1、 20 J . of Chinese Microcirculation Mar. 2001 ,Vol . 5 ,No ,1白细胞呼吸暴发形态学改变及银杏叶提取物干预作用骆秉铨 , 龙 村 , 黄荣国 , 任笑明 , 邵博一 , 冯小平 , 冯正义 , 吴良金文章编号 : 1007 - 8568(2001) 01 - 0020 - 04【摘要】 目的 研究白细胞呼吸暴发化学发光活性与细胞形态行为变化特征及其相互关系 ,并探讨GbE对白细胞活化的干预作用。 方法 体外循环冠脉搭桥病人 20 例 ,采集转流前升主动脉血样 ,分离白细胞加入 FMLP激活剂 ,孵化后置入超弱化学发光系统中 ,计算机描记
2、白细胞呼吸暴发化学发光活性。根据发光曲线分为 5 个时段 :0 = 未活化 ,1 = 活化初期 ,2 = 活化极期 ,3 = 活化后期 ,4 = 失活化。同步用布氏显微镜观察 (放大 1000 倍 ) ,分析细胞形态行为变化特征 ,按这 5 个时段分为 :A、 B、 C、 D 和 E型 5 个细胞亚型 ,并作形态、功能相关分析。 GbE(含黄酮苷 0. 545mg/ ml)对白细胞呼吸暴发干预试验分为 :对照组 (白细胞 + FMLP) 、 GbE - 1 组 (加入 GbE5 l) 、 GbE - 2 组 (加入 GbE10 l) 。 结果 1. FMLP 激活白细胞呼吸暴发化学发光计数峰值
3、明显升高 ,显示白细胞氧化暴发释放反应氧类活性的定量表达。 2. 白细胞活化的极期、后期发光活性与形态活化率呈正相关 ( r = 0. 91 ,0. 75) ,也与 C型、 D 型细胞形态改变相一致。但活化初期 B 型细胞因缺乏脱颗粒释放 ,未能与发光计数平行上升。 A 型和 E型细胞分别反映未活化和失活化状态均相符合。 3. GbE对 FMLP激活白细胞呼吸暴发化学发光活性有明显浓度依赖性抑制作用。活化极期 GbE1 组、 GbE2 组抑制百分率分别为 :23. 6 % ,53. 35 %( P 0. 051240 53084 140. 910. 05) 。图 3 不同浓度 GbE对白细胞活
4、化过程的抑制作用讨 论心脑血管病缺血过程和再灌注损伤介导白细胞活化、内皮细胞激活 ,并引发炎症反应过程 ,包括白细胞滚动、粘附、游走和浸润。研究证明 : PMN 活化早期为细胞增大、僵硬 (白细胞刚性是红细胞 1000 倍 ) ,引起微血管内扣押 (Sequestration) ,毛细血管填塞 ,可致微循环“无复流”现象 ,并多发于再灌注损伤早期 6 ,7 。后来 ,PMN 活化极期 ,氧化暴发脱颗粒释放反应氧类( O - 、 H2O2) ,蛋白酶 (弹性酶 ) ,炎性细胞因子 ( PAF、LTB4 、 TNFa、 IL 1) 等细胞毒并正反馈相互作用 ,介导靶细胞损害。此外 ,自由基介导 O
5、X LDL ,并启动动脉粥样硬化的发生发展。 TNFa 促进基质金属酶 (MMPs) 活性上调 ,可引发粥样斑块破裂 ,并参与心肌缺血再灌注损伤。 LTB4 是强烈白细胞趋化剂 ,特别 PAF 是最强血小板聚集剂 ,并趋化 PMN诱导脱颗粒释放和血管通透性。 PAF 是心肌敏感介质 ,也是心肌抑制和心律失常重要原因之一 5 ,8 ,9 ,10 。最近指出 :炎症和白细胞活化标志物包括 C反应蛋白、白介素、 P选择素和其它粘附分子、循环活化白细胞和白细胞血小板聚集等 ,作为急性冠脉综合征 (不稳定心绞痛、非 Q 波 MI) 的危险分层和介入治疗的评估指标 4 。关于白细胞活化监测方法 ,有粘附白
6、细胞计数法、硝基兰四唑荧光染色法和激活白细胞化学发光法等 11 ,采用高放大显微镜研究白细胞活化 ,只有个别报导 12 。白细胞活化形态、功能相结合的临床研究尚未见报导。我们根据白细胞呼吸暴发化学发光活性的曲线时程 ,显示 0 = 未活化 ;1 = 活化初期 ;2 = 活化极期 ;3 = 活化后期 ;4 = 失活化。再按这 5 个时段细胞形态行为特征分为 A 型、 B 型、 C 型、 D 型和 E型 5 个白细胞亚型。通过形态与功能对比分析 :白细胞呼吸暴发极期发光活性与形态活化率呈正相关 ( r = 0. 91 P 0. 01) ,强烈提示 C 型、 D 型细胞具有脱颗粒氧化暴发活性 ,而
7、B 型细胞为活化初期只表示趋化行为 ,缺乏脱颗粒释放功能。 A 型和 E型细胞分别提示未活化和失活化 ,均有很高符合率。白细胞形态行为与功能活性结合研究 ,为了解白细胞呼吸暴发过程提供细胞形态学基础 ,为临床了解白细胞活化程度、未活化和失活化功能状态提供快速诊断方法 ,具有实用价值。本文资料显示 : GbE 对 FMLP 激活白细胞呼吸暴发活性有剂量依赖性抑制作用。 GbE 有多种有效成份 ,其中三萜内脂、银杏内酯 B (BN52021) 通过拮抗PAF 诱发白细胞脱颗粒释放 ,达到抑制白细胞氧化暴发作用 13 ,14 。 BN52021 也有减轻 TNFa 组织损伤毒性作用 15 。此外 ,
