1、微生物与生化药学专业优秀论文 XBP1 过量表达对重组 CHO 细胞胞内 HBsAg 积累的影响关键词：CHO 细胞 HBsAg XBP1 内质网应激反应 二硫键含量摘要：本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBs
2、Ag 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了 CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得 56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个
3、基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO 增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。正文内容本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白
4、的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了 CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得 56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下HBsAg 的胞内积累情况，发现没有
5、明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO 增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是
6、对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单
7、克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO
8、于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通
9、过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用
10、下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1
11、序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通
12、过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变
13、化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志
14、内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细
15、胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况
16、，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累
17、，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XB
18、P1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5
19、DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO
20、细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DM
21、SO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的
22、XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应
23、；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。本实验室前期研究工作中发现，添加 1.5DMSO 于重组 CHO 细胞的培养环境中使 HBsAg 的产量提高了 80以上，但同时造成了胞内 HBsAg 的大量积累，其含量是对照组的 9 倍以上。本文将 XBP1 基因转入表达 HBsAg 的 CHO 细胞中，希望利用 XBP1 改善细胞对重组蛋白的翻译后加工能力，解决 HBsAg 的胞内积累问题。并且通过考察细胞有无发生内质网应激反应，以及蛋白
24、二硫键的变化，分析了胞内 HBsAg 积累部位以及积累原因。 本文通过 RT-PCR 的方法，成功获得了CHO 细胞中的 XBP1 序列，然后构建了表达质粒 pcDNA3.1-XBP1(s)。应用阳离子脂质体转染技术，将质粒成功转染至 CHO 细胞中，通过 G418 抗药筛选，共获得56 株克隆。分别用 RT-PCR 及 real-time PCR 进行检测，XBP1 在单克隆细胞株中的表达量分别提高了 2-9 倍不等。但分析这些克隆在 1.5DMSO 下 HBsAg 的胞内积累情况，发现没有明显改善。 本文进一步发现在细胞发生内质网应激反应的情况下，XBP1 能够促进 HBsAg 分泌，而通
25、过检测标志内质网应激反应的两个基因的表达情况，发现 DMSO 作用下 CHO-HBsAg 细胞并未发生明显的内质网应激反应；此外，通过测定 DMSO 作用下总蛋白中二硫键含量变化，发现 DMSO增加了蛋白中二硫键的含量。由此初步可以确定在 DMSO 作用下，HBsAg 能够顺利折叠，顺利离开内质网，蛋白的积累发生在其它部位。特别提醒 ：正文内容由 PDF 文件转码生成，如您电脑未有相应转换码，则无法显示正文内容，请您下载相应软件，下载地址为 http:/ 。如还不能显示，可以联系我 q q 1627550258 ，提供原格式文档。我们还可提供代笔服务，价格优惠，服务周到，包您通过。“垐垯櫃 换
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