1、基础兽医学专业毕业论文 精品论文 新城疫疫苗对鸡 B 淋巴细胞发育及其免疫功能发生的影响关键词：法氏囊 脾脏 Lasota 疫苗 免疫功能 鸡 B 淋巴细胞摘要：本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行 HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫
2、苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中
3、 IgM、IgG和 IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且
4、胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾
5、脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM
6、、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论
7、基础。正文内容本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。
8、免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长
9、趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时
10、达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、
11、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 Ig
12、G 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫
13、苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾
14、脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于
15、退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照
16、组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴
17、细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota
18、 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细
19、胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和
20、增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、
21、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗
22、原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota
23、 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增
24、强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结
25、构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和Ig
26、A 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体
27、的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功
28、能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量
29、均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SP
30、F18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面
31、积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到
32、 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时
33、下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异
34、不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着
35、日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡
36、均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋
37、巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 I
38、gM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高
39、于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法
40、氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性 IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及
41、其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、
42、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进
43、免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差
44、异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG
45、+，并在体液免疫中占主导作用。 利用 MTT法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞增殖功能的变化，结果表明：不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏 B 淋巴细胞增殖反应强度不同程度地高于对照组鸡。在 7、11 日龄免疫组与对照组比较差异不显著（Pgt;005） ，可能是由于免疫器官的不成熟导致免疫细胞活性增殖能力弱的原因。同时我们还发现随着日龄的增加，B 淋巴细胞增殖功能处于增强状态，说明法氏囊和脾脏中 B 淋巴细胞的体液免疫功能随着年龄的增长而增强。 利用间接 ELISA 法研究不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后血清中 NDV 特异性
46、IgM、IgG 和 IgA 抗体的动态变化，结果表明：不同日龄鸡免疫后血清中抗新城疫免疫球蛋白 IgM、IgG、IgA 的含量均差异显著高于对照组（Plt;005） ，随着日龄的增加免疫组鸡 IgM、IgG、IgA 抗体含量增加幅度逐渐增大，其中 IgG 免疫组增加幅度较大，说明随着日龄的增加，Lasota 疫苗刺激机体产生体液免疫应答能力逐渐增强。 综上所述，本实验首次对不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后对 B 淋巴细胞的发育及其免疫功能发生进行了研究，表明不同日龄鸡免疫 Lasota 疫苗后能够促进免疫器官的组织发育、B 淋巴细胞发育及其免疫功能的增强，表现了年龄相关性的变化过程，
47、为进一步探索新城疫疫苗对 B 细胞引起的体液免疫机理提供有利数据，并为疫苗的适时免疫和疾病防治提供理论基础。本研究选择了 SPF18 日鸡胚及出壳后 1、4、7、14、28、56、84、120 日龄鸡，分为两组，免疫组接种新城疫弱毒 Lasota 活疫苗，对照组鸡不做任何处理。两组鸡均在免疫后的第 10 天剖杀，采取法氏囊、脾脏，制作冰冻切片，以进行HE 染色和免疫组化染色；无菌采取法氏囊、脾脏，分离淋巴细胞，进行淋巴细胞转化实验；采血、分离血清，进行间接 ELISA 实验。 利用 HE 染色方法观察不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏的组织结构，结果表明：在法氏囊中，SPF
48、 对照组鸡淋巴滤泡的面积不断增大，呈现上升趋势，说明随着日龄的增长，鸡的免疫功能是逐渐增强的。免疫组鸡在不同日龄阶段淋巴滤泡面积较对照组呈现不同程度的增大，说明在 Lasota 疫苗抗原的刺激下，法氏囊进一步分化发育，执行免疫功能进而逐渐达到成熟；在脾脏中，SPF 对照组鸡动脉周围淋巴鞘的面积随着日龄的增加呈现上升趋势，66 日龄左右达到了成熟状态。免疫组鸡动脉周围淋巴鞘和脾小体的数量和面积均较对照组增多和增大，说明外源抗原的刺激能够促进免疫器官的组织发生和发育。 利用免疫组化法检测不同日龄鸡免疫新城疫 Lasota 疫苗后法氏囊和脾脏中 IgM、IgG 和IgA 抗体生成细胞的动态变化，结果
49、表明：在法氏囊中，对照组IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞随着日龄的增加阳性细胞均呈增长趋势，并都趋于向髓质内迁移，直到 94 日龄达到最大值，说明此时法氏囊组织已经成熟，免疫功能也逐渐成熟。130 日龄时淋巴细胞数量逐渐降低，说明法氏囊已经趋于退化。免疫组鸡皮质和髓质中的 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞都较同日龄对照组鸡增多，其中胚胎 18 日龄、7、94 日龄免疫组 IgM+、IgG+、IgA+B 淋巴细胞均较对照组差异显著增加（Plt;005） ；说明 Lasota 疫苗能够刺激法氏囊组织产生更多的 B 淋巴细胞，且胚胎免疫能够诱导大量抗体的产生；在脾脏中，SPF 对照组鸡随着日龄的增加 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量总体呈现递增趋势，66 日龄时达到最大值，94、130 日龄时下降且达到稳定状态。免疫组鸡在不同日龄免疫后脾脏中 IgM+、IgG+和 IgA+B 淋巴细胞数量较对照组均不同程度增加。对照组鸡在不同日龄中 IgM+一直高于 IgG+、IgA+，但与免疫组比较，Lasota 疫苗刺激脾脏产生 IgG+增加的幅度高于 IgM+、IgA+，说明外来抗原能够刺激机体产生更多的 IgG+，并在体液免疫中占
