1、氯丁二烯在生物体代谢机制研究现状 王超洋 秦文华 王平 河南省职业病防治研究院 摘 要： 氯丁二烯主要应用于氯丁橡胶的生产, 职业接触是主要的暴露途径, 可以通过吸入和皮肤吸收进入体内。氯丁二烯在细胞色素 P450 作用下, 氧化代谢为环氧化物, 该类环氧化物有致癌性, 并通过进一步水解和 GSH 加合作用, 生成一系列水溶性的和易排出的水解化合物和 GSH 加合物。本文主要综述了有关氯丁二烯代谢的研究, 识别其主要代谢产物, 为进一步研究职业接触氯丁二烯生物标志物奠定基础。关键词： 氯丁二烯; 代谢物; 肝微粒体; 作者简介：秦文华, E-mail:收稿日期：2017-06-20基金：国家重
2、点临床专科建设科研项目 (财社2011170 号) Received： 2017-06-202-氯-1, 3-丁二烯 (以下简称氯丁二烯) 是应用于氯丁橡胶生产的主要化工原料, 氯丁橡胶是一种耐腐蚀性人造橡胶, 用于汽车零部件、电线电缆外壳、黏合剂和个体防护装备等1。氯丁二烯没有已知的环境和饮食来源, 职业接触是主要的暴露源, 主要通是过吸入和皮肤吸收途径进入人体, 常发生于单体合成、运输和聚合过程中2。为了了解对人类健康可能产生的不利影响, 在动物实验方面已经做出了广泛的评估。文献报道已经描述了其急性、亚急性和慢性毒性3-7。在暴露于氯丁二烯的工人中, 其患肺癌和肝癌的风险增大, 但流行病学
3、研究结果还未确定其对人体的致癌性8-11。大鼠和小鼠通过吸入方式暴露于氯丁二烯中, 研究表明, 氯丁二烯对这两个物种具有致癌性12-13。基于在动物实验中其致癌性有充足证据, 对人体致癌性的证据不足, 国际癌症研究机构把氯丁二烯列为 2B 类致癌物 (可能致癌物) 14。国内有关氯丁二烯的研究主要集中于氯丁二烯的毒理及临床救治, 而有关氯丁二烯的代谢方面的研究国内还尚未见到报道, 在国外近几年, Tony Munter、Lisa Cottrell、Bernard T.Golding、William P.Watson、Rikas Ghai 等人对氯丁二烯的代谢机制进行了比较全面的研究。本文主要回
4、顾了国外有关氯丁二烯代谢产物及代谢机制的研究现状。对职业接触氯丁二烯生物标志物研究有重要意义。1 氯丁二烯的氧化代谢肝脏和肺这些组织更易诱发肿瘤, 并代表了对外源性化学物质代谢的重要组织。早在 1979 年, H.Bartsch 等15人就认为, 小鼠肝微粒体对氯丁二烯作用可能有环氧化物形成, 并认为该代谢物可能会有毒性和致突变性。在雄性小鼠体内产生肺肿瘤的最低氯丁二烯浓度为 12.8 ppm, 相比之下丁二烯最低浓度为 62.5 ppm6, 可知, 氯丁二烯比丁二烯有更强的致癌性。在 2001 年, M.V.Himmelstein 等16人研究认为, 1-氯乙烯基环氧乙烷是在大鼠肝微粒体内氯
5、丁二烯的代谢产物, 并表明, 这种环氧化物是诱导有机体畸变的物质。对来自 SD 大鼠、Fischer 344 大鼠、B6C3F1 小鼠和人的肝微粒体中氯丁二烯的代谢作用进行了全面地研究。在细胞色素 P450 作用下, 氯丁二烯被代谢为 1-氯乙烯基环氧乙烷和 2-氯-2-乙烯基环氧乙烷, 并且确认这两种环氧化物均有 R型和 S 型两种对映异构体, 除了环氧化物外, 还有多种多功能醛和酮类物质形成3。无论性别, 对于人或龋齿类动物, 1-氯乙烯基环氧乙烷是氯丁二烯氧化代谢的主要产物。在没有环氧化物水解酶存在情况下, 其主要代谢物 1-氯乙烯基环氧乙烷被认为是稳定的。1-氯乙烯基环氧乙烷的稳定性与
6、来自乙烯的环氧乙烷、来自丁二烯的环氧树脂、或来自异戊二烯的异戊二烯单环氧化物的稳定性是一致的17-20。不同物种间, 氯丁二烯通过肝脏微粒体代谢相似, 其固有清除率显示, 小鼠比人的最大相差大约 2 倍数多21-22。对于氯丁二烯在肝微粒体中的氧化速率, 该结果与目前的研究一致:小鼠大鼠人23。比起已报道的有关丁二烯氧化为环氧丁烯的 Vmax/Km 值, 微粒体中氯丁二烯氧化的 Vmax/Km 值显示较大24。氯丁二烯和丁二烯的 Vmax/Km 值的不同这一现象与丁二烯对肺肿瘤有相对更大的功效这一现象一致21-22。人体、大鼠、小鼠系统对氧化代谢产物 1-氯乙烯基环氧乙烷的两种异构体 R 型与
7、 S 型的生成比率有明显差异3。氯丁二烯的氧化代谢作用不同于异戊二烯25-26和丁二烯27-28, 这两种物质除了生成单环氧化物外还生成双环氧化物。在肝微粒体中, 与大鼠、仓鼠、或人相比, 对于小鼠, 氯丁二烯存在的更快的氧化速率与更多的 1-氯乙烯基环氧乙烷生成量。低浓度氯丁二烯的氧化时, 1-氯乙烯基环氧乙烷在大鼠和仓鼠肺微粒体中仍然能够被定量检测到21-22。图 1 氯丁二烯代谢途径 (a 和 b 分别代表 R 和 S 对映异构体) 下载原图2 环氧化物的水解及其进一步代谢作用氯丁二烯在细胞色素 P450 作用下氧化代谢生成两种单环的环氧化物, 分别是2-氯-2-乙烯基环氧乙烷和 1-氯
