1、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和大肠埃希菌中ESBLs 检测的筛选与确证试验ESBLs 是英文 Extended-Spectrum -lactamase 的缩写，中文意思是超广谱 - 内酰胺酶，它是当前抗生素出现的新的耐药趋势之一。 目前大肠埃希氏菌（大肠杆菌） 、肺炎克雷伯氏菌是最常见的产 ESBLs 菌株的细菌，其次，阴沟肠杆菌、粘质沙雷氏菌、弗劳地枸橼酸菌、铜绿假单孢菌也可出现产 ESBLs 菌株的细菌。方法 初步筛选试验 表型确证试验培养基 Mueller-Hinton 琼脂 Mueller-Hinton 琼脂抗微生物药物纸片浓度头孢泊肟 10g 或头孢他啶 30g 或氨曲南 30g 或头
2、孢噻肟 30g 或头孢曲松 30g(使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的敏感性)头孢他啶 30g头孢他啶/克拉维酸 30/10g头孢噻肟 30g头孢噻肟/克拉维酸 30/10g确证试验需要同时使用头孢噻肟和头孢他啶，单独和联合克拉维酸的复合制剂）接种孵育条件 孵育时间按标准纸片扩散法的规定进行 按标准纸片扩散法的规定进行判读结果 头孢泊肟的抑菌圈17mm头孢他啶的抑菌圈22mm 氨曲南的抑菌圈 27mm头孢噻肟的抑菌圈27mm头孢曲松的抑菌圈25mm提示可能有 ESBLs 的产生2 个药物中有任何一个，在加克拉维酸后，抑菌圈直径与不加克拉维酸的抑菌圈相比，增大值5mm 时，判定为产 ESB
3、Ls（如，头孢他啶的抑菌圈16mm；头孢他啶/克拉维酸的抑菌圈21mm）质控建议 大肠埃希菌 ATCC25922（见表3 的质控范围）肺炎克雷伯菌 ATCC700603： 头孢泊肟抑菌圈 9-16mm头孢他啶抑菌圈 10-18mm氨曲南抑菌圈 9-17mm头孢噻肟抑菌圈 17-25mm头孢曲松抑菌圈 16-24mm大肠埃希菌 ATCC25922：所测试药物联合克拉维酸后的抑菌圈直径与单药抑菌圈相比，增大值2mm。肺炎克雷伯菌 ATCC700603： 头孢他啶/克拉维酸抑菌圈直径增大5mm；头孢噻肟/克拉维酸抑菌圈直径增大3 mm。脚注:头孢他啶/克拉维酸(30/10g)纸片与头孢噻肟/ 克拉维
4、酸（30/10g）纸片的制备： 使用克拉维酸 1000g/ml 的原液（新鲜制备或者从70 冰冻中取出已分装在小瓶中的） ，把 10l 的克拉维酸加到头孢他啶（ 30g）和头孢噻肟（ 30g）的纸片上。在纸片贴于平板之前 1 个小时内，用微量加样器把 10l 原液加到头孢他啶和头孢噻肟纸片上，允许有 30 分钟的时间以利于克拉维酸的吸收和纸片在贴之前保持足够的干燥。制备完成后立即使用纸片，否则丢弃；不能保存。 （1）CAZ CAZ/棒酸，CTX CTX/棒酸。一种大于 5MM，另一种小于 5MM 或相等，可确认为 ESBL 阳性。（2）加棒酸的药片抑菌圈直径反而小于不加的，可能是片间差异，应认为 ESBL 阴性
