1、1生物技术有限公司管理性文件文件编号：JC/C001-2012标题：化验设备的操作规程生效日期：2012-11-08页 号：第 1 页 共 68 页目的: 建立仪器操作规程，方便检测工作的进行，确保及时准确的对样品进行分析，对仪器的合理操作可以有效延长一起的使用寿命，保证生产的连续进行。目录：1、 PCR 仪22、 超净工作台.33、 尘埃粒子计数器.44、 氮吹仪.145、 分光光度计.146、 高效液相色谱仪.157、 高压灭菌锅.178、 恒温干燥箱.229、 恒温水浴.2510、 离心机2511、 培养箱2612、 天平2713、 细胞粉碎机2914、 显微镜3315、 血小板聚集仪3
2、416、 移液器4517、 马弗炉4518、 恒温振荡器4719、 摇床4820、 微波萃取、消解仪4821、 酶标仪4822、 层析实验冷柜5123、 三用紫外分析仪5224、 PH 计.5225、 离子计5426、 电导率仪5427、 水分测定仪5428、 超声波清洗器5529、 电泳槽5930、 低温冷却循环泵6231、 凝胶成像仪6332、 真空泵6433、 液态罐65234、 低温恒温反应浴槽6635、 数字旋光仪671PCR 仪PCR 仪使用说明：1、开机：打开开关，视窗上显示“SELF TEST”，显示 10 秒中后，显示 RUN-ENTER 菜单：“-RUN ENTER PRO
3、GRAM PROGRAM ”准备执行程序。2、放入样本管，关紧盖子。3、如果要运行已经编好的程序，则直接按Proceed ，用箭头键选择已储存的程序，按Proceed ，则屏幕显示：“-ENABLE DISABLE HEATED LID” 按Proceed选择ENABLE，则开始执行程序。4、如果要输入新的程序，则在 RUN-ENTER 菜单上用箭头键选择 ENTER PROGRAM，按Proceed ，屏幕显示 “ -NEW LIST EDIT DELET”，按Proceed ，1）选择 NEW，命名新的程序，最多 8 个字母，输入后按Proceed确认。2）输入程序步骤：名字输入后，显示“
4、 STEP1 _TEMP GOTO OPITON END”，按Proceed则可以输入温度（0100） ，按Proceed确认后，则可以输入孵育时间，用Select键移动光标，输入数字，完成后按Proceed确认，跳到下一步，输入方式同上。3）选择 GOTO，输入循环步骤时链接到第几步（循环数最多可达 9999 次） （为实际循环数-1)。4) 选择 option，显示“STEP EXTENDI NCREMENT SLOPE ”再选择 increment，按Proceed确认，输入初始的温度，确认后输入时间，按Proceed确认，然后输入每个循环增加或减少的温度，增加用正值，减少用负值（-0.
5、16） ，按Proceed确认。选择 extend，按Proceed确认，输入每个循环增加或减少的时间（-6060 秒） ，按Proceed确认。选择 slop（指温度上升或下降的速率） ，输入温度的改变值（-0.11.5）按Proceed确认，然后输入加热或致冷的速度，按Proceed确认。4）选择 End，输入结束步骤。5、输入完成的程序后，到 RUN-ENTER 菜单，选择新程序，开始运行。6、其它：用pause可以暂停一个运行的程序，再按一次继续程序。用stop或Cancel可停止运行的程序。3编辑程序：1、可以用Cancel键删除输错的值，输入新的值后按Proceed确认。2、对于未
6、输完的程序，要先输入 END，按Proceed将程序储存后才能删除。3、删除已经储存的程序：从 RUN-ENTER 菜单中选择 RUNPROGRAM，按Proceed ，显示主菜单，选择 DELET，用Select选择删除。4、查看程序的步骤：在主菜单上选择 LIST，按Proceed ，用Select将选择名称，再按Proceed ，显示程序的第一步，用Select键向前、向后翻页查看，此时不能改变程序的值。编辑已有的程序：1、从 RUN-ENTER 菜单中选择 RUNPROGRAM，按Proceed ，显示主菜单，选择 EDIT，按Proceed确认，用Select键选择要编辑的程序，按P