8、乙烯基环氧乙烷。在缺少谷胱甘肽 (以下简称GSH) 转移酶的情况下, 在微粒体孵育体系中, 进一步代谢物不能很快与 GSH 反应, 首先水解酶促其进行水解。因此水解酶作用下的 1-氯乙烯基环氧乙烷的水解对生物体毒理和解毒是特别重要的。在肝和其它动物组织中, 环氧化物水解酶促使环氧化物水解, 生成水溶性和易排出的邻二醇类化合物29-30。这与Tony Munter 等人31的研究一致, 1-氯乙烯基环氧乙烷, 优先水解生成 3-氯-3-烯-1, 2, -丁二醇 (19a/19b) 。为确认 1-氯乙烯基环氧乙烷在小鼠肝微粒体内的潜在氧化代谢物, Matthew W 等人21-22进行实验, 结果
9、显示有 1-氯乙烯基环氧乙烷的二醇类代谢物 3-氯-3-烯-1, 2-丁二醇生成。对于每一种浓度的氯丁二烯, 与大鼠或人肝脏微粒体比较, 小鼠肝脏微粒体中能检测到更多的3-氯-3-烯-1, 2-丁二醇23。通过环氧化物水解酶作用促使水解发生, 对 (S) 型 1-氯乙烯基环氧乙烷是有选择性的, 从而导致 (R) 型 1-氯乙烯基环氧乙烷的累积, 对氯丁二烯引起小鼠肿瘤的方面更敏感32。在肝微粒体中, 1-氯乙烯基环氧乙烷水解的Vmax/Km 值表明, 小鼠比大鼠大约慢 2 倍多, 比仓鼠或人大约慢 6 倍21-22。在小鼠肝微粒体中通过氧化作用的 1-氯乙烯基环氧乙烷的固有清除率比氯丁二烯的氧
10、化清除率低大约 10 倍。还不确定在小鼠肺中是否有 1-氯乙烯基环氧乙烷氧化代谢的发生21-22。代谢物 2-氯-2-乙烯基环氧乙烷在微粒体中迅速被水解为 1-羟基-3-烯-2-丁酮 (4) 。但不能区分是通过环氧化物水解酶水解还是自发水解。对于环氧化物 2-氯-2-乙烯基环氧乙烷, 还有一些次要代谢物, 这些代谢物通过其它途径生成, 分别是 1-氯-3-烯-2-丁酮 (5) 、2-氯-3-烯-1-丁醛 (6) 和 (Z) -2-氯-2-烯-1-丁醛 (7) 。5 和 6 混合物, 是通过 2-氯-2-乙烯基环氧乙烷的重排, 或在细胞色素 P450 作用下氯丁二烯的直接氧化, 而形成的。 (Z
11、) -2-氯-2-烯-1-丁醛 (7) 是通过热力学不稳定的 2-氯-3-烯-1-丁醛 (6) 异构化而形成31。代谢物 1-羟基-2-丁酮 (8) 、1-氯-2-丁酮 (9) 、1-氯-2-羟基-3-丁烯 (10) 和 2-氯-1 丁醛 (11) , 也随着进一步代谢产物的形成而产生31。3 代谢物与 GSH 的加合3.1 2-氯-2-乙烯基环氧乙烷代谢物与 GSH 的加合高活性的亲电代谢产物可能与 GSH 进行加合反应, 该反应是一种重要的细胞防御机制, 它可以生成水溶性的、不活泼的加合物, 更容易排出体外29。亲电子物质与 GSH 的加合反应能够自发或通过 GSH 转移酶催化而发生。在
12、19 世纪80 年代, Summer 和 Greim 等人33研究了, 氯丁二烯在大鼠中的代谢作用和解毒。他们发现, 氯丁二烯会导致肝脏 GSH 的明显消耗和 GSH 加合物的形成。研究结果显示, 即使在不存在 GSH 转移酶的条件下, 代谢物 1-羟基-3-烯-2-丁酮 (4) 、1-氯-3-烯-2-丁酮 (5) 、和 (Z) -2-氯-2-烯-1-丁醛 (7) 也能迅速与GSH 加合31。为了对氯丁二烯解毒进行定性和定量研究, 氯丁二烯代谢物与GSH 的反应在磷酸盐缓冲溶液 (PH7.4) 中进行, 其 GSH 加合物被确认为是 1-羟基-4- (S-谷胱甘肽) -2-丁酮 (14) 、1
13、, 4-双- (S-谷胱甘肽) -2-丁酮 (15) 和 (Z) -2- (S-谷胱甘肽) -2-烯-1-丁醛 (16) 23。加合物 (Z) -2- (S-谷胱甘肽) -2-烯-1-丁醛 (16) 的形成, 是通过 C-2 上氯原子被硫取代完成的34。首先, 多种 、 位不饱和的羰基化合物通过迈克尔加成反应与 GSH 和 GSH 的中间产物反应35-36, 这些中间产物是 1, 2-二溴磷化-3-氯丙烷和 1, 2-二溴乙烷的生物转化而来37-38。其形成机制可能是通过巯基向双键上的 -碳迈克尔加成反应完成的, 接着是一个分子攻击硫, 并且氯所在的碳位移形成中间物, 这些可以被氯化物捕获而形
14、成 3-氯-2-谷胱甘肽丁醛, 它们能经过去除氯原子而形成 (Z) -2- (S-谷胱甘肽) -2-烯-1-丁醛 (16) 。加合物 1-羟基-4- (S-谷胱甘肽) -2-丁酮 (14) 的识别, 是通过LC/MS 分析, 等量的 GSH 与 1-羟基-3-烯-2-丁酮 (4) 的反应, 混合物中显示有一种主要的加合物 1-羟基-4- (S-谷胱甘肽) -2-丁酮 (14) 形成。质谱显示的基本特征与先前 Krause et al 等人报道的该物质的特征一致39。加合物 1, 4-双- (S-谷胱甘肽) -2-丁酮 (15) 的形成, 是过量的 5 与 GSH 加合反应, 形成的主要加合产物
