1、 可见分光光度计的使用与调校一、仪器的检查1、仪器处于工作状态时,光源发光应稳定无闪耀现象。当波长置于 580时nm处时,在样品室内应能看到完整、清晰、均匀的黄色光斑。如发出 580nm 处不是橙黄色光,则说明已造成光学系统位移,必须重新调整。打开盖板调整一螺杆,顺时针旋转波长变大,逆时针旋转波长变小。在调整时只须旋转很小幅度,调至白纸片上出现橙黄色光且波长盘上 580nm 处正好与红线对齐为止;亦可旋转波长盘至白纸片上出现橙黄色的单色光时,再松动波长盘上的三个螺钉,旋转波长盘使 580nm 处与盘上面的红线对齐。同时观察白纸片上光的颜色,若仍是橙黄色的单色光,表明已调好。 2、仪器光谱范围的
2、两端波长处(有灵敏度换档开关的仪器可选在合适的灵敏度档次) ,光亮调节系统在其调节范围 80%内调节时,应能使透射比达到100%。数显仪器在光量调节系统调节至最高限时,透射比应大于 125%。二、仪器的检定方法1、稳定度在仪器接收元件不受光的情况下,调整仪器零点,使显示值为 0%,观察三分钟,记录透射比示值最大变化即为暗电流稳定度。在仪器接受元件受光情况下,在 400nm和 700nm处,调整透射比为 100%,观察 3分钟(波长切换时五分钟) ,记录透射比示值最大变化即为光电流稳定度。2、仪器波长检查 应用镨钕滤光片来作为标准,将镨钕滤光片装到仪器附件上放到一塑料比色皿座中,空白为空气即可,
3、待仪器稳定后进行以下步骤: 打开比色皿盖,将面板上调“0”电位器调至 “0”刻线。 将比色皿盖合下,使光电管受光,调节光量粗调(后细调)电位器至电表满度即“100 ”,反复几次调整 “0”和“100”才能调好。每改变一次波长须重新校对“0”和“100”,找出透射比最小的相应波长 将镨钕滤光片置于光路中,记下电表读数,然后在 529nm 左右分别测出其透射比。注:镨钕滤光片有好几个不同波长的吸收峰,推荐用 529nm 的吸收峰来调整仪器波长。3、吸收池配套性吸收池磨砂面用铅笔编号,用蒸馏水在 700nm处测定,将一个池的透射比值调至 100%,测定其他吸收池的吸光度,若测定的吸光度为零或两格吸收池的吸光度相等,即为配对吸收池。数据记录及处理1、稳定度记录:透射比示值变化最大值0%处100%400nm处100%700nm处2、仪器波长检查:测定 529nm 左右相对应的透射比记录, 529nm 左右相对应的透射比波 长 nm 透 射 比 %5 3 35 3 25 2 95 2 65 2 53、吸收池配套性(记录是否配套)