7、roceed显示程序的第一步。2、用Select键将光标移到要改变的温度或循环的值上，键入新值，按Proceed确认，按Cancel删除键入的值，出现空格，键入新值后确认。注：一旦值被改变或删除，原来的值不能恢复，必须重新键入。3、编辑时间值：必须重新键入小时、分钟、秒，按Proceed 。如何设置一个 PCR 体系：一般分为 8 步：1、预变性：可用 9495，210min，一般用 5min。2、变性：一般用 94，30s2min，一般 45s1min。3、退火：温度自定，30s2min。4、延伸：7075，一般 72，对于2kb，1min；2kb，每增加 1kb 加 1min。5、循环数：
8、一般 2535 个循环。6、最终延伸：72，515min。7、保存：10，时间设为 0。48、END。2超净工作台超净工作台使用方法及注意事项使用方法使用工作台时，应提前 50 分钟开机，同时开启紫外杀菌灯，处理操作区内表面积累的微生物，30 分钟后关闭杀菌灯（此时日光灯即开启） ，启动风机。对新安装的或长期未使用的工作台，使用前必需对工作台和周围环镜先用超静真空吸尘器或用不产生纤维的工具进行清洁工作，再采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。操作区内不允许存放不必要的物品，保持工作区的洁净气流流型不受干扰。操作区内尽量避免作用明显扰乱气流流型的动作。操作区的使用温度不可以超过 60。超净工
9、作台根据环境的洁净程度，可定期（一般 23 个月）将粗滤布（涤纶无纺布）拆下清洗或给予更换。定期（一般为一周）对环境周围进行灭菌工作，同时经常用纱布沾酒精或丙酮等有机溶剂将紫外线杀菌灯表面擦干净，保持表面清洁，否则会影响杀菌效果。当加大风机电压已不能使风速达到 0.32m/s 时必须更换高效空气过滤器。更换过滤器时，可打开顶盖，更换时应注意过滤器上的箭头标志，箭头指向即为层流气流向。更换高效过滤器后，应用尘埃粒子计数器四周边框密封是否良好，调节风机电压，使操作区平均风速保持在 0.32-0.48m/s 范围内，再用尘埃粒子计数器检查洁净度。超净工作台注意事项超净工作台接通超净工作台的电源旋开风
10、机开关，使风机开始正常运转，这时应检查高效过滤器出风面是否有风送出。检查照明及紫外设备能否正常运行，如不能正常运行则通知工程部检修。工作前必须对工作台周围环境及空气进行超净处理，认真进行清洁工作，并采用紫外线灭菌法进行灭菌处理。净化工作区内严禁存放不必要的物品，以保持洁净气流流动不受干扰。3尘埃粒子计数器一、用途Y09-301 型激光尘埃粒子计数器（以下简称仪器）用于测量洁净环境中单位体积空气内的尘埃粒子大小及数目，可直接检测洁净度等级为三十万级至十级的洁净环境。本仪器采用半导体激光光源，液晶屏显示，其体积小、重量轻、检测精度高、功能操作简单明了，电脑控制，可贮存、打印采样结果，测试洁净环境十
11、分便5利。广泛应用于电子、光学、化学、食品、化妆品、医药卫生、生物制品、航空航天等部门。二、主要技术参数外形尺寸 280236126mm 3（宽深高）质量 4.5kg最大功耗 10 W供电电源 直流电源 16.8V粒径通道 0.3、0.5、1、3、5、10（m）采样流量 2.83L/min使用环境条件 温度：1030湿度：20%75%大气压力：86kPa106kPa允许最大采样浓度 35000 颗/L（尘埃颗粒粒径不大于 0.5m），采样空气中不得含有酸碱等腐蚀性气体9 自净时间 20min三、工作原理本仪器采用光散射原理，当空气中悬浮粒子经过光敏区时，散射出与其粒径成一定比例的光通量，经光电
