1、第2-3章,植物组织与器官培养,中篇 植物细胞工程,Contents,3.1 植物组织培养,3.2 植物胚胎培养,3.3 毛状根培养,植物组织培养理论知识,生殖、细胞全能性、,细胞分化、脱分化,1.有性生殖（Sexual reproduction）：是两个配,子融合为一，成为合子或受精卵，再发育成为新一代个体的生殖方式。,2.无性生殖（Asexual reproduction）：不涉及性,别、没有配子参与、没有受精过程的生殖都属于,无性生殖（Asexual reproduction）。许多高等,植物的营养器官（例如根、茎、叶等），在脱离母体后能发育成完整的植株，这种繁殖方式也称为营养生殖。,S
2、exual reproduction 有性生殖,被子植物的生殖器官包括哪些部位？,花花被、雄蕊（花药）、雌蕊,Sexual reproduction,如何通过有性繁殖获得植物个体的完整周期？配子结合：胚珠中的卵细胞（雌配子,n）与花药中的花粉（雄配子， n）结合受精卵 (2n)： 具有全部遗传信息和分化潜能胚： 从胚乳中吸收营养，分化成各种组织和器官完整植株 释放雌、雄配子进入下一个循环。 春华秋实，生命轮回,返回,Asexual,Reproduction 无性生殖,分株繁殖嫁接繁殖,扦插,分芽嫁接压条压条繁殖, 3.细胞全能性(totipotency)：是指分化细胞保留着全部的核,基因组，具
3、有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成完整个体的潜能。P20,1902年，德国植物学家哈伯兰德(Haberlandt)提出了,细胞全能性学说，预言植物细胞具有全能性。, 植物细胞全能性：细胞全能性首先在植物中被证实，1958年,，史都华德（Steward）等利用胡萝卜根韧皮部组织培养出,了完整的新植株，证明高度分化的植物营养组织仍保持着发育成完整植株的能力，能以无性繁殖方式繁殖后代。, 动物细胞全能性：动物细胞核移植实验证明，胚胎细胞及高,度分化的体细胞具有全能性。1997年克隆羊多莉的诞生为揭,示动物细胞全能性做出了重大贡献。, 4.细胞分化（Differentiation）：
4、是指细胞在形态、结构和,功能上发生差异的过程，包括时间上和空间上的分化。P21, 时间上的分化：是指一个细胞在不同的发育阶段可以形成,不同的形态和功能；, 空间上的分化：是指同一种细胞由于所处的环境或部位不,同可以形成不同的形态和功能。细胞分化能力的强弱称为发育潜能。, 形态发生（Morphogenesis）：是指通过细胞增殖、分化和,行为塑造组织、器官和个体形态的过程。细胞分化与形态发生是相互联系在一起的。, 细胞分化的实质：是基因的差异表达（Differential,expression），是奢侈基因按照一定顺序表达的结果。, 奢侈基因（Luxury gene）：又称组织特异性基,因（Ti
5、ssue-specific gene），是在各种组织中进,行不同的选择性表达的基因，与各类细胞的特殊性有直接关系。例如血红蛋白、肌动蛋白基因等。, 持家基因（House-keeping gene）：是维持细胞,的基本结构和最低限度功能所不可少的基因，例如：编码组蛋白、核糖体蛋白、线粒体蛋白、糖酵解酶等基因。这类基因在所有类型的细胞中都表达。, 两类基因：, 5. 脱分化（Dedifferentiation）：又称去分,化，是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程，即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。, 脱分化后的植物细胞经过细胞分裂，产生,无组织
6、结构、无明显极性的松散的细胞团,，称之为愈伤组织（Callus），如图。, 需要采用人工诱导技术诱导体细胞的脱分,化。不同生物的细胞脱分化能力不同，决定了组织培养再生的难以。, 6. 再分化（Redifferentiation）：是指在离体条件下,，无序生长的脱分化的细胞在适当条件下重新进入有序生长和分化状态的过程。, 植物再生的关键环节：, 分化的细胞脱分化再分化, 离体培养植物组织或细胞再生植株就是通过细胞脱,分化和再分化实现的。, 植物再生的理论基础：细胞全能性, 脱分化是细胞全能性表现的前提，再分化是细胞全,能性的最终体现，是再生的基础。,3.1 Plant tissue cultur
7、e 植物组织培养,植物组织培养概念： 是将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体,材料无菌条件下培养在人工培养基上，在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术。,植物组织培养的优点？,1. 便于人工控制培养条件；周期短，繁殖速度快，经济效益高。2. 占用空间小，不受地区、季节限制。利于突变体筛选，是优良品种培育的有效途径。利于繁殖珍稀、濒危植物，保持原来品种的特性。,3.1.1 Developing HistoryEarly Cell Culture .,1902年，德国植物学家哈伯兰德（Haberlandt）就预言，植物活细胞具有能够发育成为完整植株的潜在能力。而且进行了相关实验。观点： 高等植
