1、饲粮添加凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能的影响 黄遵锡 程志斌 云南师范大学生命科学学院 云南农业大学 昆明三正生物科技(集团)有限公司 摘 要： 将 32 头 28 日龄断奶 (杜长大) 健康仔猪平均分成 4 个处理组:对照组 (组合抗生素组) 、试验组 1 (凝结芽孢杆菌组) 、试验组 2 (枯草芽孢杆菌组) 、试验组 3 (同时添加凝结芽孢杆菌及枯草芽孢杆菌组) , 研究凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用, 对 2856 d 断奶仔猪生长性能的影响。试验结果显示:平均日增重指标:试验组 1 和试验组 3 差异不显著 (P0.05) , 均显著高于 (P0.05) , 均高于
2、(P0.05) , and were higher (P0.05) , and were higher (P0.05) ;同时使用凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌的试验组 3 仔猪体重虽然高于对照组, 但差异不显著 (P0.05) 。平均日增重指标:试验组 1 和试验组 3 差异不显著 (P0.05) , 均显著高于对照组和试验组 2 (P0.05) 。料肉比指标, 试验组 1 显著低于 (P0.05) , 均高于 (P0.05) 。除此之外, 粗蛋白、粗脂肪、粗纤维等表观消化率指标, 四个处理组之间统计差异不显著 (P0.05) 。表 4 凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对饲料养分表观消化率的影响 (%
3、) 下载原表 2.3 饲粮添加凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对断奶仔猪粪便微生物菌群的影响 (见表 5) 表 5 结果显示, 仔猪粪便中乳酸菌的数量指标:试验组 1 显著高于对照组 (P0.05) 。仔猪粪便中大肠杆菌的数量指标:试验组 1 数值最小, 对照组数值最大, 但 4个处理组之间统计差异不显著 (P0.05) 。表 5 饲粮添加凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌对断奶仔猪粪便微生物菌群的影响 (lg CFU/g) 下载原表 3 讨论近 2 年来, 我国饲料工业和畜牧业“减抗、禁抗”的步伐明显加快 (陈辉等, 2017;唐受文等, 2017) 。2016 年 7 月我国农业部公告第 2428 号,
4、 宣布禁止畜禽饲料中添加硫酸黏菌素。最新 2017 年 9 月我国农业部发布饲料添加剂安全使用规范 (修订意见征求稿) , 将 25 kg 以内仔猪饲粮中铜的最高添加限量下调为 125 mg/kg, 锌的最高添加限量下调为 150 mg/kg。虽然目前只是“征求意见稿”, 但很明显以硫酸黏菌素为主的组合饲用抗生素方案、高铜及高锌添加剂方案等, 用于应对断奶仔猪腹泻的技术即将禁用。这提示我国饲料企业配方师应尽快确定“减抗、禁抗”的替代方案, 同时选用安全、有效的“替抗”饲用添加剂产品。这也是本试验在断奶仔猪日粮中探索性研究饲用凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌“单一”或“组合”使用效果的初衷。为使本研究
5、更符合当前饲料企业的实际生产情况, 本次试验所有试验组仔猪饲粮中均添加了组合抗生素 (吉他霉素 50 mg/kg、土霉素 50 mg/kg、金霉素 75 mg/kg) , 以模拟当前饲料企业真实使用饲用微生态制剂的情况。试验组 1 在对照组饲粮基础上添加 500 g/t (全价配合饲料) 饲用凝结芽孢杆菌的原因是:已有试验报道显示, 0.5110CFU/g (全价配合饲料) 饲用凝结芽孢杆菌能够显著改善断奶仔猪生长性能 (周映华等, 2012;高书锋等, 2015) 。试验组 2 在对照组饲粮基础上添加 500 g/t (全价配合饲料) 饲用枯草芽孢杆菌的原因是:有研究显示, 1210CFU/