15、是 1-氯-4- (S-谷胱甘肽基) -2-丁酮 (18) , 该反应时通过GSH 与 5 的双键的迈克尔加成反应完成的, 通过质谱分析, 其副产物是双 GSH加合物 1, 4-双合-S 谷胱甘肽基-2-丁酮 (15) 。而当过量的 GSH 与 5 加合反应时, 其主要反应产物主要是 1, 4-双合-S 谷胱甘肽基-2-丁酮 (15) 。3.2 1-氯乙烯基环氧乙烷代谢物与 GSH 的加合1-氯乙烯基环氧乙烷与 GSH 反应生成三种加合物。两种主要的加合物被确认是2-氯-3-羟基-4- (s-谷胱甘肽) -丁烯 (17) 的一对非对映异构体。通过 C 核磁共振和大量光谱数据分析, 少数加合物认
16、为是 2-氯-4-羟基-3- (s-谷胱甘肽) -丁烯23。1-氯乙烯基环氧乙烷与 GSH 的加合用带有速率常数的伪二阶反应机制模型来描述, 对于肝微粒体, 其速率大小顺序为仓鼠Fischer 大鼠Wistar大鼠小鼠人;仓鼠与人之间的差别大约相差 8 倍21-22。1-氯乙烯基环氧乙烷和 GSH 自发的一阶反应的半衰期大约是 10 h, 比环氧丙烷与 GSH 的半衰期1.7h 要长40。1-氯乙烯基环氧乙烷与 GSH 的酶促加合被认为是一个标准的饱和米凯利斯-门顿反应41。在肝微粒体中, GSH 加合物形成总量的顺序是小鼠大鼠人, 反映出通过小鼠肝脏微粒体系统形成的活性代谢物量比较大。4 代
17、谢物与核苷和 DNA 的反应氯丁二烯被细胞色素 P450 代谢为亲电代谢物, 这些物质容易受到 DNA 碱基的亲核基团的攻击29。在 37, 磷酸盐缓冲溶液 p H=7.4 情况下, 研究了 1-氯乙烯基环氧乙烷与 DNA 核苷和牛胸腺 DNA 的反应42。加合物通过反相 HPLC 进行分离, 运用 UV、NMR 和质谱进行结构定性。与 2-脱氧鸟苷反应生成 1 种主要加合物是 N7- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -鸟嘌呤 (20) , 和 8 种次要加合物。1-氯乙烯基环氧乙烷与 2-脱氧腺苷反应生成 N1- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2-脱氧腺苷 (21) 和
18、N6- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2-脱氧腺苷 (2 2) 。2-脱氧胞苷与 1-氯乙烯基环氧乙烷的反应, 通过去氨基生成 N3- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2-脱氧尿苷 (23) 。胸苷的反应生成一种主要加合物为 N3- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2 胸苷 (2 4) 。核苷与 1-氯乙烯基环氧乙烷发生的反应, 生成加合物有一个或两个 3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基团31。氯丁二烯致使 DNA 发生变化在氯丁二烯的致癌性方面发挥着重要作用。在多级癌变过程中, DNA 加合物的形成是一个关键因素43。对于小鼠, 氯丁二烯引起的肺、哈氏腺和前胃
19、基因突变显示 AT 的转化占主导, 说明这种突变在氯丁二烯诱发肿瘤方面发挥着重要作用44-45。在 DNA 中检测到主要加合物是初级加合物 N7- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -鸟嘌呤 (20) 。另外, 在酶水解产物中, 检测到 N3- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2-脱氧尿苷 (23) 、N1- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2-脱氧腺苷 (21) 、N6- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -2-脱氧腺苷 (22) 、N3- (3-氯-2-羟基-3-丁烯-1-基) -胸苷 (24) 31, 见图 2。图 2 代谢物与核苷反应所生成的化合物 下载
20、原图5 小结氯丁二烯在肝微粒体中, 首先在细胞色素 P 4 5 0 作用下进行氧化代谢, 生成两种环氧化物。其中一种环氧化物 2-氯-2 乙烯基环氧乙烷不稳定, 一部分经过在水解生成了 1-羟基-3-烯-2-丁酮 (4) , 另外一部分经过分子重排或细胞色素作用形成 1-氯-3-烯-2-丁酮 (5) 和 2-氯-3-烯-1-丁醛 (6) , 后者不稳定, 异构化形成 2-氯-2-烯-1-丁醛 (7) 。1-氯乙烯基环氧乙烷较稳定, 在水解酶作用下可水解为水溶性和易排出的二醇类代谢物 3-氯-3-烯-1, 2-丁二醇 (19) 。通过 GSH 加合和水解作用, 代谢物活性得到钝化, 可以防止它们
