1、免疫学专业优秀论文 家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞抑制作用的实验研究关键词：家蝇胚胎细胞 抗菌肽 黑色素瘤细胞 髓样白血病细胞 抗癌活性摘要：目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用 PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和 K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS
2、，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。（4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞
3、的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和A375 细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细
4、胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起 K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论
5、：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。正文内容目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素
6、瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用 PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和 K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。（4）用 Annexin VFitc 凋亡检测
7、试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度
8、抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和A375 细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起 K562 细胞的 G0/G1 期
9、升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿
10、瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80
11、、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常
12、对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）
13、各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.
14、30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤
15、细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓
16、度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种
17、浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K5
18、62 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人
19、髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3
20、 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组
21、采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度
22、抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无
23、显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两
24、种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等
25、量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静
26、脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引
27、起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36
28、.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对
29、人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋
30、亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05）
31、。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0
32、/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞
33、抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成
34、40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的
35、影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强
36、。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别
37、为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有
38、效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对
39、上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检
40、测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高
41、。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A3
42、75 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无
43、血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，
44、正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）
45、在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋
46、亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞的有效杀伤率分别为 27.30%、80.48%和 83.33%；对人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率分别为 44.00%、84.78%和 36.37%。 结论：（1）家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌具有抑菌活性。 （2）家蝇胚胎细胞抗菌肽对人黑色素瘤细胞 A375 和人髓样白血病细胞 K562 两种肿瘤细胞均具有抑制作用，而对正常人脐静脉血管内皮细胞无抑制作用。 （3）家蝇胚胎细胞抗菌肽对肿瘤细胞的抑制作用随着药物剂量的增加和作用时间的延长而增强。 （4）家蝇胚胎细胞抗菌肽对 A375 和 K
47、562 两种肿瘤细胞的抑制机理可能主要是阻滞细胞周期的正常发育。 （5）家蝇胚胎细胞抗菌肽与常用的化疗药物相比，优点在于能有效杀伤肿瘤细胞，但又不损伤正常人体细胞。目的：用脂多糖（LPS）刺激家蝇胚胎细胞产生抗菌肽，提取抗菌肽，研究所提取的抗菌肽对人黑色素瘤细胞（A375）和人髓样白血病细胞（K562）的抑制作用。 方法：（1）应用含 20mg/L 脂多糖的无血清 M3 培养基作用于处于对数生长期的家蝇胚胎细胞 16h，提取上清液中的抗菌肽。 （2）将提取的抗菌肽用PBS 配制成 40、80、160、320、640g/mL 五个浓度组，分别作 A375 细胞和K562 细胞的 MTT 实验，对
48、照组采用等量 PBS，观察抗菌肽对两种肿瘤细胞的抑制作用。同时以人脐静脉血管内皮细胞作为正常对照组。 （3）用 MTT 法对上述五种浓度作 A375 细胞和 K562 细胞的生长曲线，正常组采用等量培养基。 （4）用 Annexin VFitc 凋亡检测试剂盒测定五种浓度的抗菌肽是否引起 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡及其随浓度变化时凋亡率的变化，正常对照组采用等量PBS 和培养基。 （5）流式细胞仪检测五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞细胞周期及凋亡的影响，正常对照组采用等量 PBS 和培养基。 （6）流式细胞仪测定高三尖杉酯碱和家蝇胚胎细胞抗菌肽对 K562 细
49、胞和人脐静脉血管内皮细胞的有效杀伤率。 结果：（1）抑菌实验显示家蝇胚胎细胞抗菌肽对大肠杆菌有抑菌活性。 （2）MTT 法检测显示五种浓度抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞均具有抑制作用，与正常对照组相比，差异有显著性（Plt;0.05） 。五种浓度抗菌肽对人脐静脉血管内皮细胞均无抑制作用，与正常对照组相比，差异无显著性（Pgt;0.05） 。 （3）在不同浓度抗菌肽作用下，K562 细胞和 A375细胞的生长受到明显的抑制，药物浓度越高、作用时间越长，对细胞的抑制作用越强。 （4）各浓度组抗菌肽对 A375 细胞和 K562 细胞的早期凋亡率无显著性差异（Pgt;0.05） 。 （5）抗菌肽引起 A375 细胞的 G2/M 期升高，高浓度组（gt;160g/mL）可引起 G0/G1 期降低，PI 明显升高。对 K562 细胞 S 期的影响与正常对照组相比差异有显著性（Plt;0.05） 。各浓度组均可引起K562 细胞的 G0/G1 期升高，细胞增殖指数 PI 降低。与正常对照组相比，各浓度组引起的 A375 细胞和 K562 细胞细胞凋亡率差异无显著性（Pgt;0.05） 。（6）对照组、高三尖杉酯碱组及家蝇胚胎细胞抗菌肽组对 K562 细胞
