1、生物化学与分子生物学专业毕业论文 精品论文 对虾白斑综合症病毒极早期基因的研究关键词：对虾 白斑综合症病毒 极早期基因 螯虾原代血细胞 对虾养殖业 基因表达摘要：对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WS
2、SV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良
3、好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。正文内容对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期
4、基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通
5、转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困
6、扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激
7、活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞
8、表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 W
9、SSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的
10、良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，
11、共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调
12、控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾
13、养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力
14、的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出
15、很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV
16、 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来
17、源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得
18、了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻
19、译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业
20、最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋
21、白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的
22、活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 27 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极
23、早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本
24、研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体，目前人们对它的侵染机制还缺乏了解。本研究在建立 WSSV 体外感染模型的基础上，应用蛋白质合成抑制剂来阻断病毒早期、后期基因的转录，然后通过基因芯片的方法筛选病毒的极早期基因，共获得了 2
25、7 个在极早期样品中特异表达的阳性探针，其中包括了 24 个候选的极早期基因(gt;100aa)。通过 RT-PCR 方法以及转录时相分析对这些候选基因进行验证，最终鉴定了 16 个 WSSV 的极早期基因(包括一个已知的极早期基因/e/)，其中 12 个基因在 WSSV 基因组中呈基因簇分布。进一步分析表明 WSSV 的极早期基因编码了至少 3 类调控因子：包括 4 个具有转录激活能力的核蛋白 WSV051，WSV069，WSV079，WSV100;1 个细胞核内的蛋白激酶 WSV083，以及 1 个定位于核膜与中心体上的泛素连接酶 E3，WSV249。这些极早期蛋白可能通转录调控，翻译后修
26、饰等方式对病毒的复制以及宿主细胞进行精密的调控，对它们的进一步研究将有助于揭示 WSSV 的感染机制，建立有效的防治方法。 此外，由于 DNA 病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源，本研究还对 WSSV 极早期基因的启动子区进行了克隆分析，并检验了它们启动基因转录的能力。结果表明wsv051，wsv069，wsv083，wsv108，wsv249 的启动子在在昆虫细胞表现出很强的活性；而 wsv249 的启动子还可以在螯虾原代细胞中启动基因表达。因此这些启动子在构建基因工程表达载体，特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电
27、脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X 飼?狛P? 燚?琯嫼 b?袍*甒?颙嫯?4)=r 宵?i?j 彺帖 B3 锝檡骹笪 yLrQ#?0 鯖 l 壛枒l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛枒 l 壛渓?擗#?“?# 綫 G 刿#K 芿$?7. 耟?Wa 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 皗 E|?pDb 癳$Fb 癳$Fb癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$Fb 癳$F?責鯻 0 橔 C,f 薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵秾腵薍秾腵%?秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍秾腵薍
