1、外科学(普外)专业优秀论文 N-乙酰半胱氨酸对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究关键词：肝脏缺血 血再灌注损伤 N-乙酰半胱氨酸 保护作用摘要：目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/
2、kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (
3、Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注
4、3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与
5、I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。正文内容目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylc
6、ysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基
7、转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B
8、 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1
9、 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一
10、。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注
11、1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，
12、SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝
13、脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I
14、/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子
15、和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝
16、左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesive
17、ness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B
18、的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60
19、min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹
20、、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase
21、，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注
22、 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同
23、时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4N
24、AC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20
25、min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor n
26、ecrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰
27、：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同
28、时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC
29、)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanin
30、e aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切
31、片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于
32、Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大
33、鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；
34、NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛
35、(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注
36、 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0
37、.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关
38、。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标
39、检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molec
40、ule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 S
41、ham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 AST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h
42、是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材
43、；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌
44、呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis factor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h
45、 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中 NF-B 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织 TNF- 和 ICAM-1 的表达均明显高于 Sham 组(plt;0.01)，且于再灌注 6h 达到高峰。NAC 组再灌注 1、3、6h 与 I/R 组相同时间点比较：血清 A
46、ST和 ALT、肝组织 MDA 含量、NF-B、TNF- 和 ICAM-1 的表达均低于 I/R 组(plt;0.05)；肝组织 SOD 活性高于 I/R 组(plt;0.05)。NAC 组再灌注 12h 与 I/R 组相同时间点比较：上述指标虽然在数值上有所减少或升高，但统计学上无差异(pgt;005)。 结论 1大鼠肝脏缺血 60min 再灌注6h 是再灌注损伤的高峰。 2大鼠肝脏缺血再灌注时产生的大量氧自由基是造成再灌注损伤的重要原因之一。 3NF-B 在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中起重要作用，其调控的细胞因子和炎症介质的参与是肝脏缺血再灌注损伤的重要病理生理过程。 4NAC 对大鼠肝脏缺血
47、再灌注损伤有保护作用，其机制与 NAC 能清除氧自由基、抑制 NF-B 的激活而减少细胞因子和炎症介质的表达有关。目的:探讨大鼠肝脏缺血再灌注损伤的过程和相关机制及 N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)的保护作用。 方法:将 45 只雄性 SD 大鼠随机分成三组：假手术组(Sham 组，n=5)：仅行麻醉、开腹、游离肝周韧带后取材；缺血再灌注损伤组(I/R 组，n=20)阻断肝左、中叶入肝血流 60min 后分别再灌注 1、3、6、12h；NAC 组(N 组，n=20)：先自阴茎背静脉给大鼠注射溶于生理盐水的 NAC，按 300mg/kg 给药，20min 后再按 I/
48、R 组处理。I/R 组和 NAC 组在各规定的再灌注时间点，分别取下腔静脉血 2ml，切取肝左、中叶留作实验指标检测。Sham 组游离肝周韧带后取材内容同上述两组。采用全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸氨基转移酶(Alanine aminotransferase，ALT)，天冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase，AST)活性；黄嘌呤氧化酶法和 TBA 法测定肝脏的超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase，SOD)活性及丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量；采用免疫组织化学技术检测肝组织中肿瘤坏死因子- (Tumor necrosis fa
49、ctor-，TNF-)和细胞间黏附分子-1 的(Intercellular adhesiveness molecule-1，ICAM-1)表达：采用 western-blot 方法测定肝组织中的 NF-B 的表达；肝脏组织切片 HE 染色后，行光镜检查，观察肝组织显微结构变化。 结果: I/R 组大鼠肝脏经缺血 60min，分别再灌注 1、3、6、12h 后，血清肝酶学指标(AST、ALT)和肝脏的组织形态学都显示较 Sham 组大鼠有明显的肝脏损伤，其中以再灌注 6h 肝脏损伤最严重；肝组织 MDA 含量明显高于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 3h 达到高峰：肝组织SOD 活性明显低于 Sham 组(plt;0.01)，于再灌注 6h 降至最低值；肝组织中