12、转换、放大及处理后得到被采集粒子当量直径和数量。四功能前面板含有液晶屏及九个功能键：“复位”、“清零”、“采样”、“打印”、“退出”、“增”、“减”、“确认”、“循环”。液晶屏显示内容由电脑控制，其程序如下：1：开机画面开机画面见图 （一）6Y09-301 型激 光 尘 埃 粒 子 计 数 器 图（一）2：设置画面按“确认”键进入设置画面 数据测量日期：05 年 09 月 06 日时间：08 时 05 分周期 T：01 分 报警级：0置信度状态：0 测点数：0 点测量位置：000清除数据：0数据查询设置画面见图（二） 图（二）每按一次“减”键，光标依次下移，每按一次“增”键，光标依次上移，并伴
13、有“吡”声。当光标移至日期，按“确认”键进入调整日期界面，05 年09 月 06 日，表示调整位，按“增”键依次增加（0-9），每按一次 “减”键，光标依次向后移并循环。按“确认”键保存当前设置并退出。其他功能设置同上操作相同。注：周期 T：代表采样周期，可在10 分钟之间选择。报警级为 0-3，0 代表无报警功能，1 代表百级报警，2 代表千级报警，3 代表万级报警。环境超过设置级别,采样周期结束时发出“嘟”报警声。置信度状态：“0”表示置信度状态关，置信度状态：“1”表示置信度状态开。7测点数为要测量的地点数，可在之间设定（计算时用）。测量位置：000-999 任意可调，000 表示不关心
14、位置，其余可自己设定。清除数据：为清除内存数据，不清除内存，若要清除内存则将调到后按“确认”键数字变为表示内存全部清除（轻易不可置）。参数设置完毕，须将“”光标移至数据测量，按确认键进入测量界面。3：查询画面“” 光标移至数据查询，按确认键进入查询界面图（三） 查询 日期：05 年 09 月 06 日开始查询 图（三） 每按一次“减”键，光标依次下移，每按一次“增”键，光标依次上移，并伴有“吡”声。当光标移至日期，按确认键进入调整日期界面，05 年 09月 06 日，表示调整位，按增键依次增加（0-9），每按一次减键，光标依次向后移并循环。按确认键退出当前设置并保存当前设置。光标移至开始查询，
15、按确认键开始查询，过 2-3 秒后屏幕显示要查询的数据。如查找无数据，则显示没有数据。按退出键，返回设置画面。光标移至数据测量，按确认键进入测量界面。4：测量界面测量画面见图（四）UCL：OFF F：0.00L/min 0.3m 50.5m 31.0m 0 3.0m 0 5.0m 0810.0m 0L:000 T:060 05/09/05 10:34W:OFF P:OFF S:OFF R:0086/1000图（四）屏左上角 UCL：OFF 表示置信度计算功能关闭。屏右上角 F：0.00L/min 表示采样泵关闭。0.3、0.5、1、3、5、10（m）表示采样粒子颗粒的粒径，后面的数值表示颗粒数
16、。L:000 表示地址号为 0，T:060 表示采样周期为 60 秒，05/09/05 表示最后一次采样保存的日期，10:34 表示最后一次采样保存的时间。W:OFF 表示观察功能关闭。 P:OFF 表示打印功能关闭，按“打印”键打开（ON）。S:OFF 表示存储功能关闭，按“确认”键打开（ON）。R:0086/1000 表示最多存储 1000 条数据中存储了 86 条数据。在不采样的情况下，按“循环”键，屏幕显示的粒子数在每个周期内的粒子数（颗/采样周期的采样量）见图 4及浓度（颗/立方米）见图（五）之间切换。按“增”或“减”键可观看存储的测量数据。按“采样”键后，屏幕中 F：0.00L/m
17、in 变为 F：2.83L/min（采样流量）。T:060 变为 T:001/060（001-060 递增变化），此时按“循环”键能打开 W:ON，表示观察功能开启，屏上实时显示当前周期内采样粒子数目的变化见图六， “循环”键的功能在三种显示方式之间切换，即图（四）的周期内总粒子数，图（五）的粒子浓度及图六的实时显示。UCL：OFF F：2.83L/min0.3m 1765/m 30.5m 1059/m 31.0m 0/m 3 3.0m 0/m 3 5.0m 0/m 310.0m 0/m 3L:000 T:060 05/09/05 10:34W:OFF P:OFF S:OFF R:0086/1
