1、水溶C100中还原型抗坏血酸的测定 -2, 6-二氯酚靛酚滴定法,回顾,维生素定义；特点；分类维生素C；存在形式；理化性质；生理功能维生素C缺乏症；每日摄入量；来源维生素C的营养状况评价,一、目的,了解营养评价中实验室检查的意义掌握食物中还原型VitC测定方法 掌握如何对食物中还原型VitC的含量进行分析及评价,抗坏血酸含有-OH基，具有较强的还原性，能还原染料2,6-二氯酚靛酚。该染料在酸性溶液中呈红色，被还原后为无色。在没有杂质干扰时，一定量的食物溶液还原标准染料的量与其中的抗坏血酸成正比。,二、原理及步骤,蓝色,红色,无色,步骤,用标准维生素C溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料；用标定后的
2、2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原型维生素C的浓度。,操作步骤,0.1%抗坏血酸标准储备液（1mg/ml），冰箱保存待用（已配制）。1%草酸溶液：1g草酸充分溶解后洗入100ml量筒中，加蒸馏水至100ml刻度，搅匀备用（已配制） 。配制抗坏血酸标准应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准储备液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。（1mg/50ml）空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用2,6-二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次）标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯
3、酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录所用染料Aml。,2, 6-二氯酚靛酚染料的标定,操作流程,1ml染料相当于还原型维生素C的mg,水溶C100稀释液制备：市售水溶C100饮料冰箱待用。使用前用草酸溶液稀释10倍（已制备）。水溶C100稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml水溶C100稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果B ml。（两次）,样品中还原型维生素C的浓度的测定 (采用标定的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定),操作流程,样品中还原型维生素C浓度,注意事项,由于抗坏血酸在许多条件下都容易被氧化，因此，测定
4、过程要迅速，并且应避免接触铜、铁等金属，一般不超过2min 。样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚，但还原速度比还原型维生素C慢，故滴定时以15s内粉红色不褪去为止；维生素C标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏；滴定终点的判断结果分析与讨论,配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果C(ml)。（两次）标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保
5、持15秒不褪色为终点。记录所用染料A(ml)。1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸Tmg，T=0.1/（AC）。(两次)水溶C100稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml柠檬汁稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果(Bml)。(两次),C样（mg/L）=,（B C） T,5 ml, 10, 1000,THANK YOU,还原型抗坏血酸能还原染料2, 6-二氯酚靛酚，自身氧化为脱氢型，在酸性溶液中， 2, 6-二氯酚靛酚显示红色，还原后变为无色。维生素C全部被氧化时，滴下的染料立即使溶液变成粉红色，当溶液由无色变为微红色时表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。,
