1、基础兽医学专业优秀论文 两种肉鸡胚胎期脂肪代谢及 DHEA 调控研究关键词：胚胎发育 肉鸡 基因表达 母体效应 脂肪代谢摘要：本文以三黄肉鸡和 AA 肉鸡为实验对象，研究 AA 肉鸡和三黄肉鸡胚胎期脂肪代谢及脂肪代谢关键基因在肝脏中表达水平的发育性变化，探讨脂肪型肉鸡和瘦肉型肉鸡胚胎期脂肪代谢的异同；在此基础上通过母体营养效应及种鸡饲养效应对后代胚胎期三黄肉鸡脂肪代谢进行调控，探索母体效应对后代胚胎期肉鸡脂肪代谢及肝脏脂肪代谢关键因子表达水平的影响程度；孵化前向 AA 肉鸡种蛋中导入 DHEA，以探究其对胚胎期肉鸡脂肪代谢的影响及调控机理，为调控肉鸡脂肪代谢提供依据。 1.胚胎期肉鸡脂肪代谢及
2、胚肝脂肪代谢关键因子的发育性变化及品种特点 选用生长速度快，腹部脂肪沉积多的 Arbor Acres肉鸡(简称 AA 肉鸡)和生长速度慢，脂肪分布均匀的三黄肉鸡(简称 SH 肉鸡)为实验动物。分别取 9、14、19 胚龄和出壳时的肝脏及 14、19 胚龄和出壳时的血液。试剂盒测定血清和肝脏中 TG 含量，血清 TC 含量；RIA 法检测血清和肝脏中激素含量；RT-PCR 定量检测胚胎期肉鸡肝脏脂肪合成代谢关键因子ACC、EAS、ME、SREBP-1c、ApoB 及脂肪分解关键因子 CPT-1、LPL 和 PPARa mRNA 水平。结果显示，胚重和肝重随着胚胎发育，呈显著增加；血清 TG 含量
3、减少，TC 增加，肝脏 TG 含量 14 胚龄时陡然上升；胚胎期胰岛素和胰高血糖素共同调节脂类代谢，出壳后则以胰高血糖素调节为主；肝脏Tlt;,3gt;水平随鸡胚发育呈上升趋势，Tlt;,4gt;呈下降趋势。脂肪型肉鸡胚重、肝重、肝脏脂肪含量均大于瘦肉型肉鸡。胚胎期 AA肉鸡脂肪酸合成关键酶 ACC 和 FAS 基因表达水平启动早于三黄肉鸡，AA 肉鸡表达水平最大峰值高于三黄肉鸡；胚胎期两种肉鸡肝脏 ACC 基因在发育早期就启动表达，而 FAS 基因在出壳前才表达，且 ACCc 基因表达水平最大时 FAS 最小，ACC 基因表达水平最小时 FAS 最大。胚胎期肝脏 ME 和 ApoB100 基
4、因表达水平两种肉鸡间无显著差异。胚胎期肉鸡肝脏 SREBP-1c 基因与 FAS 基因表达水平相关性较高，且在 AA 肉鸡表现更为明显。肝脏 CPT-I 和 PPARa 基因出壳时 AA 肉鸡显著高于三黄肉鸡；LPL 基因出壳时肝脏不表达或表达很少。提示肉鸡肝脏脂肪代谢关键酶基因表达水平在胚胎期呈发育时序性规律；腹部脂肪沉积较多的AA 肉鸡肝脏脂肪代谢关键基因的表达水平大于脂肪分布均匀的三黄肉鸡，胚胎期肉鸡脂肪代谢存在品种差异。 2.母体效应对后代胚胎期脂肪代谢及肝脏脂肪代谢关键因子基因表达水平的影响 1) 母体营养对后代胚胎期脂肪代谢及肝脏脂肪代谢关键因子基因表达水平的影响 挑选 40 周龄
5、体况良好的产蛋三黄肉种鸡，随机分为两组，对照组饲喂三黄肉种鸡正常日粮，实验组饲喂 AA 肉种鸡日粮。对照组和实验组日粮的差别在于蛋白质含量从 20下调到 18，其它营养素保持一致。分别取 9、14 和 19 胚龄及刚出壳时的肝脏和 14、19 胚龄及刚出壳时的血样。试剂盒测定血清和肝脏中 TG 含量，血清 TC 含量；RIA 法检测血清中激素含量；以 sYBR 为染料，-actin 为内参，2lt;#39;-CTgt;方法荧光定量 PCR 检测后代胚胎期肝脏脂肪合成关键因子ACC、FAS、ME、SREBP-1c、ApoB 和脂肪分解关键因子 CPT-1 和 PPARa mRNA 表达。结果表明
