基质细胞衍生因子-1对脑梗死后移植的间质干细胞迁移的影响.doc

1、神经外科学专业优秀论文 基质细胞衍生因子-1 对脑梗死后移植的间质干细胞迁移的影响关键词：骨髓间质干细胞 大脑中动脉栓塞 静脉移植 基质细胞衍生因子-1 体外细胞迁移 神经功能摘要：目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的 rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断

2、2 小时后再灌注，再灌注后 24h经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照

3、组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X

4、100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞

5、向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。正文内容目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 m

6、NSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种

7、聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结

8、论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs

9、在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观

10、察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志

11、物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢

12、复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对

13、rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs

14、 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs

15、在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗

16、塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型

17、，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）

18、表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4

19、，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这

20、种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、

21、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区

22、聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR

23、4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，

24、以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况

25、。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化

26、表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑

27、梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨

28、 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF

29、1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植

30、的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并

31、更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞

32、（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor

33、4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面

34、表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化

35、作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植

36、后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑

37、梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rMSCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基

38、因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。目的： 观察经静脉移植骨髓间质干细胞（MSCs）治疗脑梗塞时，神经功能

39、缺损的恢复情况，以及 MSCs 在脑梗塞灶的分布、迁移与分化情况。观察基质细胞衍生因子1（SDF1）在体内外对大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）的趋化诱导作用，探讨 SDF1 对 rMSCs 迁移影响的可能机制，为实现临床上对移植的rMSCs 进行调控提供理论与实验依据。 方法： 建立线栓法大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，大脑中动脉血流阻断 2 小时后再灌注，再灌注后 24h 经尾静脉将标记的大鼠骨髓间质干细胞（rMSCs）植入脑梗塞鼠体内，于移植后24h、1W、2W 时采用 mNSS 评分法对动物神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组化方法于移植后 1W、2W 时检测移植细胞在脑内存活

40、、迁移及分化情况。细胞化学染色观察 rMSCs 体外培养时的分化情况。应用体外细胞迁移实验及大鼠脑梗塞模型体内移植，观察在施用和不施用抗 SDF1 抗体时，SDF1 对rMSCs 迁移的影响。流式细胞术与 RTPCR 检测 rMSCs 的 CXC 趋化因子受体4（CXC chemokine receptor4，CXCR4）表达。 结果： 1与对照组相比，移植组大鼠在移植后观察的 2 周内神经功能改善明显（plt;0001） 。 2可观察到移植细胞在脑梗塞区及其周边区聚集并存活，这种聚集于第 2 周更为明显。在脑梗塞区及其周边区有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物，而在体外同时程培养的 rM

41、SCs 未见分化表达类似表面标志物。 3体外实验示在 SDF1 存在时，rMSCs 迁移活跃，应用抗体封闭 CXCR4 受体后，这种迁移现象显著减弱。 4体内移植的 rMSCs 在脑内主要聚集在脑梗死灶及其周边区，但在封闭 CXCR4 受体后，这种聚集现象大为减弱。 5流式细胞术示仅小部分 rMSCs 表面表达 CXCR4，但经 Triton X100 处理后，表达 CXCR4 的rMSCs 增加。RTPCR 检测显示 rMSCs 的 Cxcr4 基因表达 CXCR4mRNA。 结论: 1rMSCs 经静脉移植后的 2 周观察表明移植的 rMSCs 可向宿主脑内病灶迁移、存活、并分化表达神经细

42、胞表型，有促进脑梗塞后神经功能恢复的作用。 2经静脉路移植 rMSCs 不仅可达到治疗目的，而且可以避免直接穿刺移植带来的脑组织损伤，植入的 rMSCs 能迁移并更好地分布在脑梗塞灶。 3SDF1可通过 CXCR4 受体对 rMSCs 起趋化作用，植入的 rMSCs 能聚集分布在脑梗塞灶及其周边区与这种趋化作用有关。利用这种趋化作用可望调控干细胞向靶组织的趋化聚集量，达到治疗目的。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还

43、可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x 滌甸?*U 躆 跦?l, 墀 VGi?o 嫅#4K 錶 c#x 刔 彟 2Z 皙笜?D 剧珞 H 鏋 Kx 時 k,褝仆? 稀?i 攸闥-) 荮vJ 釔絓|?殢 D 蘰厣?籶(柶胊?07 姻Rl 遜 ee 醳 B?苒?甊袝 t 弟l?%G 趓毘 N 蒖與叚繜羇坯嵎憛?U?Xd* 蛥?-.臟兄+鮶 m4嵸/E 厤U 閄 r塎偨匰忓tQL 綹 eb?抔搉 ok 怊 J?l?庮 蔘?唍*舶裤爞 K 誵Xr 蛈翏磾寚缳 nE 駔殞梕 壦 e 櫫蹴友搇6 碪近躍邀 8 顪?zFi?U 钮 嬧撯暼坻7/?W?3RQ 碚螅 T 憚磴炬 B- 垥 n 國 0fw 丮“eI?a揦(?7 鳁?H?弋睟栴?霽 N 濎嬄! 盯 鼴蝔 4sxr?溣?檝皞咃 hi#?攊(?v 擗谂馿鏤刊 x 偨棆鯍抰Lyy|y 箲丽膈淢 m7 汍衂法瀶?鴫 C?Q 貖 澔?wC(?9m.Ek?腅僼碓 靔 奲?D| 疑維 d袣箈 Q| 榉慓採紤婏(鞄-h-蜪7I冑?匨+蘮.-懸 6 鶚?蚧?铒鷈?叛牪?蹾 rR?*t? 檸?籕