1、放射性口干症动物模型建立及颌下腺放射性组织损伤的生物学效应 李碧霞 陈倩怡 戴振晖 叶景云 王文静 陈珊 张嘉鹏 陈佩仪 广州中医药大学护理学院 广东省中医院大学城放疗科 摘 要： 背景:目前对于唾液腺的放射性损伤机制还未明确, 治疗和防护措施也处于探索阶段。目的:建立放射性口干症大鼠模型, 并观察 18 Gy 电子线照射后大鼠颌下腺组织损伤情况及唾液成分变化。方法:通过随机对照实验, 将 115 只 Wistar大鼠随机分成照射组和假照射组, 假照射组只麻醉不照射, 照射组麻醉后使用直线加速器一次性照射 18 Gy。将大鼠颌下腺部位暴露于照射区, 制备放射性口干症模型。记录造模后 21 d
2、内饮水量;分 1, 3, 7, 14, 21, 28, 35, 42 d 8 个时间点收集唾液、摘取颌下腺腺体, 测量唾液量、颌下腺指数, 对颌下腺切片行苏木精-伊红染色观察组织形态学变化。结果与结论: (1) 放射后 1-21 d 照射组大鼠每天平均饮水量为 (6.421.91) m L, 假照射组为 (4.821.20) m L, 差异有显著性意义 (P0.05) 。21 d 后 2 组饮水量差异无显著性意义;而 2 组唾液量比较, 差异有显著性意义 (P0.05) , 2 组食物量、体质量照射前后差异均无显著性意义。该结果结合 Konings 等28的研究可进行以下推论:21 d 前射线
3、对腺泡细胞膜造成急性损伤, 从而降低了腺泡细胞的水分泌功能, 唾液量减少, 因此照射组大鼠出现口干、口渴, 饮水量增加, 由于饮水增加缓解了口干, 所以前期唾液量减少相对不明显。21 d 后随着时间的增加, 照射组唾液腺损伤进行性加重, 腺泡细胞数量减少, 腺体体积萎缩, 严重影响唾液腺分泌功能, 因此唾液分泌显著降低, 照射后唾液量持续减。张艳丽等29通过实验发现照射组的大鼠唾液 Na 降低、K 先降低后升高、淀粉酶升高。Phillips 等30发现照射后大鼠唾液 Na 浓度降低, K、淀粉酶浓度在照射后快速的增加。研究还发现大鼠放射后唾液成分 Na、K、淀粉酶浓度在不同时期变化不同, 或增
4、加或减少、甚至不变31-32。本研究 Na、K、淀粉酶在1, 42 d 内呈现无规则变化, 如表 5 所示, 2 组比较后 3, 7 d 的 Na 浓度差异有显著性意义及 28 d 的 K 浓度、35 d 的淀粉酶的差异有显著性意义, 其余时间的结果或增加或减少, 差异无显著性意义, 因此唾液 Na、K、淀粉酶浓度不能作为建立放射性口干症动物模型结果的判断依据。颌下腺指数能反映腺体的变化情况, 指数增大, 提示腺体充血、水肿或增生肥大等;指数减小, 表示腺体萎缩和其他退行性变33。2 组颌下腺指数比较照射组均小于假照射组, 1, 21, 28, 35, 42 d 的差异具有显著性意义, 3,
5、7, 14 d 的颌下腺切片显示腺体炎性浸润、水肿情况较严重, 而腺体萎缩程度轻微, 因此腺体质量下降相对不明显, 但腺体总体质量在下降, 导致 2 组差异存在却无显著性意义。在 2 组体质量差异无显著意义的情况下, 腺体指数下降, 说明照射后大鼠颌下腺出现萎缩, 体积减少、质量下降。从总体看来, 颌下腺病理损伤程度呈进行性加重, 放射后 42 d 损伤最为严重。结论:综上所述, Wistar 大鼠采用直线加速器电子线一次性照射 18 Gy 后, 放射性口干症模型成功建立, 大鼠直观表现为饮水量增加, 唾液量减少, 病理切片显示颌下腺炎性浸润、腺体萎缩、核固缩等损伤情况在 42 d 内随时间的
6、增加呈进行性加重。直线加速器电子线具有剂量计算精确、放射过程中剂量均匀准确, 可实现靶区剂量足够大, 危及周围器官剂量足够小, 既能杀灭肿瘤细胞又能降低放疗的副作用, 是临床放疗的首选治疗方法, 但目前国内外缺乏对Wistar 大鼠使用直线加速器电子线建立放射性口干症模型的相关研究, 并且Wistar 大鼠具有性情温顺、繁殖力强, 自发性肿瘤发生率低的优势, 对实验研究的顺利进行有极大的优势。本实验首次采用直线加速器电子线 18 Gy 对Wistar 大鼠建立放射性口干症模型, 填补了目前的研究空缺, 本研究使用直线加速器电子线建立模型, 能更贴近临床, 为今后防治放射性口干症的研究提供一个更
7、为准确、适宜的放射性口干症动物模型。作者贡献:通讯作者与第一作者负责实验设计和评估, 全体作者负责实施。利益冲突:所有作者共同认可文章无相关利益冲突。伦理问题:实验方案经广州中医药大学动物实验伦理委员会批准。实验过程遵循了国际兽医学编辑协会关于动物伦理与福利的作者指南共识和本地及国家法规。实验动物在麻醉下进行所有的手术, 并尽一切努力最大限度地减少其疼痛、痛苦和死亡。文章的撰写与编辑修改后文章遵守了动物实验体内实验研究报告规范指南 (ARRIVE 指南) 。文章查重:文章出版前已经过 CNKI 反剽窃文献检测系统进行 3 次查重。文章外审:文章经国内小同行外审专家双盲外审, 符合本刊发稿宗旨。
8、作者声明:通讯作者对于研究和撰写的论文中出现的不端行为承担责任。论文中涉及的原始图片、数据 (包括计算机数据库) 记录及样本已按照有关规定保存、分享和销毁, 可接受核查。文章版权:文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议。开放获取声明:这是一篇开放获取文章, 文章出版前杂志已与全体作者授权人签署了版权相关协议。根据知识共享许可协议“署名-非商业性使用-相同方式共享 3.0”条款, 在合理引用的情况下, 允许他人以非商业性目的基于原文内容编辑、调整和扩展, 同时允许任何用户阅读、下载、拷贝、传递、打印、检索、超级链接该文献, 并为之建立索引, 用作软件的输入数据或其它任何合法用途。参考
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