18、000图（五） 9图（五）为仪器所显示粒子浓度。UCL：OFF F：2.83L/min 0.3m 100.5m 31.0m 0 3.0m 0 5.0m 010.0m 0L:000 T:005/060 06/03/20 10:34W:OFF P:OFF S:OFF R:0086/1000图（六）注意：进入数据测量后的第一状态为上次关机时最后一次保存的数据。4：置信度（测点数）的使用在图（）下，将置信度状态设位，测点数之间任定（根据房间面积及洁净度等级），测量位置自己编号，现举例说明，一号房间测点：首先：调整参数为以下状态， 数据测量日期：05 年 09 月 06 日时间：08 时 05 分周期
19、T：1 分 报警级：0置信度状态：1 测点数：3 点测量位置：101清除数据：0数据查询10第二：按“确认”进入UCL： F：0.00L/min0.5m 05.0m 0L:101 T:060 05/09/05 10:34W:ON P:OFF S:OFF R:0086/1000第三：按“采样”键打开采样泵，进行第一点测量，此时画面为UCL： F：2.83L/min0.5m 35.0m 0L:101 T:005/060 05/09/05 10:34W:ON P:OFF S:OFF R:0086/1000若采样数据理想，则按“确认”键保存（屏下方：），此时屏上方（）随着采样次数而变，一般情况（N=4
20、）即可按“采样”键停止采样。值必须大于 1，即最少采样一个周期，测量才有效。UCL： 3 F：2.83L/min0.5m 35.0m 0L:101 T:009/060 05/09/05 10:34W:ON P:OFF S:ON R:0088/100011 数据测量日期：05 年 09 月 06 日时间：08 时 10 分周期 T：1 分 报警级：0 级置信度状态：1 测点数：3 点测量位置：102清除数据：0数据查询换另一地点采样，若没关机，直接按“退出”键将图（）设定为 若关机，也必须将图（）设定为上述状态。重复上述第二、第三步骤。 数据测量日期：05 年 09 月 06 日时间：08 时
21、15 分周期 T：1 分 报警级：0 级置信度状态：1 测点数：3 点测量位置：103清除数据：0数据查询 换第三地点，将图（）设定为重复上述第二、第三步骤。此时三点测量已全部完毕，画面显示为测量结果 。 ： 12Max:PCM0.5m: 3535.0m: 70 UCL:PCM0.5m: 461 5.0m 92 CLASS:1000注意：在最后一点采样关闭前，按“打印”键，令 P:ON，则结束时打印置信度值。在采样过程中若打开“打印”键打印的则是当前周期内的粒子数或浓度值(视显示方式)。若不关心测量位置，可不退回参数设置画面，在测量界面直接“采样”打开关闭，即为完成一地址点测量。在置信度采样过
22、程中，若要中断采样重新开始，则退到图 2 设置画面，将置信度设置状态设为“0”按“确认”键，然后重新将置信度状态置“1”按“确认”键，再进入测量界面即可。5：各功能键介绍“复位”：仪器进入图（）状态。“确认”：仪器进入图（）状态，当在数据测量时，按此键进入图（）状态，当在图（）其余情况下，此键为参数设定开始及结束键。在图（）状态时，此键为采样数据存储开关键，令：或者。“退出”：仪器由测量界面退回到参数设置界面。由查询状态退回到参数设置界面。“清零”：重新开始一个周期的采样。“采样”：采样泵开或关，画面显示：2.83L/min 或者 0.00L/min.“打印”：打印状态的开或关，画面显示 P:
23、 OFF 或 ON。当测量数据显示方式为浓度时打印浓度，其它情况下，打印对应周期内的粒子数。13“循环”：在测量界面下，若采样泵打开，此键实行三种显示状态之间的转换，观察状态，W：ON，粒子数不断累加，直至采样周期结束，重新开始新的周期。W：OFF，显示上一周期内总采样粒子数。W：OFF，显示上一周期内的采样粒子浓度（颗/米 3）。若采样泵不打开，此键只能实行两种显示状态间的转换，即观察状态关闭。“增”： 在参数设置画面，令上移，另一功能是改变需要修改的参数值。在测量界面，“增”键向上翻看存储的历史数据。“减” 在参数设置画面，令下移，另一功能是移动下划线至需要修改的参数处。在测量界面，“减”