21、共价结合成DNA 和蛋白质。氧化活性反应和水解以及加合反应的反应平衡决定了该物质的整体毒性23。氯丁二烯氧化代谢形成的环氧化物具有致癌性, 1-氯乙烯基环氧化物和 2-氯 2-乙烯基环氧乙烷的进一步代谢物能与 GSH 加合, 形成相应的GSH 加合物31。代谢途径见图 1。体外实验研究中, 虽代谢物众多, 但目前的报道中还未确认哪种代谢物可作为职业接触氯丁二烯的工人的生物标志物。氯丁二烯没有环境和食物来源, 职业暴露是其主要接触途径, 找到一种合适的氯丁二烯生物标志物并建立符合要求的检测方法, 对氯丁二烯职业中毒及其防治都有很重要的意义。参考文献1Lynch M.Manufacture and
22、 use of chloroprene monomerJ.Chem.Biol Interact, 2001, 135/136:155-167. 2Lynch J.Occupational exposure to butadiene, isoprene, and chloropreneJ.Chem Biol Interact, 2001, 135/136:207-214. 3Cottrell L, Golding BT, Munter T, et al.In vitro metabolism of chloroprene:species differences, epoxide stereoch
23、emistry and a de-chlorination pathwayJ.Chem.Res.Toxicol, 2001, 14 (11) :1552-1562. 4Melnick RL, Elwell MR, Roycroft JH, et al.Toxicity of inhaled chloroprene (2-chloro-1, 3-butadiene) in F344 rats and B6C3F (1) miceJ.Toxicology, 1996, 108 (1-2) :79-91. 5Melnick RL.Sills RC.Comparative carcinogenicit
24、y of 1, 3-butadiene, isoprene, and chloroprene in rats and miceJ.Chem Biol Interact, 2001, 135-136:27-42. 6Melnick RL, Sills RC, Portier CJ, et al.Multiple organ carcinogenicity of inhaled chloroprene (2-chloro-1, 3-butadiene) in F344/N rats and B6C3F1 mice and comparison of dose response with 1, 3-
25、butadiene in miceJ.Carcinogenesis, 1999, 20 (5) :867-878. 7Valentine R.Himmelstein MW.Overview of the acute, subchronic, reproductive, developmental, and genetic toxicology of beta-chloropreneJ.Chem Biol Interact, 2001, 135-136:81-100. 8Acquavella JF, Leonard RC.A review of the epidemiology of 1, 3-
26、butadiene and chloropreneJ.Chem.-Biol.Interact, 2001, 135/136:43-52. 9Colonna M, Laydevant G.A cohort study of workers exposed to chloroprene in the department of Isere, FranceJ.Chem Biol Interact, 2001, 135/136:505-514. 10Bulbulyan MA, Margaryan AG, Ilychova SA, et al.Cancer incidence and mortality
27、 in a cohort of chloroprene workers from ArmeniaJ.Int.J.Cancer, 1999, 81 (1) :31-33. 11Zaridze D, Bulbulyan M, Changuina O, et al.Cohort studies of chloroprene-exposed workers in RussiaJ.Chem Biol Interact, 2001, 135/136:487-503. 12Melnick RL, Sills RC, Portier CJ, et al.Multiple organ carcinogenici
28、ty of inhaled chloroprene (2-chloro-1, 3-butadiene) in F344/N rats and B6C3F1 mice and comparison of dose response with 1, 3-butadiene in miceJ.Carcinogenesis, 1999, 20 (5) :867-878. 13United States NTP (National Toxicology Program) (1998) .Toxicology and Carcinogenesis Studies of Chloroprene (CAS N
