1、 浅论枳椇子总黄酮微波提取工艺摘要：目的：研究枳椇子总黄酮的微波提取工艺。方法：以总黄酮为指标，采用正交试验法筛选最佳工艺条件。结果：优化的最佳工艺条件为：微波功率 300W、乙醇浓度 50、10 倍量溶剂、辐射时间 20min。结论：微波提取技术能够快速高效的提取枳椇子总黄酮。关键词：枳椇子 黄酮 微波提取 枳椇子，为鼠李科植物枳椇的干燥成熟带肉质果柄的果实或种子1，自古以来就是一味解酒良药，素有“千杯不醉枳椇子 ”之说。历代医书对其解酒的叙述各异2 ，例如 新修本草与千金翼方中为“以其木为屋，屋中酒则味薄”；本草纲目 中为“ 枳椇消酒积 ”等。该药材在中华人民共和国卫生部药品标准-中药材中
2、也有收载3，功效为止渴除烦、清湿热，解酒毒，用于酒精中毒、烦渴呕逆、二便不利等症。目前的文献资料表明总黄酮可能是其有效部位4，故本文以总黄酮含量为指标，考察了微波法提取枳椇子总黄酮的影响因素，为寻求其最佳微波提取工艺提供依据。 1 仪器与材料 1.1 仪器 BS-223S 分析天平(Sartorius) ，XH-100A 微波萃取仪（北京祥鹄科技发展有限公司），FWZ UV-2000 紫外可见分光光度计(龙尼柯（上海）仪器有限公司)。 1.2 材料 枳椇子：购于宜春市，经鉴定为鼠李科植物枳椇的干燥种子；芦丁对照品（中国生物制品鉴定所）；无水乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠均为分析纯 2 方法与
3、结果 2.1 溶液的配制 2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的芦丁对照品 0.1250g，置 250ml 量瓶中，加 30%乙醇溶解，稀释至刻度，摇匀，即得（0.50mg/ml）。 2.1.2 供试品溶液的制备 精密量取样品溶液 2.0ml，置于 25 ml 量瓶中，加入 5%亚硝酸钠溶液 0.7ml。摇匀后放置 6min，加 10%硝酸铝溶液 0.7ml，摇匀，放置 6min，加氢氧化钠试液 5ml，加 30%乙醇稀释至刻度，摇匀，显色 l0min，即得。 2.2 吸收波长的测定 精密量取芦丁对照品溶液 1.00ml，按 2.1.2 项下的方法显色后， 在350nm650nm
4、进行波长扫描，结果见图 1。可以看出，在 500nm处有最大吸收，故选择 500nm 处测定波长。 2.3 标准曲线的建立 精密量取芦丁对照品溶液 1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5ml 分别置于 25ml 量瓶中，按 2.1.2 项下方法显色，以相应试剂为空白，于500nm 处测定吸光度。以浓度（g/ml)为横坐标，吸收度为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程为：A=0.0101A+0.0251（r=0.9996），芦丁浓度在 2070g/ml 之间时与吸光度有良好的线性关系。实验精密度、重现性实验 RSD 均小于 2.0%，符合方法学要求。 2.4 回收率实验 精密量取正交试验表中的
5、 5 号样品溶液 2.0ml（共 5 份），置 25ml 量瓶中，分别精密加入对照品溶液 1.5ml，按 2.1.2 项下方法显色并测定它们的吸光度，计算回收率，结果回收率在95.2%104.1%之间，RSD 小于 3，表明重现性好，方法可行。 2.5 正交试验与结果 2.5.1 提取工艺 取枳椇子于烘箱中 60干燥 24h，粉碎，取 2040 目粗颗粒 10g 置微波萃取仪配套的三口烧瓶中，加入溶剂，浸泡 15min 后放入微波萃取仪中（温度设定 75），按正交表中的条件（见表 1）提取 2 次，滤过，合并滤液，残渣用适量溶剂洗涤 3 次，最后并入 250ml 量瓶中，定容。按照前述方法进行
6、含量测定，结果见表 2 与表 3。 注：F0.05(2，2)19.0，F0.01(2，2)99.0 2.5.2 结果与分析 由表 3 直观分析可知：各因素作用主次为 CABD，且以 A2 B3 C3 D3 为最佳，即功率为 300W，乙醇浓度为 50，料液比为 10，辐射时间为20min。 方差分析中，由于 D 因素对提取影响极小，故将其列为误差列。从表 3 可以看出，C 因素的改变对总黄酮的提取效率有非常显著性影响，A 因素的改变对总黄酮的提取有显著性影响。结论与前面的直观分析相同。 2.5.3 正交试验验证 按照正交试验优化的工艺进行提取，测定总黄酮含量，结果 2 次验证的结果分别为 1.49、1.43，优于正交试验表中的各次试验。 3 结论与讨论 通过正交试验对枳椇子总黄酮的微波提取工艺进行了研究，结果表明最佳提取工艺为微波功率为 300W，乙醇浓度为 50，料液比为 10，辐射时间为 20min。采用文献报道的回流法5对枳椇子中总黄酮含量进行了测定，所测结果为 1.44，与微波提取法所测结果接近，但耗时较长，故微波法在缩短提取时间、提高提取效率等方面具有较大优势。
