1、生物化学实验课程教学大纲（0830531）课程名称： 生物化学实验 课程编码： 0830531英文名称： Experiment of Biochemistry 学 时： 64 其中必做： 64 学 分： 2开课学期： 3适用专业： 生物技术、生物工程课程类别： 必修课程性质： 专业课先修课程： 化学实验一、课程性质及任务生物化学实验与生物化学课程同时开设的实验课程，是理论教学的深化和补充，具有较强的实践性，是一门重要的技术基础课，是生物技术、生物工程、生命科学等专业学生的必修课。通过生物化学实验课程学习，应该使学生掌握生物化学实验的基本知识和基本技术，包括生物化学分离、制备、分析和鉴定技术（如
2、比色、层析、电泳、离心、透析等） ，同时掌握离心机、分光光度计、移液器、酶标仪、凝胶成像系统、柱层析系统等各种生化实验常规仪器的使用。随着生物化学学科的飞速发展，新的实验方法和技术不断出现。还要掌握一些较新的和实用的技术技能，如一些分子生物学的基础实验等。通过该课程的学习，使学生巩固和加深生物化学理论知识，进一步加强学生分析问题和解决问题的能力，尤其是通过综合实验及设计实验的训练，培养了学生的设计和创新能力，同时培养了学生一定的科学研究能力和严谨的科学态度，为学生进入更高层次的生物化学乃至分子生物学实验打下基础。二、课程的教学要求实验课程内容分三个层次：基础实验、综合实验和设计性实验。基础实验
3、是一些加强学生基本实验技能训练的传统实验。综合设计实验包括一些新近发展起来的生化实验技术以及一些实验内容进行系统的优化组合。设计性实验由学生自拟题目或者教师命题，学生自选仪器，独立设计实验方案。经过多层次的训练后，学生应达到下列要求：1进一步巩固和加深对生物化学基本知识的理解，掌握生物化学实验的基本知识和基本操作技能。如生物化学分离、制备、分析和鉴定技术。2提高观察问题、分析问题和解决问题的能力。通过独立思考，深入钻研有关问题，具有初步解决生物化学实验问题的能力。3能正确使用仪器设备，掌握仪器操作原理。4能独立设计实验，利用所学知识准确分析实验结果。5课前准备：仔细阅读实验指导书，了解实验目的
4、、原理、要求、实验方法和步骤。6. 实验中：遵守实验室规则。严格按照实验步骤进行操作，正确使用仪器。实验中要认真操作，仔细观察，如实记录，做到理论联系实际。实验操作遇有疑难时，要随时找老师或实验员解决。应爱护实验器材，节省动物与实验消耗用品。7. 实验后：清理实验器材，擦洗干净，请老师验收后放回指定地点。如有缺少或损坏，应立即报告负责老师并进行登记。整理实验记录，书写实验报告，并按时交给负责老师批阅。三、实验项目与学时分配序号 项目 内容提要 学时 性质 要 求1 氨基酸的分离鉴定-纸层析法通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法4 验证 必做2 SDS-PAGE 测蛋白质分子量及蛋
5、白纯度鉴定技术1. 学习 SDS-PAGE 电泳技术2. 学习测蛋白质分子量及蛋白纯度的鉴定方法8 综合 必做3 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳鉴定技术1. 学习用醋酸纤维素薄膜电泳技术2. 学习分离血清蛋白及鉴定技术6 综合 选做4 离子交换柱层析技术分离蛋白质1. 通过对凝胶的处理、装柱、加样、洗脱技术的学习，掌握层析技术。2. 用层析技术分离蛋白质6 综合 选做5 单向定量免疫电泳技术1. 学习免疫电泳的原理和方法。2. 掌握单向定量免疫电泳的方法。6 验证 选做6 大豆蛋白的提取及定量测定技术1. 学习大豆蛋白的提取方法；2. 蛋白质几种定量测定方法比较；8 综合 选做7 蛋氨酸裂解酶基因
6、工程菌构建、诱导表达、纯化及鉴定学习基因工程菌构建方法；诱导表达技术；酶蛋白下游分离纯化技术；酶蛋白鉴定技术。24 综合 必做8 质粒 DNA 的微量制备（碱裂解法）及琼脂糖凝胶电泳鉴定技术1. 学习用碱裂解法进行质粒 DNA 的分离纯化技术；2. 学习琼脂糖凝胶电泳技术。4 综合 选做9 大肠杆菌 DNA和 RNA 的同步提取、鉴定及定量分析1. 学习碱裂解细胞，提取核酸的基本操作方法，2. 掌握琼脂糖电泳技术及光谱法定量分析核酸。8 综合 必做10 猪脾 DNA 的提取及定性定量测定1. 学会 SDS 提 DNA。2. DNA 含量的测定4 综合 选做11 酵母 RNA 的提取及测定1.
