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上颌骨经缝牵引组织再生的基础研究.doc

上传人:cjc2202537 文档编号:1511668 上传时间:2018-07-24 格式:DOC 页数:47 大小:74.33KB
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1、口腔临床医学专业毕业论文 精品论文 上颌骨经缝牵引组织再生的基础研究关键词:上颌发育不足 缝牵引成骨 内置式微型镍钛合金牵引器 腭横缝 碱性磷酸酶 骨形成蛋白 免疫组织化学摘要:上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种

2、新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药

3、肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus 显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以 C 组最明显。3 种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨

4、前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 12 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见

5、有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织

6、中碱性磷酸酶含量。 结果:各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组:14.014.84 U/gprot;B 组:14.24.78U/gprot:C 组:15.6310.22U/gprot;空白对照组:7.470.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。

7、 方法:标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组织化学研究,Olympus 显微镜观察摄片,Image-pro plus 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变

8、,导致了骨形成蛋白-2、-4 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。正文内容上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种新的上颌牵引方法的可行性

9、及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。方法:以 34 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取

10、腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus 显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以 C 组最明显。3 种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有

11、新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 12 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出

12、现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。 结果:各

13、实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组:14.014.84 U/gprot;B 组:14.24.78U/gprot:C 组:15.6310.22U/gprot;空白对照组:7.470.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。 方法:标本取用第一部分的石

14、蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组织化学研究,Olympus 显微镜观察摄片,Image-pro plus 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4

15、 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型

16、镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。方法:以 34 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼

17、猩红染色,Olympus 显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以 C 组最明显。3 种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝

18、牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 12 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见

19、大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。 结果:各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组

20、:14.014.84 U/gprot;B 组:14.24.78U/gprot:C 组:15.6310.22U/gprot;空白对照组:7.470.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。 方法:标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组

21、织化学研究,Olympus 显微镜观察摄片,Image-pro plus 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表

22、达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌

23、缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。方法:以 34 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus 显微镜及暗

24、视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以 C 组最明显。3 种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵

25、引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 12 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面

26、内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。 结果:各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组:14.014.84 U/gprot

27、;B 组:14.24.78U/gprot:C 组:15.6310.22U/gprot;空白对照组:7.470.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。 方法:标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组织化学研究,Olympus 显微镜观

28、察摄片,Image-pro plus 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入

29、外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨

30、复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。方法:以 34 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus 显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察

31、。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以 C 组最明显。3 种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影

32、响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 12 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,

33、胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。 结果:各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组:14.014.84 U/gprot;B 组:14.24.78U/gpr

34、ot:C 组:15.6310.22U/gprot;空白对照组:7.470.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。 方法:标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组织化学研究,Olympus 显微镜观察摄片,Image-pro plus

35、 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不

36、是牵引期。上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同

37、牵引力对腭横缝组织影响。方法:以 34 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus 显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以

38、 C 组最明显。3 种牵引力组织学表现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬

39、 12 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见

40、新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。 结果:各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组:14.014.84 U/gprot;B 组:14.24.78U/gprot:C 组:15.6310.22U

41、/gprot;空白对照组:7.470.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。 方法:标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组织化学研究,Olympus 显微镜观察摄片,Image-pro plus 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光

42、密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。上颌面中部发育不足是口腔颌

43、面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决上述问题,本研究以生长期犬为动物模型,采用微型镍钛合金牵引器,经腭横缝和额上颌缝牵引,试图了解不同牵引力作用下缝组织再生情况。 第一部分、幼犬上颌骨经缝牵引的组织学研究 目的:为探索一种新的上颌牵引方法的可行性及组织学改变,本研究拟采用内置式微型镍钛合金牵引器,对幼犬腭横缝及额上颌缝行持续牵引来扩张腭横缝,前移上颌骨复合体,以组织学各方面指标来探讨不同牵引力对腭横缝组织影响。方法:以 3

44、4 月龄健康杂种犬 24 只为实验动物,随机分为 4 组,实验组分A、B、C 组,每组 6 只,空白对照组 6 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组),1200g(B 组)、1500g(C 组)。术后定期拍摄 X 片,以观察上颌骨牵引位移情况。于牵引 5、10、15、20、30、40 天过量麻药肌注处死各组动物中一只,切取腭横缝组织,行 HE、甲苯胺蓝及天狼猩红染色,Olympus 显微镜及暗视野偏振光显微镜下对其进行组织学观察。 结果:实验组上颌骨被成功前徙,以 C 组最明显。3 种牵引力组织学表