24、键向下翻看存储的历史数据。后面板开关：电源开关电源插座：连接电源适配器(220V 交流输入，16.8V 直流输出)RS232：连接计算机采样口：接采样管自净口：采样口与此连接，仪器处于自净状态。五、操作说明准备操作打开后面板上电源开关，按“确认”键将屏幕调至图（四）测量界面，观看电池符号，若电池电量不足，则将电源适配器插入“电源插座”，给电池充电，同时仪器也可正常操作使用。开机预热 10 分钟左右。过滤器自净口与采样口相连，按“确认”两次进入测量界面，打开“采样”，使仪器自净清零。 操作步骤将采样管接在“采样口”处。在参数设置界面下按 “增”“减”及“确认“键，设定所需工作参数。若数据库清零，
25、将光标移至数据清零处，按“增”令数字由“0”改成“5”然后按“确认”键，数字变成“9”即可。若不修改工作参数，直接按“确认”键进入测量界面。14按“确认”键进入测量界面后，按“采样”键，打开泵源进行采样测试，采集数据。若采样结果理想，则按“确认”键，令液晶屏下方“Rec”为 ON，存贮采样数据，否则就按“确认”键，令“Rec”为 OFF。按“循环”键，转换显示方式。按“增”“减”键，在第一、第三状态可翻动观察以前某周期采样记录。再按“采样”键，则为关。在测试界面时，若需改变工作参数，按“退出”键退回到参数设置状态进行。打印：采样泵开启时，在测量界面浓度显示方式下，按“打印”键，令“Prt”为
26、ON，即每个周期结束时打印数据为测量浓度（颗/米 3），不需打印时再按“打印”键令“Prt”OFF。在其他显示方式下则每周期结束时打印对应周期内的粒子数。置信度设定状态下，最终打印置信度值及洁净级别。采样泵关闭时，按“增”“减”键调至需打印的起始页，按“打印”键即从这一页开始打印，直至不需打印时再按“打印”键,打印结束。不受屏幕下方“Prt”ON 或 OFF 的影响。查询数据打印：在非置信度情况下，将查询数据调到需打印的地方，按“打印”键即开始打印，不需打印时再按“打印”键停止打印，打印内容为对应周期内的粒子数。在置信度情况下，将查询数据调到需打印的地方，按“打印”键即开始打印，不需打印时再按
27、“打印”键停止打印，打印内容为置信度结果。为保证仪器测量精度，关机前重复准备操作第三步，用短管将采样口与进气口相连，打开“采样”，使仪器自净 23min，计数趋近于 0，然后关机。注意：为延长泵的寿命，不采样时随时关泵。假如仪器受干扰功能不正常，请按 “复位 ”键。六、 打印机注意事项(1)安装纸卷：仪器出厂时已安装了大约可打印 200 组数据的纸卷。用户可直接使用。纸卷用完后，可按如下过程进行装纸：向上拨开打印机上盖按扭，将纸卷放入打印机纸兜内，打印面朝上，轻轻拉出部分打印纸，再盖上打印机盖板即可。（注意热敏纸正反面，可用手指划线判断，有黑色线条的为打印面）。(2)装好纸后，不可用力拽纸。(
28、3)热敏打印机打印的数据，不宜长期保存，如需长期保存，请复制数据。154氮吹仪氮吹仪的使用方法氮吹仪的使用方法：氮吹仪安装好后，底盘支撑在恒温水浴内，打开水浴电源，设定水浴温度，水浴开始加热。提升氮吹仪，将需要蒸发浓缩的样品分别安放在样品定位架上，并由托盘托起，其中托盘和定位架高低可根据实验样品试管的大小调整。打开流量计针阀，氮气经流量计和输气管到达配气盘，配气后送往各样品位上方的针阀管。然后，通过调节针阀管针阀，氮气经针阀管和针头吹向液体样品试管，可通过调整锁紧螺母可以上下滑动针阀管，调整针头高度，以样品表面吹起波纹，样品又不溅起为好。最后，将氮吹仪放于水浴中，直到蒸发浓缩完成。5分光光度计
29、1调整 （1） 在接通电源前，应对仪器的安全性进行检查，电源线接线应牢固，接地线通地要良好，各个调节旋钮的起始位置应该正确，然后再接通电源。（2） 将灵敏度旋钮调至“1”档（放大倍率最小）。调波长调节器至所需波长。（3） 开启电源开关，指示灯亮，选择开关置于“T”，调节透光率100%T旋钮使数字显示100.0左右，预热 20min .根据溶液浓度大小，选择液层厚度合适的吸收池。2校正 ！）打开吸收池暗室盖（光门自动关闭），调节0% T旋钮，使数字显示为“00.0”，盖上吸收池盖，将参比溶液置于光路，使光电管受光，调节透光率100% T 旋钮，使数学显示为“100.0”。（2）如果显示不到“10
