1、化妆品乳膏剂中双酚 A 的测定能力验证计划研究 黄湘鹭 冯克然 张会亮 邢书霞 丁宏 中国食品药品检定研究院 摘 要： 通过实施化妆品乳膏剂中双酚 A 测定的能力验证计划, 了解国内化妆品检测机构双酚 A 的测定能力和水平, 识别实验室间检测水平差异, 帮助提高相关实验室检测技术水平和质量控制能力。通过方案设计、样品制备、均匀性和稳定性试验、统计结果及技术分析等方面, 对全国 20 家化妆品检测实验室双酚 A 检测结果进行了评价和分析。在参与本次能力验证计划的 20 家实验室中, 实验室结果满意率为 80.0%, 说明大部分实验室能够准确测定化妆品乳膏剂中双酚 A, 部分实验室的质控能力有待提
2、高。关键词： 化妆品; 乳膏剂; 能力验证计划; 双酚 A; 作者简介：黄湘鹭 (1985) , 女, 硕士, 助理研究员, 从事食品、化妆品的质量控制与风险评估领域相关工作。作者简介：邢书霞 (1970) , 女, 硕士, 副研究员, 从事食品、化妆品的质量控制与风险评估领域相关工作。联系电话:010-67095929E-mail:收稿日期：2017-02-17Proficiency Testing on the Determination of Bisphenol A in Cosmetic CreamHUANG Xiang-lu FENG Ke-ran ZHANG Hui-liang X
3、ING Shu-xia DING Hong National Institute for Food and Drug Control; Abstract： To understand the ability and related level of determination of bisphenol A (BPA) in cosmetic cream for testing organizations in China, the proficiency testing project was conducted to identify the difference between the l
4、abs, so as to enhance their technical testing level and ability of quality control. By means of program design, sample preparation, homogeneity and stability test, calculation of statistical results and technical analysis, the results of bisphenol A detection in 20 cosmetic testing laboratories were
5、 evaluated and analyzed. The satisfaction rate for laboratories participating in this competency verification program was 80.0%, indicating that most laboratories were able to accurately determine the bisphenol A in cosmetic creams and some laboratories ability of quality control should be improved.
6、Keyword： cosmetics; cream; proficiency testing project; bisphenol A; Received： 2017-02-17化妆品通常直接与人体接触, 且消费群体广泛, 对其进行监管的制度手段和检测技术水平尤为重要。检测化妆品中的禁用、限用物质, 保障化妆品质量安全, 是日常监管中的重要部分。我国化妆品安全技术规范 (2015 年版) 1中将双酚 A (Bisphenol A, BPA) 列为禁用物质。双酚 A 是生产环氧树脂、聚碳酸酯等聚合物材料的原料, 被广泛用于食品、化妆品的包装材料、内部涂层以及日用化学品原料的生产与制作2。其可通过
7、包装材料或容器迁移进入食品、化妆品中, 从而进入生物链3。双酚 A 的危害在于其具有较强的内分泌干扰等毒性效应, 可干扰激素受体, 进而影响胚胎/胎儿发育, 损害雄性生殖健康等4-5。能力验证 (Proficiency Testing, PT) 是指利用实验室间比对, 按照预先制定的准则评价参加者的能力, 是认可机构、实验室监管部门判定实验室能力的重要技术手段之一6-7。为了解国内化妆品检测机构双酚 A 的测定能力和水平, 考察评价国内相关实验室测定的准确性, 促进该类检测能力不断提高, 保证化妆品的质量和安全, 中国合格评定国家认可委员会 (CNAS) 开展了本次能力验证计划, 由本文课题组
