1、内科学(血液病学)专业毕业论文 精品论文 rhG-CSF 通过 LFA-1/ICAM-1信号途径影响 Th1/Th2分化的实验研究关键词：重组人粒细胞集落刺激因子 淋巴细胞功能相关抗原 细胞间黏附分子-1 协同刺激信号摘要：目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/
2、Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD2
3、5、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周
4、血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋
5、巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。正文内容目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercel
6、lular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通
7、过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的
8、表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+IC
9、AM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺
10、激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分
11、选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激
12、信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显
13、下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T
14、淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，
15、为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺
16、激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM
17、-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员
18、后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因
19、外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3
20、)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 mi
21、niMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后
22、CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte funct
23、ional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+
24、T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-P
25、BSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激
26、信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动
27、员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGV
28、HD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBS
29、CT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞
30、表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM
31、-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/T
32、h2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25
33、、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血
34、 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴
35、细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular
36、 adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA
37、-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，
38、观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺
39、激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(r
40、hG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 allo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离
41、纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介
42、导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2
43、)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的
44、分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。目的：研究重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)通过干预淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte functional antigen-1，LFA-1)/细胞间黏附分子1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)协同刺激信号途径对异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)供者 CD4+T细胞活化，增殖以及向Th1/Th2方向分化的影响，探讨 allo-PBSCT过程中 T细胞免疫耐受发生的机制，为提高 a
45、llo-PBSCT成功率、降低 allo-PBSCT后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率和严重程度提供新的方法。 方法：(1)采用 miniMACS磁珠分选系统分离纯化健康人以及 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞；(2)建立 0KT3(CD3单克隆抗体，0KT3)、ICAM-1 通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径体外激活 CD4+T淋巴细胞的体系和方法；(3)流式细胞术检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞表面 CD25、CD54、CD69 等系列活化标志的变化，观察 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径
46、介导的 CD4+T淋巴细胞活化能力的变化；(4)MTT 法检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力的变化；(5)通过 RT-PCR和实时定量 PCR检测 allo-PBSCT供者动员前后外周血 CD4+T淋巴细胞 IFN-、IL-4 mRNA 的表达变化，观察 rhG-CSF动员后供者 CD4+T细胞的分化方向变化。 结果：通过 miniMACS磁珠分选系统获得 allo-PBSCT供者 rhG-CSF动员前后高纯度外周血 CD4+T淋巴细胞。体外用 0KT3+ ICAM-1通过 LFA-1/ICAM-1协同刺
47、激信号途径激活 CD4+T淋巴细胞，(1)rhG-CSF 动员后 CD4+T细胞表面CD25、CD54、CD69 等系列活化标志表达较 rhG-CSF动员前明显下降；(2)rhG-CSF动员后 CD4+T淋巴细胞通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径介导的增殖能力较 rhG-CSF动员前下降；(3)在未用 0KT3+ICAM-1刺激时，动员前后 CD4+T淋巴细胞不表达或弱表达 IL-4 mRNA；动员前后 CD4+T淋巴细胞均表达 IFN- mRNA。(4)rhG-CSF 动员后 CD4+T淋巴细胞 IFN-mRNA 的表达较 rhG-CSF动员前下降；rhG-CSF 动员后 IL-
48、4 mRNA的表达较动员前升高。 结论：rhG-CSF通过 LFA-1/ICAM-1协同刺激信号途径抑制 CD4+T淋巴细胞活化、增殖，并进一步影响 CD4+T淋巴细胞的分化方向。LFA-1/ICAM-1 协同刺激信号通路受损可能是 rhG-CSF动员后 CD4+T细胞偏向 Th2方向分化的机制之一。特别提醒 ：正文内容由 PDF文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。“垐垯櫃 换烫梯葺铑?endstreamendobj2x滌?U 閩 AZ箾 FTP 鈦X飼
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