6、，实验组和对照组胚重、肝重无显著差异；实验组和对照组血清及肝脏生化参数无显著差异；实验组和对照组血清激素含量无显著差异。实验组和对照组后代胚胎期肝脏 ACC、FAS、ME、SREBP-1c、ApoB 基因表达水平无显著差异；实验组和对照组后代胚胎期肝脏 CPT-1 和 PPARa 基因表达水平无显著差异。说明在不影响生产性能的前提下，微调肉种鸡蛋白水平，以节约生产成本，对其后代生长发育及脂肪代谢无显著影响。 2)母体饲养方式对后代胚胎期脂肪代谢及肝脏脂肪代谢关键因子基因表达水平的影响 挑选 40 周龄体况良好的产蛋三黄肉种鸡，随机分为两组，对照组笼养，实验组平养，饲喂相同的肉种鸡日粮。分别取
7、9、14、19 胚龄和出壳时的肝脏及 14、19 胚龄及出壳时的血样。试剂盒测定血清和肝脏中 TG 含量，血清 TC 和 NEFA 含量；RIA 法检测血清中激素含量；以 sYBR 为染料，-actin 为内参，2lt;#39;CTgt;方法荧光定量 PCR 检测后代胚胎期肝脏脂肪合成关键因子ACC、FAS、ME、SREBP-1c、ApoB 和脂肪分解关键因子 CPT-1 和 PPARa mRNA 水平。结果表明，实验组和对照组 9、14 和 19 胚龄时，胚重、肝重无显著差异；出壳时，实验组显著小于对照组。实验组和对照组血清和肝脏 TG、血清TC、NEFA 含量在 9、14 和 19 胚龄时
8、无显著差异；而出壳时，实验组显著小于对照组。实验组和对照组血清胰岛素、胰高血糖素在鸡胚发育整个过程中均无显著差异。实验组和对照组瘦素含量在 9、14 和 19 胚龄时无显著差异；出壳时，实验组显著小于对照组。9 和 14 胚龄时，实验组和对照组后代胚胎期肝脏ACC、FAS、ME、SREBP-1c、ApoB、CPT-1 和 PPARa 基因表达水平无显著差异；19 胚龄时，实验组后代胚胎期肝脏 ME 基因表达水平显著小于对照组，实验组和对照组后代胚胎期肝脏 ACC、FAIS、SREBP-1C、ApoB、CPT-1 和 PPARa 基因表达水平则无显著差异；出壳时，实验组胚胎期肝脏 FAS、SRE
9、BP-1c、CPT-1 基因表达水平显著小于对照组，实验组后代胚胎期肝脏 ACC、PPARa 和 apoB 基因表达水平与对照组无显著差异。由此提示与笼养肉种鸡相比，平养肉种鸡降低其后代胚胎期脂肪代谢，降低其后代出壳时的脂肪沉积。说明可以通过改变肉种鸡饲养方式来调控其后代胚胎期脂肪代谢。 3.DHEA 对胚胎期脂肪代谢调控机理研究 挑选无破壳、蛋重相近的 AA 肉鸡种蛋，随机分为两组，对照组导入 50L 溶剂(DMSO)，实验组导入含 50mg/kg 蛋重的 DHEA，其溶解于 50L DMSO 溶剂中。分别取 9、14、19 胚龄和刚出壳时的肝脏及 14、19 胚龄和出壳时的血样。试剂盒测定