8、具体组织实施。1 材料与方法1.1 能力验证样品研制1.1.1 样品制备本次能力验证采用在化妆品产品中最常见的乳膏剂作为样品基质, 按一定配制比例将油相成分、水相成分和双酚 A 溶液等加热混合乳化, 冷却成型。用棕色玻璃瓶带硅胶密封垫塑料盖包装, 10 g/瓶, 铝塑袋真空密封, 常温常湿保存。1.1.2 样品均匀性和稳定性考察样品共制备 1 000 瓶, 按照 JJF 1343-2012标准物质定值的通用原则及统计学原理中建议的抽样量8, 随机抽取 30 瓶测定双酚 A 浓度以进行均匀性考察。以上述结果同时作为第 1 次稳定性数据, 在随后的 4、8 和 12 周随机抽取6 瓶样品进行测定,
9、 以此作为第 2、3、4 次稳定性数据。考察时间覆盖了计划运作的始末期。根据 CNAS-GL03:20069的建议, 采用单因子方差分析 (one way ANOVA) 判定样品的均匀性, 采用 t 检验法判定样品的稳定性。1.2 能力验证计划实施1.2.1 样品发放本计划设计样品标识为 BPA-XXX-Y, 其中 XXX 为实验室随机代码 (3 位阿拉伯数字) ;Y 为英文字母 A 或 B, 为增加复杂性, 发放到各参加实验室的样品被随机标识为 A 或 B。本计划采用快递形式寄送样品并附样品接收状态确认表、作业指导书和结果报告单等, 要求各实验室收到样品后尽快返回样品接收状态确认表, 并于
10、2 周内反馈结果报告。1.2.2 测定方法本计划的作业指导书中提供本文课题组自拟检验方法作为参考, 但不作强制要求, 鼓励各实验室开发、优化检测条件并在结果报告中注明。1.2.3 结果评价原则能力验证统计方法的选择取决于结果总体分布特征, 应首先考察参加实验室的结果分布, 以选择适宜的统计方法10。本计划从回收结果的分布来看, 虽有个别极端值出现, 但整体数据近似于正态分布, 适宜使用 Robust 统计技术, 可充分减少极端值对统计结果的影响。使用 Excel 2010 软件计算综合统计量, 包括结果数 (Count) 、中位值 (Median) 、标准化四分位距 (Norm IQR) 、稳
11、健变异系数 (Robust CV) 、极小值 (Min) 、极大值 (Max) 和极差 (Range) , 计算稳健 Z 比分数。把离群值定义为|Z|大于等于 3 的结果, 表示结果不满意;把可疑值定义为|Z|在 2 到 3 之间的结果对, 表示结果有问题;而满意结果为|Z|小于等于 2。2 结果2.1 样品均匀性和稳定性考察结果样品的均值为 8.62 mg/kg, F=1.146, 小于显著性水平 (=0.05) 的临界值, 结果表明样品间均匀, 无显著性差异。将第 2、3、4 次稳定性数据与第一次数据进行 t 检验, t 值小于 95%置信区间查表值, 结果表明样品在 PT 计划运作期间是
12、稳定的。2.2 能力验证结果2.2.1 参加实验室概况本计划共向 20 家实验室发放了样品, 其中 19 家实验室来自食品药品检测机构, 其中国家级 1 家、省级 10 家、副省级 1 家、地市级 7 家, 另有 1 家企业实验室参加本计划。2.2.2 回收结果的总体分布特征将各参加实验室的结果用 Minitab17 软件绘制直方图并进行正态拟合, 结果见图 1。同时进行 Anderson-Darling 检验, 结果见图 2, p 值为 0.205, 大于0.05。结果表明回收结果数据基本符合正态分布特征, 适宜应用 Robust 统计技术。2.2.3 回收结果的综合统计量各实验室测定结果的
13、综合统计量汇总见表 1。2.2.4 回收结果的判断参加实验室中, 共 4 家结果可疑或结果不满意, 占实验室总数的 20%。其中 2家 (10%) 结果可疑, 2 家 (10%) 结果不满意。Z 比分数序列图见图 3。图 1 双酚 A 测定结果频数图 下载原图图 2 双酚 A 测定结果概率图 下载原图表 1 能力验证结果统计量汇总 下载原表 图 3 回收结果的 Z 比分数序列图 下载原图3 讨论通过对各实验室反馈原始记录的分析, 本计划发现结果可疑或不满意的实验室可能存在以下问题。3.1 样品前处理1 2 家实验室使用了作业指导书中的样品前处理方法, 其余 8 家则调整了取样量, 范围从 0.