30、0”，则可适当增加电流放大器灵敏度档数，但应尽可能使用低档数，这样仪器将有更高的稳定性。当改变灵敏度 后必须重新校正“0”和“100”。（3）按（1）连续几次调整“00.0”和“100.0”后，如将选择开关置于“A”，调节吸光度调零旋钮，使数字显示为“.000”，即可进行下面吸光度 A 的测量；如将选择开关置于“C”，将标准溶液推入光路，调节浓度旋钮，使得数字显示值为已知标准溶液浓度数值，即可进行下面浓度 c 的测量。3测定 （） 吸光度的测量。将要测的试样溶液推入光路，显示值即为待测样品的吸光度值。（） 浓度 c 的测量。将要测 c 试样溶液推入光路，即可读出待测样品的浓度16值 c。4结束
31、 测量完毕，关闭电源，将各调节旋钮恢复至初始位置。取出吸收池洗净，晾干，存于专用盒内。注意事项：（） 使用前，使用者应该首先了解本仪器的结构和原理，以及各个旋钮之功能。（） 仪器接地要良好，否则显示数字不稳定。（） 如果大幅度改变测试波长时，在调整“00.0”和“100”后稍等片刻（因光能量变化急剧，光电管受光后响应缓慢，需一段光响应平衡时间），当稳定后，重新调整“00.0”和“100”即可工作。（） 仪器左侧下角有一只干燥剂筒，应保持其干燥，发现干燥剂变色应立即更新或烘干后再用。（） 当仪器停止工作时，关掉电源，电源开关需同时切断，并罩好仪器6高效液相色谱仪高效液相色谱法(HPLC)是目前应
32、用广泛的分离、分析、纯化有机化合物(包括能通过化学反应转变为有机化合物的无机物)的有效方法之一。 在已知的有机化合物中，约有 80%能用高效液相色谱法分离、分析，而且由于此法条件温和，不破坏样品，因此特别适合高沸点、难气化挥发、热稳定性差的有机化合物和生命物质。HPLC 系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部位。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、与柱或保护住、柱温控制器等，现代 HPLC 仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。制备型 HPLC 仪还备有自动馏分收集装置。目前常见的 HPLC 仪生产厂家国
33、外有 Waters 公司、Agilent 公司(原 HP 公司)、岛津公司等，国内有上海伍丰科学仪器有限公司，上海禾工科学仪器有限公司，大连依利特公司、北京创新通恒、北京温分等。一、输液泵1.泵的构造和性能输液泵是 HPLC 系统中最重要的部件之一。泵的性能好坏直接影响到整个质量和分析结果的可靠性。输液泵应具备如下性能:流量稳定，其 RSD 应小于0.5%，这关系到定性定量的准确性;流量范围宽，分析型应在 0.110ml/min范围内连续调，制备型应能达到 100ml/min;输出压力高，一般应能达到150300KG/CM2:液缸容积小;密封性能好，耐腐蚀。泵的种类很多，按输液性质可分为恒压泵
34、和恒流泵。恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔往复泵。恒压泵受柱阴影响，流量不稳定;螺旋泵缸体太大，这两种泵己被淘汰目前应用最多的是柱塞往复泵。柱塞往复泵的液缸容积小，可至 0.1ml，因此易于清洗和更换流动相，特别适合于再循环和梯度洗脱;改变电机转速能方便地调节流量，流量不受柱压影响;泵压可达 400KG/CM2。ADW 主要缺点是输出的脉冲性较大，现多彩采用双泵系统17来克服。双泵按连接方式可分为并联式和串联式，一般说来并联泵的流量重现性较好(RSD 为 0.1%左右，串联泵为 0.20.3%)，但出现故障的机会较多(因多了单向阀)，价格也较贵。二、进样器一般 HPLC 分析常用