7、学会 SDS 提 RNA。2. RNA 含量的测定。4 综合 选做12 维生素 C 的提取及定量测定用染料 2，6-二氯酚靛酚测定蔬菜或水果中维生素 C 的含量。8 综合 必做13 还原糖和总糖含量的测定学习几种方法测定糖含量包括（3，5-二硝基水杨酸比色定糖法，酚硫酸法等）8 综合 必做14 黑木耳多糖的提取、分离、纯化及初步测定通过水提法浸提出木耳中的多糖，并测定多糖组成、含量8 综合 选做15 酶联免疫吸附测定蛋白质技术（ELISA）方法1. 学习抗体制备技术2. 学习酶联免疫吸附法ELISA 方法建立；及抗体或抗原蛋白测定技术12 综合 选做16 脂肪酶的提取及测定技术1. 学习脂肪酶
8、的提取技术2. 学习脂肪酶的测定技术4 综合 选做17 蔗糖酶的分离提取及鉴定技术1. 学习蔗糖酶分离提取的方法。2. 有机溶剂分级及柱层析技术。12 综合 选做18 用正交试验设计法测定几种因素对蔗糖酶活性的影响1. 学习正交试验设计法的使用。2. 求出蔗糖酶的最适温度及最适 PH 值。12 综合 选做19 酶的性质实验 1. 学习激活剂和抑制剂对用不同酶作用于不同底物，2. 了解酶的专一性。酶促反应速度的影响。3. 了解温度对酶促反应速度的影响。6 验证 选做20 过氧化物酶提取及活性鉴定实验1. 学习过氧化物酶的提取技术及鉴定技术2. 学习过氧化物酶的活性测定技术16 综合 必做21 设
9、计性实验 盐析技术分离鸡蛋清蛋白；透析技术纯化蛋白质4 设计性选做22 设计性实验 设计一个药用有效成分的分离纯化及鉴定实验（动物脏器、植物、微生物）12 设计性选做23 设计性实验 植物色素的提取与分离技术 4 设计 选做24 设计性实验 基因克隆、表达载体构建、蛋白诱导表达及鉴定技术24 设计 选做25 设计性实验 蛋白质的几种定性定量检测方法12 设计 选做26 设计性实验 维生素的提取分离及鉴定 12 设计 选做注：项目性质：演示、验证、综合、设计、创新项目要求：必做、选做四、考核及成绩评定1. 考核方式：平时成绩（出勤率及实验报告）及期末实验技能操作两部分成绩综合。2. 考核标准及比例：实验课程采用平时考核，期末考试，综合评定学生成绩。平时实验占 80%，期末考核占 20%。每个实验，预习报告占 30%，实际操作 40%，总结报告 30%。实验成绩分：优、良、中、及格、不及格五级。注：实验考核成绩达不到 60%，不允许参加理论考试。 五、主要参考书1. 生物工程与技术专业基础实验教程. 北京：兵器工业出版社. 2007 年2. 梁宋平主编.生物化学与分子生物学实验教程.北京：高等教育出版社.2003 年制定人：于源华审定人：李景梅批准者：庞春颖2013 年 3 月