45、现无明显差异,初期腭横缝逐渐增宽,骨突起拉长,成骨细胞数量增多,呈多层排列,成纤维细胞增生活跃,胶原纤维排列紊乱,组织间有少量血细胞渗出。后期骨缝接近正常宽度,胶原纤维排列整齐。天狼猩红染色见牵引期内型胶原增多明显,、型胶原逐渐减少。甲苯胺蓝染色未见有软骨细胞及软骨细胞团出现。 结论:对于上颌发育不足畸形,缝牵引是一种可行的治疗方法。在 1500g 力范围内牵引力越大,骨缝扩张越快,上颌骨前移越明显。牵引期缝组织内有新骨组织形成。 第二部分、幼犬腭横缝牵引的超微结构观察 目的:了解不同牵引力对幼犬腭横缝组织内各种超微结构影响。 方法:以 34 月龄健康杂种犬 12 只为实验动物,随机分为 4

46、组,实验组分 A、B、C 组,每组 3 只,空白对照组 3 只。实验组在两侧腭横缝及额上颌缝安置内置式微型镍钛合金牵引器,对照组不处理。设计各牵引器作用于上颌骨缝初始牵引力分别为:900g(A 组)、1200g(B 组)、1500g(C 组)。于牵引 10、20、40 天处死各组动物一只,取一块腭横缝组织,修整成 1mm3,常规制作透射电镜标本,行超微结构观察。 结果:实验各组镜下表现未见有明显区别,牵引初期缝组织出现断裂间隙,胶原纤维排列松散,后期见大量增生活跃的成骨细胞,内含扩张粗面内质网,网腔内充满低电子密度絮状物,胶原纤维排列紧密、整齐。40 天可见新生骨基质。 结论:在牵引力作用下,

47、初期骨缝组织出现轻微损伤性改变,继而表现出新骨组织再生过程。镜下未见软骨细胞。 第三部分、幼犬腭缝牵引单位骨量碱性磷酸酶变化研究 目的:检测 3 种牵引力对幼犬腭横缝区骨碱性磷酸酶影响,定量分析成骨细胞活性。 方法:动物分组及手术植入牵引器同第一部分,分别于牵引 5、10、15、20、30、40 天切取一侧腭横缝组织,剔除软组织后匀桨,4000rpm,4离心,分光光度仪半定量分析腭横缝组织中碱性磷酸酶含量。 结果:各实验组碱性磷酸酶含量增高明显,A 组:14.014.84 U/gprot;B 组:14.24.78U/gprot:C 组:15.6310.22U/gprot;空白对照组:7.470

48、.09U/gprot。统计分析显示差异有显著性(p0.01)。 结论:牵引力可有效提高碱性磷酸酶含量,增强成骨细胞活性。其中以 C 组最为显著,但牵引后期碱性磷酸酶含量下降幅度也最大。我们推测既可有效扩张腭横缝又不损伤周围组织的较佳作用力是 1200g 力。 第四部分、幼犬腭横缝牵引 BMP-2、-4、-7 的表达 目的:了解缝牵引成骨中不同牵引力作用下骨形成蛋白-2、-4、-7 的表达。 方法:标本取用第一部分的石蜡切片标本,采用 SABC法作免疫组织化学研究,Olympus 显微镜观察摄片,Image-pro plus 软件测量单位面积阳性染色细胞累积光密度值(10D)。 结果:骨形成蛋白

49、-2、-4、-7阳性染色呈棕黄色,分布在细胞胞浆内,主要定位于缝两侧骨基质边缘的成骨细胞、间充质细胞、成纤维细胞、埋入新骨基质中的骨细胞。牵引初期骨形成蛋白-2、-4 表达水平增强,以 C 组最明显,B 组次之,A 组最弱。10 天后开始下降,超过 15 天 A、B 两组阳性表达再次升高,C 组 30 天后略有回升。牵引期BMP-7 呈下降趋势。 结论:牵引力所造成腭横缝周力学环境发生改变,导致了骨形成蛋白-2、-4 表达增高。骨形成蛋白-2、-4 表达水平与牵引区的增殖特性相一致。加入外源性生长因子时期最好在保持期,而不是牵引期。上颌面中部发育不足是口腔颌面外科一种常见畸形,常见的治疗方法有正畸牵引、正颌外科、牵引成骨等。近来缝牵引以其微创、风险小、可早期治疗上颌面中部发育不足而得到了大多数学者认可。但对于缝牵引的最佳作用力及缝牵引的组织再生方式仍不清楚。为解决

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