35、六通进样阀(以美国 RHEODYNE 公司的 7725 和 7725I 型最常见)，其关键部件由圆形密封垫子(转子)和固定底座(定子)组成。耐高压(3540MPA)，进样量准确，重复性好(0.5%)，操作方便。六通阀进样方式有部分装液法和完全装液法两种。用部分装液法进样时，进样量应不大于定量环体积的 50%(最多 75%)，并要求每次进样体积准确、相同。此法进样的准确度和重复性决定于注器取样的熟练程度，而且易产生由进样引起的峰展宽。用完全装液法进样时，进样量应不小于定量环体积的 510 倍 9 最少 3 倍，这样才能完全置换定量环内和流动相，消除管壁效应，确保进样的准确度及重复性。三、色谱柱色
36、谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。市售的用于HPLC 的各种微粒填料好多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球(包括离子交换树脂)、多孔碳等，其粒度一般为 3，5，7，10UM 等，柱效理论值可达 516 万/米。对于一般的分析只需 5000 塔板数的柱效;对于同系物分析，只要 500 即可;对于较难的分离物质对则可采用高达 2 万的柱子，因此一般 1030CM 左右的柱长就能满足复杂混合物分析的需要。柱效受柱内外因素影响，为使色谱柱达到最佳效率，除柱外死体积要小外，不要有合理的柱结构(尽
37、可能减少填充床以外的死体积)及装填技术。即使最好的装填技术，在柱中心部位和沿管壁部位的填充情况总是不一样的，靠近管壁的部位比较疏松，易产生沟流，流速较快，影响冲洗剂的流形，使谱带加宽，这就是管壁效应。这种管壁区大约是从管壁向内算起 30 倍料径的厚度。在一般的液相色谱系统中，柱外效应对柱效的影响远远大于管壁效应。四、检测器HPLC 的检测器分为两类:通用型检测器和专用型检测器。1.通用型检测器可连续测量色谱柱的流出物的全部特性变化，通常采用差分测量法，这类检测器包括示差折光检测器、介电常数检测器、电导检测器等，通用检测器适用范围广，但由于对流动相有响应，因此易受温度变化、流动相和组分的变化的影
38、响，噪声和漂移都比较大，灵敏度较低，不能用梯度洗脱。2.专用型检测器用以测量被分离样品组分某种特性的变化。这类检测器对样品中组分的某种物理或化学性质敏感，而这一性质是流动相所不具备的，或至少在操作条件下不显示。这类检测器包括紫外检测器、荧光检测器、放射性检测器等。实验内容和原理:储备器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相)中;由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中作相对运动时，经过反复多次的吸附-解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分配成单个祖坟依次从柱内流出，经过哦检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，
39、数据以图谱形式打印出来。18在适宜的条件下，高效液相色谱可分离溶液中不同的组分，样品进高效液相色谱仪，经反相 C18 液相色谱分离后，以色谱峰的保留时间定性，利用色谱峰面积在一定范围内与浓度成线性关系进行定量。本实验采用内标法，用 -胡萝卜素标准品分析未知浓度的类胡萝卜素产物的相关含量。实验步骤:1、 样品和标准品溶解和过滤:用丙酮作溶剂，溶解 -胡萝卜素标准品和类胡萝卜素样品。用滤膜(0.45um)过滤，备用。2、 开机，依次通过各分离单元、检测器、计算机电源。3、 流动相脱气，确认所有溶剂管路都充满溶剂。4、 启动溶剂管理系统，冲洗自动进样器和进样针，装入样品和转盘，编辑分析方法及执行样品
40、分析表。5、 样品测定:色谱条件，色谱柱(C18，4.6mm*250mm，5um);流动相，甲酸;乙腈;异丙醇=5:4:1(v/v);流速 1ml/min;检测波长，480nm。单位内标法定量:取混合使用液 20ul 注入高效液相色谱仪进行分离。记录各个峰的峰面积。按下式计算相对含量。q 样品=(q 标准品*A 样品)/A 标准品6、 关机，使用完毕后，按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路、自动进样器、进样针和柱塞杆密封垫，关闭电源开关。数据采集完毕后，关闭紫外检测器电源开关。处理数据后，关闭计算机电源开关，并做使用登记。7高压灭菌锅高压灭菌器使用方法高压灭菌器使用方法以博迅 YXQ-LS-