14、051.0 g 不等, 取样量为 1.0 g 的实验室结果显著离群。本计划样品为乳膏剂, 课题组在前期预实验中发现取样量大或提取溶剂体积小, 易导致样品无法充分混悬提取, 是造成测量结果差异的一个因素。3.2 仪器整体响应过高或过低查阅结果显著离群的实验室的原始记录发现, 与使用相同仪器的其他参加实验室相比, 该实验室仪器对相同浓度对照品的响应与其他实验室相比明显偏低, 如果排除标准品质量问题和称量问题, 应检查仪器性能是否稳定, 质谱参数设置是否最优。3.3 标准曲线区间的影响本计划作业指导书附录参考方法给出的标准曲线浓度区间为两个数量级 (0.011.0g/m L) , 而待测物浓度偏向标
15、准曲线最低点, 容易引入相对较大误差。参加实验室中, 有 10 家直接采用了参考方法中的标准曲线浓度区间, 其余实验室根据实际情况缩小了浓度区间, 使待测物浓度更趋近标准曲线中间点。鉴于作业指导书中不宜将标准曲线浓度区间给得过于具体, 今后组织过程中可不提供标准曲线浓度信息, 完全由参加实验室自行确定。3.4 标准曲线测定不准确个别实验室标准曲线的拟合度较差, 或标准曲线某点两次测定偏差较大, 这些情况均可能导致结果偏离, 应通过检查仪器性能 (如进样系统) 、增加标准曲线测定次数等方法尽量减小标准曲线测定差异对结果的影响。3.5 随行回收率实验宜采用基质相近的有证标准物质或试样加标的方式进行
16、随行回收率实验, 以考察检测方法的整体准确性。3.6 其他能力验证活动是利用实验室间比对, 按照预先制定的准则评价参加者的能力, 是实验室工作质量监控的重要手段, 也是实验室内部质量控制的补充。该活动不会强制规定检测方法、仪器及型号等内容, 要求参加实验室自行在各方面对实验质量进行控制。结果不合格的实验室应从各方面查找原因, 采取纠正措施。此次化妆品乳膏剂中双酚 A 测定能力验证结果表明, 大部分参加实验室具备快速、准确测定化妆品中双酚 A 含量的能力。同时, 能力验证的结果也反映了一些实验室存在的问题, 这些问题的发现和改进, 将促进实验室对化妆品中双酚A 检测能力的不断提高。参考文献1中华
17、人民共和国国家食品药品监督管理总局.国家食品药品监督管理总局关于发布化妆品安全技术规范 (2015 年版) 的公告 (2015 年第 268 号) EB/OL. (2015-12-23) 2017-03-14.http:/ 2王路路, 魏倩, 陈凯.塑料中的“隐形杀手“ 双酚 AJ.化学教学, 2011 (2) :65-67. 3孙汉文, 李挥, 高文惠, 等.食品包装材料中双酚 A 迁移量的测定J.食品科学, 2012, 33 (2) :235-239. 4SUI Y P, AI N, PARK S H.et al.Bisphenol A and its analogues activate
18、 human pregnane X receptorJ.Environmental Health Perspectives, 2012, 120 (3) :399-405. 5VANESSA D, MARINA G, ALBANE M, et al.Nuclear receptor profiling of bisphenol-A and its halogenated analoguesJ.Vitamins and Hormones, 2014, 94:229-252. 6中国合格评定国家认可委员会.CNAS-RL02:2010 能力验证规则S.北京:中国质检出版社, 2010. 7中国实验室国家认可委员会.ISO/IEC17025:2005 检测和校准实验室认可准则S.北京:中国质检出版社, 2005. 8中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.JJF 1343-2012 标准物质定值的通用原则及统计学原理S.北京:中国质检出版社, 2012. 9中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL03:2006 能力验证样品均匀性和稳定性评价指南S.北京:中国质检出版社, 2006. 10中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL02:2014 能力验证结果的统计处理和能力评价指南S.北京:中国质检出版社, 2014.