29、o.126-99-8) in F344/N Rats and B6C3F1Mice (Inhalation Studies) , Technical Report No.467M.Bethesda, MD:National Institutes of Health, 1998:1-379 14International Agency for Research on Cancer.Re-Evaluation of some organic chemicals, hydrazine and hydrogen peroxide, in:IARC Monographs on the Evaluatio
30、n of the Carcinogenic Risks to Humans (Part 1) , vol.71M.Lyon, France:International Agency for Research on Cancer, 1999:227 15Bartsch H, Malaveille C, Barbin A, et al.Mutagenic and alkylating metabolites of halo-ethylenes, chlorobutadienes and dichlorobutenes produced by rodent or human liver tissue
31、s.Evidence for oxirane formation by P450-linked microsomal monooxygenasesJ.Arch Toxicol, 1979, 41 (4) :249-277. 16Himmelstein MW, Gladnick NL, Donner EM, et al.In vitro genotoxicity testing of (1-chloroethenyl) oxirane, a metabolite of chloropreneJ.Chem Biol Interact, 2001, 135/136:703-713. 17Csanad
32、y GA, Denk B, Putz C, et al.A physiological toxicokinetic model for exogenous and endogenous ethylene and ethylene oxide in rat, mouse, and human:Formation of 2-hydroxyethyl adducts with hemoglobin and DNAJ.Toxicol Appl Pharmacol, 2000, 165 (1) :1-26. 18Malvoisin E, Lhoest G, Poncelet F, et al.and M
33、ercier, M.Identification and quantitation of 1, 2-epoxy-3-butene as the primary metabolite of 1, 3-butadieneJ.J Chromatogr, 1979, 178 (2) :419-425. 19Schmiedel G, Filser JG, Bolt HM.Rat liver microsomal transformation of ethene to oxirane in vitroJ.Toxicol Lett, 1983, 19 (3) :293-297. 20Watson WP, C
34、ottrell L, Zhang D, et al.Metabolism and molecular toxicology of isopreneJ.Chem Biol Interact, 2001, 135-136:223-238. 21Himmelstein, MW.Carpenter SC, Hinderliter PM.Kinetic Modeling of Chloroprene Metabolism:I.In vitro Rates in Liver and Lung Tissue Fractions from Mice, Rats, Hamsters, and HumansJ.T
35、oxicological Sciences, 2004, 79 (1) :18-27. 22Himmelstein, MW.Carpenter, SC.Hinderliter PM.Kinetic Modeling of Chloroprene Metabolism:.The application of physiologically based modeling for cancer dose response analysisJ.Toxicological Sciences, 2004, 79 (1) :28-37. 23Munter T, Cottrell L, Golding BT,
