1、细胞生物学专业优秀论文 斑马鱼新基因 KLP 的克隆、分析及功能研究关键词:动物基因 基因克隆 生物信息学摘要:本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛
2、选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用 RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574 个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein)
3、,但没有 KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。正文内容本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基
4、因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用 RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码1574 个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性
5、较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有 KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设
6、计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个
7、氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具
8、有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信
9、息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选
10、斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPC
11、R 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具
12、有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基
13、因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究
14、采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克
15、隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到
16、斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清
17、筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/P
18、OZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的
19、功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(
20、KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射
21、 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 5171bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子
22、 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。本研究采用交叉免疫学筛选新基因,经过生物信息学分析希望克隆到与胚胎发育或疾病相关并具有重要功能的新基因。基于 SEREX 策略,利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 cDNA 表达文库,阳性克隆经核酸测序,生物信息学分析,选择可能具有重要功能的基因进行深入研究。基于生物信息学电子克隆的
23、策略克隆基因全长,最后设计引物通过 RTPCR 验证电子克隆的正确性。显微注射 RNA 观察 KLP 基因过表达对斑马鱼胚胎发育的影响,探讨 KLP 基因的功能。得到以下结果: 1 SEXER 筛选:利用利用人脐静脉内皮细胞免疫兔血清筛选斑马鱼心脏 eDNA 表达文库共获得 22 个阳性克隆。 2 基因全长的克隆及生物信息学分析:充分利用基因组学的研究成果,通过 est 序列拼接、基于基因组的直接测序方法等获得了斑马鱼 KLP 基因的完整编码区序列,随后用RTPCR 扩增目的基因并测序以验证电子克隆的正确性。 3 功能的初步研究:通过生物信息学的分析预测,我们得到的 KLP 基因全长为 517
24、1bp,编码 1574个氨基酸,该蛋白含有 8 个 C2H2 基序,与转录因子 KAISO 样蛋白相似性较高,提示可能为一新的转录因子,因此命名为 KLP(KAISOLike Protein),但没有KAISO 蛋白所有的 BTB/POZ 结构域,提示该蛋白功能与 KAISO 有所不同。KLP 基因过表达观察到斑马鱼胚胎发育严重滞后及畸形,提示该基因在胚胎发育早期即具有重要的作用。特别提醒 :正文内容由 PDF 文件转码生成,如您电脑未有相应转换码,则无法显示正文内容,请您下载相应软件,下载地址为 http:/ 。如还不能显示,可以联系我 q q 1627550258 ,提供原格式文档。我们还
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