1、医学微生物学-细菌学肠杆菌科Enterobacteriaceae,大连医科大学微生物学教研室主讲人：张伟,肠杆菌科概述,肠杆菌科：是一大群生物学性状相似的革兰氏阴性短小杆菌有的为致病菌伤寒沙门菌、志贺菌、鼠疫耶尔森菌等多为肠道内正常菌群大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等传染源可能来自动物宿主、带菌者、内源性播散,第一节 埃希菌属Escherichia,（一）生物学性状形态与染色： G-杆菌，多数周身鞭毛，有菌毛培养特性：兼性厌氧。要求不高，普通琼脂（灰白色S型菌落）、EMB（紫黑色菌落），SS（桃红色菌落）,生化反应： 发酵多种糖类，H2S（-），动力（+）；IMViC试验（+-）抗原：
2、O抗原（01-0173)：与其他属细菌有交叉H抗原（H1-H56)：无交叉K抗原（K1-K100)：多糖血清型表示法O：K：H,（二）致病性 1.致病物质：粘附素：具有高度特异性，吸附、定植、致病外毒素：志贺毒素I和II耐热肠毒素a和b：激活细胞鸟苷酸环化酶，使cGMP，腹泻不耐热肠毒素I和II：激活细胞腺苷酸环化酶，cAMP，腹泻其他：内毒素、荚膜、载铁蛋白III型分泌系统：输送毒性基因产物,（二）致病性 2.所致疾病：肠道外感染：以化脓性感染和泌尿道感染最常见 化脓性感染（腹膜炎、阑尾炎、新生儿脑膜炎等）泌尿道感染（尿道炎、膀胱炎等），首位来源于病人肠道，为内源性感染（新生儿脑膜炎除外）大
3、肠埃希菌是败血症病人分离到的最常见的G-菌（45%）泌尿道感染多来自结肠的大肠埃希菌，为上行性感染；尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）,胃肠炎：与食入污染的食品和饮水有关，外源性感染,（三）微生物学检查肠道外感染：标本采集直接涂片镜检分离培养和鉴定，初步依据IMViC(+-)试验尿路感染时，每毫升10万有诊断价值肠道内感染：标本鉴别培养基（如EMB）分离培养、生化反应、血清分型、毒素测定等卫生学细菌检查：大肠菌群：37 24h内发酵乳糖产酸产气的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属等卫生标准：大肠菌群1000ml饮水中3个，每100ml瓶装汽水、果汁5个,（四）防治原则疫苗接种：菌毛
4、疫苗：防治新生家畜腹泻ST与LT B亚单位交联疫苗防治ETEC；0157 LPS治疗：因耐药质粒，耐药性非常普遍，药敏试验指导下用药一些治疗和检查应严格无菌操作污染的水和食品是ETEC、EHEC的重要传染媒介，注意预防,第二节 志贺菌属Shigella,（一）生物学性状形态与染色：G-杆菌，有菌毛，无鞭毛，无动力是本菌与其他肠道致病菌主要区别营养特性：EMB鉴别培养基上，形成无色半透明、乳糖不发酵菌落,生化反应：葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、H2S（-）、动力（-）、尿素（-）抗原分型：O抗原，4群40余型A群：痢疾志贺菌(S. dysenteriae)（10），不能发酵
5、甘露醇B群：福氏志贺菌（13）C群：鲍氏志贺菌（18）D群：宋内志贺菌（1），具有鸟甘酸脱羧酶 抵抗力：比其他肠道杆菌弱，对酸和一般消毒剂敏感,（二）致病性 1.致病物质：侵袭力：菌毛：黏附肠粘膜上皮细胞III型分泌系统：穿透上皮细胞，扩散、传播内毒素：肠粘膜通透性 ，吸收入血，发热、中毒性休克等破坏肠粘膜肠壁植物神经系统，里急后重外毒素：A群志贺菌I和II型，志贺毒素（类似ETEC产生的毒素）A亚单位裂解60S核糖体亚基上的28S rRNA，蛋白合成中断上皮细胞损伤、肾小球内皮细胞损伤（HUS）,（二）致病性 2.所致疾病和免疫性：细菌性痢疾(dysentery)：传染源：病人和带菌者传染途
6、径：粪-口途径，人易感（10-150个，常见103个）感染几乎局限于肠道，一般不入血液感染类型：急性菌痢、慢性菌痢、中毒性菌痢（小儿）临床症状：发热、腹痛、水样腹泻，可转为脓血黏液便，伴里急后重；急性中毒性菌痢表现为全身中毒症状（DIC、多器官衰竭等），死亡率高免疫性：抗感染免疫主要是消化道黏膜表面的sIgA,（三）微生物学检查与防治原则 标本采集分离培养和鉴定毒力试验毒力试验：Sereny试验用于测定志贺菌的侵袭力防治原则：预防以人为中心，防止人的感染和传播易出现多重耐药，药敏试验因为sIgA需由活菌才能诱发，故应用活疫苗，例如链霉素依赖株（Sd）活疫苗,第三节 沙门菌属Samonella,