36、 et al.Detoxication pathways involving glutathione and epoxide hydrolase in the in vitro metabolism of chloropreneJ.Chem Res Toxicol, 2003, 16 (10) :1287-1297. 24Csanady GA, Guengerich FP, Bond JA.Comparison of the biotransformation of 1, 3-butadiene and its metabolite, butadiene monoepoxide, by hep
37、atic and pulmonary tissues from humans, rats, and miceJ.Carcinogenesis, 1992, 13 (7) :1143-1153. 25Watson WP, Cottrell L, Zhang D, et al.Metabolism and molecular toxicology of isopreneJ.Chem Biol Interact, 2001, 135-136:223-238. 26Wistuba D, Weigand K, Peter H.Stereoselectivity of in vitro isoprene
38、metabolismJ.Chem.Res.Toxicol, 1994, 7 (3) :336-343. 27Thornton-Manning JR, Dahl AR, Bechtold WE, Disposition of butadiene monoepoxide and butadiene diepoxide in various tissues of rats and mice following a low-level inhalation exposure to 1, 3-butadieneJ.Carcinogenesis, 1995, 16 (8) :1723-1731. 28Cs
39、anady GA, Guengerich FP, Bond JA.Comparison of the biotransformation of 1, 3-butadiene and its metabolite, butadiene monoepoxide, by hepatic and pulmonary tissues from humans, rats and miceJ.Carcinogenesis, 1992, 13 (7) :1143-1153. 29Seidegard J, Ekstrom G, The role of human glutathione transferases
40、 and epoxide hydrolases in the metabolism of xenobioticsJ.Environ.Health Perspec, 1997, 105 (Suppl.4) :791-799. 30Oesch F.Mammalian epoxide hydrases:inducible enzymes catalyzing the inactivation of carcinogenic and cytotoxic metabolites derived from aromatic and olefinic compoundsJ.Xenobiotica, 1973
41、, 3 (5) :305-340. 31Munter T, Cottrell L, Ghai R, et al.The metabolism and molecular toxicology of chloropreneJ.Chemico-Biological Interactions, 2007, 166 (1-3) :323-331. 32Schmiedel G, Filser JG, Bolt HM.Rat liver microsomal transformation of ethene to oxirane in vitroJ.Toxicol Lett, 1983, 19 (3) :
42、293-297. 33Summer, KH, Greim H, Detoxification of chloroprene (2-chloro-1, 3-butadiene) with glutathione in the ratJ.Biochem Biophys Res Commun, 1980, 96 (2) :566-573. 34La Londe RT, Xie S.Glutathione and N-acetylcysteine inactivations of mutagenic 2 (5H) -furanones from the chlorination of humics i