6、g (全价配合饲料) 饲用枯草芽孢杆菌对改善断奶仔猪生长性能具有一定效果 (黄雪泉, 2010;魏立民等, 2017) 。本试验在验证前人试验结果的同时, 进一步设计试验组 3:在对照组基础上同时添加 500 g/t (全价配合饲料) 饲用凝结芽孢杆菌和 500 g/t (全价配合饲料) 饲用枯草芽孢杆菌, 观察组合使用饲用凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能的效果。本次试验 4 个处理组仔猪腹泻率 (2%4%) 均控制在合理的实际养殖生产水平, 这说明整体试验仔猪健康状况良好, 因此本试验结果对广大饲料企业配方师实施逐步“减抗”具有真实的参考价值。表 3 结果显示, 添加了饲用凝结芽
7、孢杆菌 (510CFU/g) 的试验组 1 和试验组 3 两组仔猪的平均日增重差异不显著, 均显著高于对照组 (组合抗生素组) 和试验组 2 (枯草芽孢杆菌组) 。这一结果说明:在正常断奶、健康状况良好的条件下, 饲粮添加凝结芽孢杆菌进一步提高了 2856 日龄断奶仔猪的生长速度。高书锋等 (2015) 研究了 3 个剂量 (510CFU/g、7.510CFU/g、110CFU/g) 凝结芽孢杆菌对 28 日龄断奶仔猪 (7 kg) 生长性能的影响, 他们的试验结果也显示, 与对照组 (金霉素 50 mg/kg) 相比, 三个添加了饲用凝结芽孢杆菌的试验组仔猪平均日增重均显著提高。本试验结果与
8、高书锋等 (2015) 的报道基本一致。表 3 料肉比指标显示:单一添加饲用凝结芽孢杆菌的试验组 1 优于其他三个处理组, 这一结果提示: (1) 在饲粮含有规范使用的抗生素基础上, 饲用凝结芽孢杆菌能够进一步改善仔猪的饲料转化效率。表 4 分析仔猪对饲料营养表观消化率的结果也显示, 试验组 1 的干物质消化率最高, 这与表 3 生产性能的结果相符。 (2) 在饲粮含有抗生素的基础上, 添加较高剂量 (110CFU/g) 的枯草芽孢杆菌不能进一步改善饲料转化效率。进一步分析表观消化率显示 (表 4) , 试验组 2 的干物质消化率最低。这一现象在黄雪泉 (2010) 和魏立民等 (2017)
9、的报道中也有发现。 (3) 在日粮含有抗生素的基础上, 试验组 3 同时添加饲用凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌, 仔猪综合生产性能反而略低于单一使用凝结芽孢杆菌的试验组 1。造成以上结果的可能原因, 我们推测如下:其一, 实际饲料产品配方以及养殖生产过程中, 选用优质的饲用凝结芽孢杆菌制剂产品, 才能获得进一步改善断奶仔猪生产性能的功效。凝结芽孢杆菌在仔猪肠道内增殖、增生的过程, 产生 L-乳酸, 因此凝结芽孢杆菌属于乳酸菌类细菌。优质的饲用凝结芽孢杆菌产品, 能够产生大量乳酸, 具有直接杀菌抑菌功效 (张董燕等, 2016) 。大量的体外经典牛津杯法抑菌实验已经证实:凝结芽孢杆菌体外强效抑制肠道
10、致病大肠杆菌等有害细菌 (李刚等, 2013;姚晓红等, 2015;赵钰等, 2015;王磊等, 2016) 。周映华等 (2012) 和高书锋等 (2015) 通过动物试验也证明:饲喂凝结芽孢杆菌能够显著降低断奶仔猪肠道致病菌。本次试验同样也检测了仔猪粪便中微生物菌群情况, 结果显示 (表 5) :单一添加饲用凝结芽孢杆菌的试验组 1 仔猪肠道乳酸菌维持较高水平, 而大肠杆菌数量值最低。这一结果通过采集粪便检测体现, 且我们的结果与周映华等 (2012) 和高书锋等 (2015) 的报道完全一致, 同时也与现有的体外试验的结果相符 (李刚等, 2013;姚晓红等, 2015;赵钰等, 201
11、5;王磊等, 2016) 。其二, 不同菌株的饲用枯草芽孢杆菌制剂产品质量不同, 对断奶仔猪生产性能影响差异较大。在断奶仔猪饲粮中添加枯草芽孢杆菌, 虽有大量报道显示能够显著改善仔猪生产性能 (黄雪泉, 2010;刘江坤等, 2017;魏立民等, 2017) , 但也有报道显示:饲用枯草芽孢杆菌对断奶仔猪增重和料重比等生产性能指标影响不显著 (刘影等, 2010;王亚芳等, 2014) , 尤其是饲粮中同时添加不同类型的饲用抗生素, 情况更加复杂 (孙燕等, 2011) 。我们认为主要有 4 个因素干扰了饲用枯草芽孢杆菌在断奶仔猪上的饲喂效果, 包括: (1) 并非所有的枯草芽孢杆菌菌株具有直