41、50SII 为例一、适用范围本灭菌器是利用加压的饱和蒸汽对医疗器械、敷料、器皿、药液等进行灭菌的设备，适用于医疗卫生单位使用。二、结构特点外形为方形立式结构。外壳（除后封板处）、灭菌器外桶、灭菌网篮选用不锈钢材料制成。装有安全阀，桶内压力达到 0.23Mpa 时，安全阀能自动起跳，释放过高的压力，性能可靠。压力表具有压力、温度对应指示，观察清晰。装有关门连锁装置，确保安全使用。19本容器具有自动保护功能，当容器内缺水干烧时，将自动切断加热器电路，并停止灭菌器工作，有效保护设备使用，同时蜂鸣器响，提醒用户及时补充水量。温度、时间采用单片机技术的新型智能数显调节仪。用户可根据不同要求，通过操作控制
42、面板的触摸键对温度及时间进行设定、调节达到灭菌目的。三、技术参数a.灭菌器容积：50L、75L； b. 控温范围：109135；c.电源电压：交流 220V10%，50HZ1%；d.加热器功率：3200VA；3500VA；e.工作最高压力：0.212MPa；温度：135；f. 环境温度：5-40；相对湿度80%RH。四、安装要求使用前详细阅读本说明书，并严格按说明书要求操作。警告语“汽未放尽，不得开启”：在灭菌器灭菌结束后，当压力表未恢复零位前，不得开启容器盖，否则易造成高温蒸汽灼伤。本设备为固定安装设备，为保证安全使用，用户必须在电源电路中安装熔断器或过流保护器。熔断器的容量为 25 安培。
43、用户按产品铭牌和使用说明书规定参数将设备按电路接线图接至规定电源上，同时设备应可靠接地。五、使用方法A 堆放： 1、旋转手轮（1）拉开外桶盖（3）取出灭菌网篮（14）取出挡水板（13）。2、关紧放水阀，在外桶（11）内加入清水，水位至灭菌桶搁脚（12）处（挡水板下）。连续使用时，必须在每次灭菌后补足水量。203、放回挡水板，把灭菌网篮放入外桶。灭菌的物品予以妥善包扎，有顺序的放入灭菌网篮内。相互之间留有间隙，有利于蒸汽的穿透，提高灭菌效果。B 密封：容器盖密封前，应仔细检查密封圈安装状态，密封圈应完全嵌入槽内，保持密封圈平整。1推进容器盖，使容器盖对准桶口位置。2顺时针方向旋紧手轮，使容器盖与
44、灭菌桶口平面完全密合。并使联锁装置与齿轮凹处吻合。3用橡胶管连接在放汽管上，然后插没到一个装有冷水的容器里，并关紧手动放汽阀。（顺时针关紧，逆时针打开）在加热升温过程中，当温控仪显示温度小于 102时，由温控仪控制的电磁阀将自动放汽，排除灭菌桶内的冷空气。当显示温度大于 102时，自动放汽停止，此时如还在大量放汽，则手动放汽阀未关紧，应及时把它关紧。C 加热：1、开启电源开关接通电源，数显控制仪显示。此时可开始设定温度和灭菌时间。2、设定方法：按一下“设定”键，出现 ：设定温度值（）。再按一下“设定”键，出现 ：设定定时时间（分钟）。再按一下“设定”键，出现 与温度校正有关，输入密码按设定键即
45、可进入修改校正温度值：显示 S 1 此时按可修改温度校正值。如果不输入密码或密码有误，则进入。再按一下“设定”键，出现 过 2 秒钟后，自动返回到温度显示，完成设定。按一下“工作”键，“工作”指示灯亮，系统正常工作，进入自动控制灭菌过程。若门未关闭,按“工作”键，加热器电源不工作。21其他键功能：“ ”键：移位键参数设置光标，循环左移，按一下，左移一位。“ ”“ ”键：增加/减少参数设置位的值。“温度/时间”键：在测量过程中，切换显示当前温度值和计时时间余值。“计时指示灯”当内腔温度达到设定温度时，计时指示灯亮，灭菌开始计时。当灭菌时间达到设定时间时，完成灭菌。计时指示灯灭，工作指示灯灭，设备发出蜂鸣声，面板显示“End”，结束灭菌程序。“报警指示灯”在灭菌过程中，水位低于电热管时，灭菌器能自动切断加热电源，报警指示灯亮，并发出蜂鸣声。注：*此步骤及以下步骤其中的参数与设