10、血清和肝脏中 TG 含量，血清 TC 含量；RIA 法检测血清中激素含量；以 SYBR 为染料，-actin 为内参，2lt;#39;-CTgt;方法荧光定量 PCR 检测胚胎期肝脏 ACC、FAS、ME、SREBP-1c、ApoB、CPT-1 和 PPARa 基因表达水平。结果表明，实验组胚重和肝重在整个发育过程中略小于对照组，但无显著差异。实验组肝脏血清 TG 含量在14、19 胚龄和出壳时显著小于对照组。实验组血清 TG 含量在 14 胚龄和出壳时显著小于对照组。实验组血清 TC 含量出壳时显著大于对照组。出壳时，实验组血清 LPL 活性显著大于对照组。实验组和对照组血清胰岛素、瘦素和胰
11、高血糖素在 19 胚龄和出壳时均无显著差异。实验组肝脏 ACC 基因表达水平在 19 胚龄时显著大于对照组；实验组肝脏 ACC 基因表达水平出壳时显著小于对照组。在9、14 和 19 胚龄时，实验组和对照组肝脏 FAS 基因表达水平基本保持一致，维持在较低水平；而出壳时，实验组极显著地小于对照组。实验组肝脏 ME 基因表达水平 14、19 胚龄和出壳时显著小于对照组。在 9、14 和 19 胚龄时，实验组和对照组肝脏 SREBP-1c 基因表达水平保持一致，维持在较低水平；而出壳时，实验组极显著地小于对照组。实验组 ApoB 基因表达水平在 9、14 胚龄和出壳时显著小于对照组。实验组肝脏 C
12、PT-1 基因表达水平在 14、19 胚龄和出壳时显著小于对照组。实验组肝脏 PPARa 基因表达水平在 14、19 胚龄和出壳时显著小于对照组。由此可见，DHEA 的作用表现为，降低胚胎期肉鸡体重、肝重及日增重，降低胚胎期肉鸡肝脏和血清 TG 含量，增加血液 LPL 活性，从而降低脂肪合成代谢，增强脂肪分解代谢。其调控机理是，通过下调肝脏脂肪酸合成及转运关键基因表达水平，减少肝脏脂肪的合成及向肝外组织的转运；同时增强脂肪细胞内脂肪分解代谢，从而抑制脂肪在脂肪组织的沉积。正文内容本文以三黄肉鸡和 AA 肉鸡为实验对象，研究 AA 肉鸡和三黄肉鸡胚胎期脂肪代谢及脂肪代谢关键基因在肝脏中表达水平的
13、发育性变化，探讨脂肪型肉鸡和瘦肉型肉鸡胚胎期脂肪代谢的异同；在此基础上通过母体营养效应及种鸡饲养效应对后代胚胎期三黄肉鸡脂肪代谢进行调控，探索母体效应对后代胚胎期肉鸡脂肪代谢及肝脏脂肪代谢关键因子表达水平的影响程度；孵化前向 AA 肉鸡种蛋中导入 DHEA，以探究其对胚胎期肉鸡脂肪代谢的影响及调控机理，为调控肉鸡脂肪代谢提供依据。 1.胚胎期肉鸡脂肪代谢及胚肝脂肪代谢关键因子的发育性变化及品种特点 选用生长速度快，腹部脂肪沉积多的 Arbor Acres 肉鸡(简称 AA 肉鸡)和生长速度慢，脂肪分布均匀的三黄肉鸡(简称 SH 肉鸡)为实验动物。分别取 9、14、19 胚龄和出壳时的肝脏及 1
14、4、19 胚龄和出壳时的血液。试剂盒测定血清和肝脏中 TG 含量，血清 TC 含量；RIA 法检测血清和肝脏中激素含量；RT-PCR 定量检测胚胎期肉鸡肝脏脂肪合成代谢关键因子ACC、EAS、ME、SREBP-1c、ApoB 及脂肪分解关键因子 CPT-1、LPL 和 PPARa mRNA 水平。结果显示，胚重和肝重随着胚胎发育，呈显著增加；血清 TG 含量减少，TC 增加，肝脏 TG 含量 14 胚龄时陡然上升；胚胎期胰岛素和胰高血糖素共同调节脂类代谢，出壳后则以胰高血糖素调节为主；肝脏Tlt;,3gt特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，
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