12、接抑菌、杀菌功效。枯草芽孢杆菌不像凝结芽孢杆菌、乳酸菌等益生菌, 能够在肠道分泌大量乳酸, 发挥直接的抑菌、杀菌功效。虽然也有报道显示:某些枯草芽孢杆菌菌株具有直接抑制大肠杆菌等有害菌的功效 (王亚芳等, 2014;张媛媛等, 2014) , 但至今枯草芽孢杆菌分泌的特异抑菌物质及其作用机理不明确。 (2) 很多综述性文献认为, 枯草芽孢杆菌间接抑菌、调控肠道菌群平衡的机理, 是基于“肠道占位”理论 (邱权等, 2016;郭照宙等, 2017) 。然而, 实际养殖生产与饲料配方十分复杂, 尤其是饲粮中添加多种抗生素的条件下, 抗生素也可能同时抑制枯草芽孢杆菌在断奶仔猪肠道中的增殖, 这并不利于
13、“占位”, 进而影响饲用枯草芽孢杆菌的实际使用效果。 (3) 枯草芽孢杆菌“肠道占位”理论的成立, 还取决于特异菌株的枯草芽孢杆菌在断奶仔猪肠道中的增殖速度。如果某一菌株的枯草芽孢杆菌增殖速度低于大肠杆菌, 且添加量不充分的情况下, 该饲用枯草芽孢杆菌产品平衡肠道菌群的效果就较差或不稳定。秦瑶等 (2014) 采用体外枯草芽孢杆菌与大肠杆菌混合培养实验, 证实了这一观点。该观点已经应用于实际治疗腹泻仔猪:首先口服抗生素, 过 2 h 后, 再口服补充足量的枯草芽孢杆菌、乳酸菌等益生菌。 (4) 进一步分析, 对于健康仔猪而言, 如果饲粮添加或外源摄入的枯草芽孢杆菌过多, 在肠道中大量增殖, 虽
14、然有利于维持肠道菌群平衡 (表 5) , 但同时也消耗大量营养物质, 反而不利于仔猪生产性能的提高, 体现在实际养殖生产中动物采食量和料肉比指标的异常增高。我们的试验结果也证实了这一实际生产中观察到的现象 (表 3 和表 4) 。其三, 不同饲用益生菌组合使用, 是协同效应, 还是拮抗效应, 决定了复合饲用微生态制剂的实际效果。姚晓红等 (2015) 和赵钰等 (2015) 采用牛津杯法实验证明, 凝结芽孢杆菌体外对枯草芽孢杆菌具有一定抑制作用, 这与本次动物试验的结果吻合。与对照组相比, 单一添加饲用凝结芽孢杆菌的试验组 1 仔猪各项生产性能指标进一步提高;反而, 凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌
15、组合使用的试验组 3 料肉比指标, 与对照组相比差异不显著, 却明显高于试验组 1。这一结果进一步提示, 当前市场大量销售的凝结芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌、甚至包括其他益生菌的复合饲用微生态制剂产品, 其作用效果及机理有待商榷。4 结论断奶仔猪饲粮使用多种饲用抗生素的条件下, 单一添加适量的饲用凝结芽孢杆菌能够进一步改善断奶仔猪的生产性能。然而, 本试验显示单一添加枯草芽孢杆菌、或凝结芽孢杆菌与枯草芽孢杆菌组合使用, 没有获得进一步改善断奶仔猪生产性能的正效应。参考文献1程志斌, 王春, 李云辉, 等.日粮添加饲用凝结芽孢杆菌对蛋鸡生产性能的影响J.饲料博览, 2015 (11) :1-4. 2黄
16、遵锡, 程志斌.饲用凝结芽孢杆菌对蛋鸡生产性能及血液生化指标的影响J.饲料工业, 2015, 36 (22) :1-5. 3邱权, 詹志春, 周樱, 等.饲料中微生态制剂应用研究J.饲料工业, 2016, 37 (2) :55-58. 4Endres J R, Clewell A, Jade K A, et al.Safety assessment of a proprietary preparation of a novel probiotic, Bacillus coagulans, as a food ingredientJ.Food and Chemical Toxicology, 2
17、009 (47) :1231-1238. 5Endres J R, Qureshi I, Farber T, et al.One-year chronic oral toxicity with combined reproduction toxicity study of a novel probiotic, Bacillus coagulans, as a food ingredientJ.Food and Chemical Toxicology, 2011 (49) :1174-1182. 6赵树平, 包维臣.凝结芽孢杆菌的特性及研究进展J.家畜生态学报, 2014, 35 (2) :6-