8、 GbE中萜内酯降低细胞内钙离子浓度 ,前花色素有 NO 样作用。 GbE黄酮成份中 ,槲皮素有抑制NADPH 黄递酶作用 16 。最近 ,Clostre (1999) 评述 , GbE标准品 ( GbE761) 的有效作用包括 : 清除自由基 ,抑制反应氧类和脂质过氧化 ; 通过保护腺粒体呼吸和保存氧化磷酸化来维持 ATP 能量代谢 ; 通过影响动静脉内皮细胞因子和儿茶酚胺能的释放 ,调节血管作用 ; 调节损伤细胞离子平衡 ,并具有拮抗 PAF 受体的特殊功效 17 。鉴于 GbE具有抑制白细胞氧化暴发 ,清除自由基 ,拮抗或抑制 PAF、 TNF 、 TX ,调节损伤组织离子平衡和维持 A
9、TP 能量代谢等多种药物活性作用 ,我们认为 ,对急性冠脉综合征和缺血性中风病人 ,在“现代再灌注”基础上 ,结合使用 GbE复方制剂和有效单体 ,有利于对缺血 / 再灌注损伤的心、脑保护和降低病死率 ,防治并发症 ,具有临床意义。参 考 文 献1 Hansen PR. Role of neutrophil in myocardial ischemia and reperfu2sion J . Circulation. 1995 ,91(6) :1872 18852 Tichtlscherer S , Rosenberger G. Elevated CRP levels are assosia
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19、n Pharm Fr. 1999 ,57(Suppl1) :1S8 88(收稿 2000 - 04 - 18 修回 2000 - 07 - 17)作者单位 :214002 江苏省无锡市第二人民医院文章编号 : 1007 - 8568(2001) 01 - 0023 - 01支气管动脉栓塞治疗支气管大咯血 4 例报告沈晓文短篇报道 日咯血量在 500ml 以上的支气管咯血称为大咯血 ,如果不能及时妥善止血可因失血或窒息死亡。内科保守治疗无效需要立即手术 ,但有时出血的部位难以确定 ,手术无法进行。我们在对 4 例大咯血的患者进行支气管动脉造影的同时 ,栓塞支气管动脉取得了良好的治疗效果。报道如下
20、 :例 1 男 ,47 岁。有反复咯血史。因急性大咯血入院 ,日咯血量 1000ml ,经内科保守治疗无效。常规胸片及胸部 CT未见异常。行支气管动脉造影发现 :左上肺有血管畸形 ,并见少量造影剂外溢 (见图 1) 。用 1 2mm大小的明胶海绵与造影剂混合后 ,经导管缓慢注入支气管动脉 ,直止完全堵塞。再造影证实支气管动脉完全闭塞 (见图 2) ,拔管后送回病房。栓塞后病人不再出血 ,亦无任何不适 ,3d 后出院。例 2 男 ,45 岁。突发性大咯血 3d ,每天咯血量 500ml 以上 ,最多达 800ml。胸片未见异常 ,CT发现右肺上叶背段小片浸润影 ,诊断为浸润性肺结核。经保守治疗无
21、效 ,转来我科行介入治疗。造影发现 :右上叶后段支气管动脉分支充血扩张 ,未见造影剂外溢 ;右第 4 肋间动脉与支气管动脉共干。用明胶海绵栓塞后右背部有疼痛 ,第 2d 有约 100ml 咯血 ,第 3d 有约 20ml 咯血 ,第 4d 后咯血完全停止 ,1 周后出院。背部隐痛持续 1 月 ,2 月后复查 CT右肺浸润影基本吸收。例 3 女 ,35 岁。发热、咳嗽伴突发性大咯血 2d ,日咯血量500ml 左右 ,胸片见右肺下叶背段片状肺炎 ,支气管动脉造影见右下叶支气管动脉分支轻度充血。栓塞右支气管动脉后有 2d 少量咯血 ,量约 10 15ml ,第 3d 后咯血停止 ,10d 后肺炎吸
22、收出院。例 4 男 ,46 岁。咳嗽、咯血 3d ,最大咯血量达 550ml。胸片未见异常 ,CT发现左肺下叶背段片状肺炎。支气管动脉造影见左支气管动脉分支充血。栓塞左支气管动脉后 ,有 2d 咯血 ,第 1d 约60ml ,第 2d 约 10ml ,抗炎治疗 1 周后复查 CT炎症吸收 ,出院。图 1 左上肺见两团畸形血管 ,并见少量造影剂外溢图 2 栓塞后仅见左支气管动脉主干 ,其远段完全闭塞大咯血常见于支气管扩张、血管畸形、炎症、结核及肺癌。肺的血供主要由肺动脉和支气管动脉供血 ,而咯血又主要是由支气管动脉破裂引起。栓塞支气管动脉不会造成肺组织的缺血坏死 ,所以 ,支气管动脉造影栓塞既可以明确出血部位 ,又能进行治疗。但是在栓塞前一定要弄清血管的解剖 ,特别是右支气管动脉常和肋间动脉和脊髓动脉共干 ,栓塞前者可引起胸背痛 ,栓塞后者可造成瘫痪。另外注入栓塞剂时一定要慢而小心 ,不能让栓塞剂返流入主动脉 ,一旦返流可造成其它部位的栓塞。(收稿 :2000 - 09 - 05)