7、概述一群寄生在人类和动物肠道中，生化反应和抗原结构相关的G-杆菌，是肠杆菌科中最复杂的菌属，有2500种以上血清型对人类致病肠热症：伤寒沙门菌（S. typhi），甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌（乙型）、希氏沙门菌食物中毒：鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌败血症：猪霍乱沙门菌最常见,（一）生物学性状形态与染色： G-杆菌，有菌毛，周身鞭毛（除鸡沙门菌和雏鸭沙门菌），一般无荚膜培养特性：兼性厌氧；EMB、SS等鉴别或选择培养基上，中等大小、无色半透明S型菌落,SS培养基,EMB培养基,生化反应：乳糖（-）、蔗糖（-）、葡萄糖（+）、多数H2S（+）、动力（+）、尿素（-）抗原结构：O抗原：L
8、PS中的特异性多糖，分群（组）H抗原：特异性高，分型Vi抗原：毒力抗原，不稳定 抵抗力：较差，对一般消毒剂敏感；可耐受胆盐、煌绿（SS选择培养基的成分）,（二）致病性 1.致病物质：侵袭力：菌毛：黏附小肠粘膜下派伊尔淋巴结的M细胞III型分泌系统：扩散、传播Vi抗原：微荚膜功能，抗吞噬内毒素：菌体死亡后释放，发热、白细胞 、中毒症状和休克外毒素：个别沙门菌（如鼠伤寒沙门菌），产生肠毒素（类似ETEC产生的毒素）,（二）致病性 2.所致疾病：传染源：病人和带菌者；污染的水源或贝壳类生物是造成爆发流行的主要原因传染途径：粪-口途径肠热症（Enteric fever）：伤寒（伤寒沙门菌）、副伤寒（甲
9、型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌）为胞内寄生菌，经M细胞，吞噬细胞，到肠系膜淋巴结引起二次菌血症，高热、肝脾肿大、玫瑰疹使已致敏组织发生超敏反应，局部坏死和溃疡，严重者出血或肠穿孔,胃肠炎（食物中毒）：最常见的沙门菌感染（70%）主要致病机制：细菌对肠黏膜的侵袭、内毒素潜伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻败血症：经口感染，经肠道入血，败血症症状明显而肠道症状不明显无症状带菌者：约1%-5%患者，症状消失1年仍可在粪便中检出病原菌,（三）微生物学检查标本采集肠热症：第1周（外周血）、第2周（粪便）、第3周（尿液）、第1-3周（骨髓）食物中毒：粪便和可疑
10、食物败血症：血液分离培养和鉴定增菌（血、骨髓）EMB、SS生化反应血清鉴定,血清学诊断肥达试验原理：用已知伤寒沙门氏菌O抗原及H 抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门氏菌、肖氏沙门菌等的H抗原与待检血清作凝集试验，测定待检血清中有无相应抗体及其效价（TO、TH、PA、PB）方法：试管凝集法，TO1:80，TH1:160，PA、PB均1:80才有意义，双份血清抗体四倍升高有诊断意义临床意义：O 、H抗体均升高，患伤寒的可能性大 O 、H抗体不升高，患伤寒的可能性小 只有H升高，预防接种过或非特异性回忆反应 只有O升高而H不高，则可能是感染早期或其他 沙门菌的交叉反应,（四）防治原则 预防加强水源
11、和食品的卫生管理注意发现和治疗健康带菌者疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗治疗：因多重耐药菌株的出现，目前有效的药物是环丙沙星,第四节 变性杆菌属Proteus,（一）生物学性状形态与染色：G-杆菌，有多形性，有菌毛；周身鞭毛，运动活泼营养特性：在普通培养基上呈扩散性生长，称为迁徙生长现象，1%石碳酸可抑制此现象,变形杆菌的周身鞭毛,迁徙生长,生化反应：乳糖（-）、尿素酶（+），迅速分解尿素外斐试验（Weil-Felix test）： 本菌某些特殊菌株如X19、X2、XK 的O抗原与某些立克次氏体（斑疹伤寒立克次体、羌虫病立克次体）有共同抗原成分，临床上应用OX19、OX2、OXK 代替立克次氏体抗原
12、与斑疹伤寒或恙虫病患者血清做凝集试验，以辅助诊断立克次体病条件致病：泌尿道感染：仅次于大肠埃希菌腹膜炎、脑膜炎、败血症、食物中毒或医院感染,问 题,大肠杆菌所致的肠道外感染有哪些？其引起胃肠炎的致病性埃希菌有哪些？肠毒素分为耐热和不耐热两种，它们的致病机制是什么，有何不同？我国卫生标准规定，大肠菌数在每升水中不得超过几个？每100ml瓶装水、果汁不得超过几个？痢疾杆菌与E.coli何者具有动力？痢疾杆菌既具有内毒素，又具有外毒素（志贺毒素）其中志贺毒素的作用机制是什么？,问 题,痢疾杆菌引起何种疾病，其传播途径是？测试志贺菌的侵袭力常用什么实验？沙门氏菌所致疾病有哪些？其中肠热证标本的采集要注意什么？肥达试验的阳性结果是什么？辅助诊断何种疾病？沙门菌的特异性预防使用何种疫苗？何种细菌在培养时可出现迁移现象？它在生化反应上的典型特点是什么？其主要引起何种疾病？外斐反应的原理和意义是什么?,chance favors the prepared mind！,