18、11. 7邹梅, 黄友解, 吴吉安, 等.凝结芽孢杆菌的特点、作用机制及生物学功能J.饲料研究, 2017 (2) :1-5, 18. 8姚晓红, 吴逸飞, 杨家帅, 等.凝结芽孢杆菌的筛选、鉴定及抑菌特性的初步研究J.浙江农业科学, 2015, 56 (7) :1091-1094. 9王磊, 吕阳, 张越, 等.抑制大肠杆菌 K88 的益生菌体外筛选J.中国畜牧兽医, 2016, 43 (5) :1355-1360. 10黄海强.凝结芽孢杆菌制剂对断奶仔猪生长性能的影响J.福建畜牧兽医, 2014, 36 (6) :36-37. 11高书锋, 郭赵辉, 胡新旭, 等.凝结芽孢杆菌制剂对断奶仔
19、猪临床应用效果的研究J.饲料研究, 2015 (6) :42-47. 12洪文, 唐泽华, 胡远亮.凝结芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能的影响J.养殖与饲料, 2016 (3) :19-21. 13李海花, 张全红, 朱琪, 等.饲粮添加芽孢杆菌对感染大肠杆菌 K88 仔猪脾脏 TLRs 表达的影响J.饲料工业, 2016, 37 (18) :9-11. 14卫旭彪, 张璐璐, 马广, 等.酵母菌对猪肠道绒毛、隐窝及菌群的影响J.饲料工业, 2016, 37 (4) :61-64. 15张董燕, 张日俊.乳酸菌的生理特性及其在养猪生产中的应用现状J.饲料工业, 2016, 37 (20) :55-5
20、7. 16郭照宙, 崔红霞, 武洪志, 等.枯草芽孢杆菌在动物饲料中的应用J.饲料博览, 2017 (6) :31-33. 17华洵璐, 钱仁界, 张宪中, 等.芽孢杆菌复合制剂对断奶仔猪生长、腹泻、和饲料消化率的影响J.安徽农业科学, 2015, 43 (3) :166-170. 18郭红炳, 冯尚连, 郭勇, 等.益生素对断奶仔猪生长及血液指标的影响J.饲料工业, 2016, 37 (2) :55-58. 19程志斌, 陈爱民, 张红兵, 等.复合非淀粉多糖酶与植酸酶组合使用对仔猪生长性能和养分消化率的影响J.饲料研究, 2011 (12) :6-8. 20王向荣, 蒋桂韬, 张旭, 等.
21、凝结芽孢杆菌替代日粮抗生素对断奶仔猪生长性能和血清生化指标的影响J.中国畜牧杂志, 2013, 49 (23) :59-63. 21陈辉, 肖定福.壳寡糖的生物学功能及其在养猪生产中的应用J.饲料博览, 2017 (4) :26-29. 22唐受文, 黄宇, 罗佳捷, 等.不同营养水平无抗日粮对中大猪生长性能的影响J.饲料博览, 2017 (6) :1-4. 23周映华, 吴胜莲, 胡新旭, 等.不同芽孢杆菌对断奶仔猪生产性能的影响J.饲料工业, 2012, 33 (3) :21-23. 24黄雪泉.添加枯草芽孢杆菌制剂对仔猪生产性能的影响J.中国畜牧兽医, 2010, 37 (7) :212
22、-214. 25魏立民, 孙瑞萍, 刘海隆, 等.枯草芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能和血清生化指标的影响J.中国畜牧兽医, 2017, 44 (6) :1720-1725. 26李刚, 傅玲琳, 王彦波.益生菌凝结芽孢杆菌胞外产物抑菌特性研究J.食品科技, 2013, 38 (10) :20-24. 27赵钰, 傅玲琳, 王彦波.凝结芽孢杆菌抑菌物质的理化特性研究J.食品研究与开发, 2015, 36 (1) :20-25. 28刘江坤, 芦春莲, 李同洲, 等.枯草芽孢杆菌 (PB6 株) 制剂对断奶仔猪生产性能的影响J.畜牧与兽医, 2014, 46 (2) :37-39. 29刘影, 王春林
23、, 成廷水, 等.母猪和仔猪日粮中添加枯草芽孢杆菌对仔猪生产性能的影响J.饲料工业, 2010, 31 (18) :29-30. 30王亚芳, 肖群平, 吕慧源, 等.猪复合微生态制剂菌株的筛选及对仔猪生产性能的影响J.中国畜牧杂志, 2014, 50 (4) :58-62. 31孙燕, 边连全, 刘显军, 等.枯草芽孢杆菌和抗生素对断奶仔猪生长性能的影响J.中国畜牧杂志, 2011, 47 (7) :59-62. 32张媛媛, 黄广明, 劳晔.益生菌枯草芽孢杆菌 PB6 菌株对动物肠道病原菌的抑菌谱研究J.饲料研究, 2014 (13) :46-48. 33秦瑶, 王苇, 郭秉娇, 等.2 株枯草芽孢杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌试验研究J.中国畜牧兽医, 2014, 41 (1) :207-210.