43、n waterJ.Chem.Res.Toxicol, 1993, 6 (4) :445-451. 35Chien C, Kirollos KS, Linderman RJ, et al., -Unsaturated carbonyl compounds:inhibition of rat liver glutathione S-transferase isozymes and chemical reaction with reduced glutathioneJ.Biochim.Biophys.Acta, 1994, 1204 (2) :175-180. 36Porthogese PS, Ke
44、dziora GS, Larson DL, et al.Reactivity of glutathione with, -unsaturated ketone flavouring substancesJ.Food Chem.Toxicol, 1989, 27 (12) :773-776. 37Pearson PG, Soderlund EJ, Dybing E, et al.Metabolic activation of 1, 2-dibromo-3-chloropropane:evidence for the formation of reactive episulfoniumion in
45、termediatesJ.Biochemistry, 1990, 29 (20) :4971-4981. 38Peterson LA, Harris TM, Guengerich FP.Evidence for an episulfonium ion intermediate in the formation of S-2- (N7-guanyl) ethylglutathione in DNAJ.J Am Chem Soc, 1988, 110 (10) :3284-3291. 39Krause RJ, Kemper RA, Elfarra AA.Hydroxymethylvinyl ket
46、one:a reactive Michael acceptor formed by the oxidation of 3-butene-1, 2-diol by c DNA-expressed human cytochrome P450s and mouse, rat, and human liver microsomesJ.Chem Res Toxicol, 2001, 14 (12) :1590-1595. 40Faller TH, Csanady GA, Kreuzer PE, et al.Kinetics of propylene oxide metabolism in microso
47、mes and cytosol of different organs from mouse, rat, and humanJ.Toxicol.Appl.Pharmacol, 2001, 172 (1) :62-74. 41Raham Q, Abidi P, Afag F, et al.Glutathione redox system in oxidative lung injuryJ.Crit Rev Toxicol, 1999, 29 (6) :543-668. 42Munter T, Cottrell L, Hill S, et al.Identification of adducts
48、derived from reactions of (1-chloroethenyl) oxirane with nucleosides and calf thymus DNAJChem Res Toxicol, 2002, 15 (12) :1549-1560. 43Poirier MC.Chemical-induced DNA damage and human cancer riskJ.Nat Rev Cancer, 2004, 4 (8) :630-637. 44Sills RC, Hong HL, Melnick RL, et al.High frequency of codon61 K-ras AT transversions in lung and Harderian gland neoplasms of B6C3F1 mice exposed to chloroprene (2-chloro-1, 3-butadiene) for 2 years, and comparisons with the structurally related chemicals isoprene and 1, 3-butadieneJ.Carcinogenesis, 1999, 20 (4) :657-662. 45Sills RC, Hong H
