1、 BamHI 产品编号 产品名称 包装 D6053 BamHI 2000U 产品简介： BamHI内切酶为进口分装，基本信息如下： 识别序列 缓冲液兼容性 (%) 酶切温度 失活条件 甲基化干扰？1X BamHI 1X B 1X G 1X O 1X R 1X Y 2X YGGATCC CCTAGG 100 20-50* 100 20-50 50-100* 100* 50-10037 80 20min* 无 *， Star activity，当酶量 5倍或以上过量时会产生星号活性，即产生非特异性酶活性。 *，该条件下仅能失活部分 BamHI酶。 酶储存液组成为： 10mM Tris-HCl (p
2、H7.4 at 25 )， 200mM NaCl， 1mM DTT， 0.1mM EDTA， 0.15% Triton X-100，0.2mg/ml BSA and 50% glycerol。 1X Buffer BamHI 组成为： 10mM Tris-HCl (pH8.0 at 37 )， 5mM MgCl2， 100mM KCl， 1mM 2-mercaptoethanol，0.02%Triton X-100， 0.1mg/ml BSA。 1X Buffer Y组成为： 33mM Tris-acetate (pH7.9 at 37 )， 10mM magnesium acetate， 6
3、6mM potassium acetate， 0.1mg/ml BSA。 酶切和连接效率： 50倍过量的本内切酶消化 1小时， 95被酶切的片段可以被连接并被重新酶切 (recut)。 活性单位定义：在 37， 50微升反应体系中反应 1小时，将 1微克的 DNA完全分解的酶量定义为 1个活性单位，即 1U。 包装清单： 产品编号 产品名称 包装 D6053-1 BamHI (10U/l) 2000U D6053-2 10X Buffer BamHI 0.3ml D6010Y 10X Buffer Y 1ml 说明书 1份 保存条件： -20保存。 注意事项： 内切酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴
4、上，使用完毕后宜立即放置于 -20保存。 如果发现预期的酶切位点不能切开，请确认是否存在甲基化干扰问题。 特别注意： 甘油含量大于 5%，低盐浓度， pH 8.0或酶大大过量 (约 20倍以上 )可能会导致星号活性，即产生非特异性酶切。 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 使用说明： 1. 单酶切时可以参考如下反应体系进行： 待酶切 DNA 不超过 1g 双蒸水或 MilliQ水 适量 10X Buffer BamHI 2l BamHI 0.5-1l 总体积 20l 37孵育 1小时或更长时间 说明： 请注意把 Buffer和水等充分混匀后再加入内切酶，加入内切酶后可以用枪吹打或轻轻 Vo r t e x混匀。通常参考上述条件孵育 1小时已经足够，但多孵育数小时甚至孵育过夜也不会产生负面影响。如果酶切较长时间甚至酶切过夜 ，可以使用更少量的酶。待酶切 DNA量较大时，可以适当延长酶切时间或按比例放大酶切体系。 2. 双酶切或多酶切时，需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的 缓冲液，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
