1、实验二十、浆液黏蛋白定性试验【原理】渗出液中含较多地浆液黏蛋白,在酸性条件下可产生白色雾状沉淀,称为 Rivalta 反应。【操作】在100 ml蒸馏水中加入冰乙酸0.1ml ,充分混匀(pH 3 - 5) ,静置数分钟,将穿刺液靠近量筒液面逐滴轻轻滴下,在黑色背景下,观察白色雾状沉淀的发生计其下降速度等。结果判断阴 性:清晰不显雾状。可 疑(土) :渐显白雾状。阳性( + ) :加后呈白雾状。(2 + ) :白薄之云状c(3 + ) :白浓云状c【附注】在滴下穿刺被后,如见浓厚的白色云雾状沉淀很快地下降,而且形成较长的沉淀物,即Rivalta 反应阳性。如产生白色泪浊不明显,下沉缓慢,并较快
2、消失者为阴性反应。实验十九、脑脊液蛋白定性试验【原理】脑脊液中球蛋白与苯酚结合,可形成不溶性蛋白盐而下沉, 形成白色浑浊或沉淀,即潘氏(Pandy)试验阳性。【试剂】5%苯酚溶液:取纯苯酚 25 ml ,加蒸馆水至 500 ml ,用力振摇,置 370C 温箱内 1 - 2 天,待完全溶解后,在棕色瓶内室温保存。【操作】取试剂 2-3ml ,置于小试管内,用毛细滴管滴入脑脊液 1 -2 滴,衬以黑背景,立即观察结果。【结果判断】阴性:清晰透明,不显雾状。极弱阳性(土) :微呈白雾状,在黑色背景下,才能看到。阳性( + ) :灰白色云雾状。(2 + ) :白色浑浊。(3 + ) :白色浓絮状沉淀
3、。(4 + ) :白色凝块。【临床意义】正常时多为阴性或极弱阳性r 有脑组织和脑脊髓膜疾患时常呈阳性反应,如化服性脑脊髓膜炎、结核性脑脊髓膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈强阳性反应,如外伤性血液混人脑脊液中,亦可呈阳性反应。实验十五、交叉配血方法盐水介质配血法:本法是临床上最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的 ABO 不配合性。当受血者和供血者细胞经混合并离心后,如有 ABO 不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心“( immediatespin) 配血试验。【原理】受血者与献血者交叉配血不凝固。【操作】1. 抽取受血者静脉血 3-4ml,
4、待凝固后分离血清,并制备 2% 盐水悬液。2. 将供血者血样以同样方法分离血情,并配制 2% 红细胞悬液。3. 取洁净小试管(10 mm x60 mm)2 支, 1 支标明受血者血清(PS) +供血者细胞(DC) 或“主侧“;另 1 支标明供血者血清(DS) +受血者细胞( PC) 或“次侧“。4. 按标记“主侧“管加受血者血清 l 滴和供血者红细胞悬液 l 滴。“次。l1J“ 管加 1 供血者血清 l 滴和受血者红细胞悬液 l 滴。 ?昆匀,以 1 000 r/min 离心 1 min ,轻轻侧动试管,观察结果。冬季室温较低,应将试管保温,以防冷凝集素引起的凝集反应影响结果判断。ABO 同型配血,“主侧“和“次侧“均无榕血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。如急需输血但一时元同型血液,作异型配血时(O 型血输给 A 、B 或 AB 型,或 A 、B 型血输给 AB 型时) , “主侧“无溶血及凝集,但“次侧“必然有榕血或凝集。如发现“次侧“无凝集,应进一步分析原因。如因故急需用 O 型血输给异型血时,应先检测供血者血清中抗 A、B) 效价,如其效价 128 、无溶血者,方可给予少量输血。【附注】1.盐水介质配血法也可用玻片法进行操作。2. 如盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做酶法或抗人球蛋白法配血。