变。35株同时耐异烟 肼和利福平分离株中，有22株有KatG基因突变，突变率 629。同时有31株有rpoB基因发生突变，突变率为 886。结果见表1。 表1异烟肼和利福平耐药与KatG和rpoB基因突变结果 22用PCRSSCP技术分析对39例同时耐INH和耐RFP肺 结核病患者的痰标本和24例非结核性肺部疾病组痰标本进 行rpoB和KatG基因突变的检测。以结核分支杆菌H37RV 为对照，39例耐RFP痰标本中31例PCR扩增阳性，其中25 例SSCP图谱与H37Rv标准株有差异，rpoB突变率为641。
8、作者单位：132001吉林市儿童医院 耐INH肺结核病患者的痰标本有28例扩增阳性，l7例SSCP 图谱与H37Rv标准株有差异，突变率为435。24例非结核 病患者的痰标本rpoB基因和KatG基因PCR扩增均为阴性。 3讨论 目前，结核分支杆菌耐药性测定仍多采用绝对浓度法、比 例法等经典方法。但由于结核分支杆菌生长缓慢，而耐药结 核分支杆菌生长更为缓慢，其耐药性测定需68周甚至更 60 中国实用医药2011年6月第6卷第18期China Prac Med。Jun 2011，Vo16，No18 长，不能及时指导临床用药。近年来，随着分子生物学的不断 发展已研究发现结核分支杆菌耐异烟肼的产生与
9、过氧化氢 酶过氧化物酶的编码基因KatG基因的缺失和突变有关；而 利福平耐药则与RNA聚合酶的P亚基的编码基因rpoB突变 有关PCRSSCP是一种检测基因突变简便、快速的方法。我 们在一个反应中同时扩增KatG和rpoB基因。再根据其ss CP图谱进行分析，这样就可以同时检测异烟肼和利福平耐药 性，结核分支杆菌临床分离株rpoB基因和KatG基因突变，阳 性率分别为886、629，表明结核分支杆菌异烟肼耐药 与过氧化氢酶过氧化物酶的编码基因KatG有关，KatG基因 在INH耐药中起主导作用。但有一部分耐INH株未检测到 KatG缺失或突变，提示某些菌株的耐INH形成可能与KatG 脊柱手术
10、血液保护的临床研究 王敏蔡秋萍刘静邹瑾 无关。INH耐药机制有待进一步研究。同时表明结核分支杆 菌耐利福平与RNA聚合酶的P亚基的编码基因rPOB有关， rPOB突变已成为结核分支杆菌耐RFP的主要遗传指标。我 们用此方法直接检测结核病患者痰标本中结核分支杆菌 rpoB基因和KatG基因突变，阳性率分别为641、435。 rpoB基因和KatG基因突变低于临床分离株。这可能与痰标 本中杂DNA较多，rpoB为单拷贝，同时痰标本的处理和靶 DNA浓度对PCR扩增也有直接影响。本文的结果表明， PCRSSCP方法具有快速、简便、敏感、特异性高的特点，可在 2 d内出结果，并能直接用于临床结核病患者
11、痰标本结核分支 杆菌耐药性的检测。从而弥补了常规药敏实验的不足，有望 成为临床耐药性测定的重要手段之一。 【摘要】 目的观察评价术前急性高容血液稀释联合术中控制性降压和自体血回输在脊柱手术中的 血液保护作用。方法择期80例脊柱手术患者，连续分为2组，每组4o例，组I CH+自体血回输，组 AHH+CH+自体血回输。分别于麻醉前、术毕30 min、术后第2天，测定Hb、Hct、PT、APTY，计算失血量、 输血量(自体、异体)、尿量。结果组术中失血量显著减少，无异体输血，术中尿量高于组I，组I 7例 (18)患者需要异体输血，平均输血(11-I-23)ml，两组术毕PT、Am，差异无统计学意义(
12、P005)。结 论我院采用的多途径血液保护措施，可减少异体输血起到节约用水的作用。 【关键词】 急性高容血液稀释；控制性降压；自体血回输；血液保护 脊柱手术创伤大，止血困难，出血量多，不同程度存在异 体输血，面对血源紧张和异体输体可能产生一些并发症，诸如 病毒传染性疾病的传播、溶血反应、过敏反应、免疫抑制等，寻 求新的血液保护途径势在必行。术前高容血液稀释联合 术中控制性降压和自体血回输是减少围术期血细胞丢失的有 效方法。我院自2009年4月成立脊柱外科采取多途径血液 保护措施，减少了异体输血，现报到如下。 1资料与方法 11一般资料纳入标准：ASA I级、80例择期胸腰椎 切开减压及椎间融合
13、、椎弓根钉内固定、估计失血量1000 ml 左右。所有病例连续分为2组，各40例，两组患者年龄(37 65岁)、性别构成比、体重(6292 )、手术时间及术者操作 熟练程度均无显著性差异；Hb100 eVE，Hct30，血压、心 肺功能、肝肾功能及凝血功能均正常。 12麻醉方法局麻+镇静下行桡动脉及右颈内静脉穿刺， 测MAP、CVP及采血样。麻醉前以林格氏液10 mlkg补充术 前禁食丢失量。诱导：咪唑安定35 mg，芬太尼3 gkg、罗 库溴铵06 mgkg、丙泊酚2 mgkg。气管插管后机械通气 (VT)10 mlkg，R 12次mn，麻醉维持吸人异氟醚1215 mAC，瑞芬太尼02 (k
14、gmin)，间断静脉给予罗库溴铵。 13 AHH组于有创监测完成后、手术之前，在30 rain内经 颈内静脉快速输人万汶15 mlkg，使血容量增加约25，术中 失血量以等量万汶补充，尿液及术中蒸发约(68)ml(kg h)以等量平衡盐溶液替代，以保证术前血容量呈高容状 态。若术中Hct005)。组患者出血量约420 m1，无异体输血；组I出血量约680 ml(P005)，7例(18) 需要异体输血，差异有统计学意义(P005)(见表1)；血液 稀释后虽有P1、AP1T明显延长，但均在正常范围(见表2)。 表1两组术中失血量、输血量、尿量比较 注： 与组问比较PO05 作者单位：116011大连市中心医院麻醉科