8、物的组织和器官可以分割成单个细胞。贡 献 ： 提出细胞全能性因此，被称为植物组织培养之father,1934年：White番茄根建立第一个植物无性系。,当根2厘米长切成0.5-1厘米切断，无菌液体培养完全相同的离体根根离体培养真正成功。提出植物细胞全能性假设。,1937年：White发现3种B族维生素和IAA对植物生长有用,1939年：White培养烟草种间杂种幼茎切段原形成层成功,1943年：White植物组织培养手册A Handbook of Plant Tissue Culture，标志组织培养成为一门新兴学科。,组织培养的奠基人White (Founder),History,1948：
9、我国崔徽和Skoog确定了腺嘌呤G/IAA比例是控制 芽、根形成的重要条件。, 1956 Miller：Cell division . role of cytokinins ，建立了 KT/IAA控制器官分化的激素模式。, 1958 Steward：Carrot plants from root cells,milestone,1960S：Morel实现了兰花茎尖无病毒幼苗快速繁殖目的。从此，植物组培走向大规模应用阶段。我国组培从1980开始，起步晚，但发展很快，成绩翡翠。,3.1.2 植物组织培养再生植株的途径, （1）器官发生途径：成熟细胞愈伤组织出芽出根,完整植株。, （2）体细胞胚发生
10、途径：成熟细胞分生细胞胚状体,完整植株。,可以通过两条途径实现：,心形胚,子叶形胚,以胡萝卜为例,3.1.2.1 器官发生途径, 器官发生途径:指离体培养的组织或愈伤组织分化形成不定根、不定芽等器官过程。两个概念：愈伤组织(callus)：脱分化后的细胞经过细胞分裂产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。外植体(explant):指从植物个体上切取下来进行培养的部分组织或器官。,器官发生途径一般经过四个步骤:, （1）启动期：启动诱导外植体细胞脱分化和分裂。,主要通过向培养基中添加一定浓度、种类和比例的外源激素（如NAA、IAA、2-4D较高浓度的生长素或细胞分裂素)刺激外植体细胞改变原来的
11、代谢途径来诱导细胞活化，重新获得分裂能力。, （2）愈伤组织诱导：即细胞开始分裂并不断增生,子细胞的过程。这个阶段一般需要降低激素浓度，同时控制好湿度、湿度、光照等条件。, （3）拟分生组织的形成：将愈伤组织转移到有,利于有序生长的条件下培养，细胞内部开始发生一系列形态和生理变化，分化出形态和功能不同的细胞。在若干部位出现类似形成层的细胞群，,通常称为“生长中心”，又可称为“拟分生组织”，该,过程是器官发生的一个转变时期。, （4）器官原基和器官的形成：拟分生组织形成,后，一些细胞分化成为管状细胞，进而形成维管组织，形成不同的器官原基，进一步分化出相应的组织和器官。,3 ways of org
12、anogenesis,3.1.2.2 体细胞胚发生途径 Somatic embryogenesis, 体细胞胚（Somatic embryo）又叫胚状体，是指,离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。, 体细胞胚发生途径：是指体细胞在离体培养过程,中经过了胚胎发育过程。体细胞胚起源于非合子细胞，因此不同于合子胚。,较高浓度2,4-D等生长素有利于体细胞胚性细胞的形成，但在形成球形胚后要降低尝试或除去，有利于继续发育。,低浓度6-BA等细胞分裂素对促进细胞分裂（体细胞胚的形成以细胞分裂为前提），和维持根茎分生组织的正常发育具有重要作用。,（1）器官外植体直接发生途径, 茎表皮、叶、子叶
13、、下胚轴等外植体分化细胞经,过脱分化后均可以产生胚状体。, 以叶片为外植体直接形成体细胞胚为例，一般,经过2个阶段：, 1）诱导期。叶片表皮细胞或亚表皮细胞感受刺,激后进入分裂状态，形成小的瘤状突起；, 2）胚胎发育期。 瘤状物继续发育，经过球形胚,、心形胚等阶段最后形成体细胞胚。,体细胞胚发生的5个途径：, （2）悬浮培养细胞发生途径：在悬浮培养的细,胞中一些成簇成团细胞可以产生胚性细胞团，一个胚性细胞团外围分生细胞可以发育成一个胚状体，也可以产生多个胚状体。这种方式可以得到大量的胚状体。, （3）愈伤组织发生途径：是胚状体发生常见的,形式。愈伤组织内部或表面细胞均可以产生胚状,体。包括3个
14、阶段：1）诱导外植体形成愈伤组织；2）诱导愈伤组织胚性化；3）体细胞胚形成。, （4 ）单细胞发生途径：通过花药/花粉培养小孢子 诱导胚状体。, （5 ）原生质体发生途径,愈伤组织体细胞胚形成的3个阶段, （1）无机盐, 培养基中无机盐的浓度通常在 25mmol/L左右。 根据添加量多少分为大量元素（浓度大于,0.5mmol/L）和微量元素(浓度低于0.5mmol/L)。, 大量元素：主要有氮、硫、磷、钾、钙、镁。,氮、硫、磷是蛋白质、氨基酸、核酸和酶的主要成分。, 微量元素：主要包括铁、锰、铜、锌、氯、硼、,钼等。这些微量元素对于蛋白或酶的生物活性十分重要，并参与生物过程的调节。,3.1.3
15、 植物组织培养的培养基,（2）有机物, 常用的有机物：糖类、氨基酸、维生素、醇类等。, 糖类：是离体培养的植物细胞所必需的，既可以作为碳源,，又可以维持渗透压。最常用的碳源是蔗糖，使用浓度在3%左右。葡萄糖和果糖也是较好的碳源。麦芽糖、半乳糖、甘露糖和乳糖在组,织培养中也有应用。, 氨基酸：是很好的有机氮源，可直接被细胞吸收利用。培,养基中最常用的氨基酸是甘氨酸，其他的如精氨酸、谷氨酸，谷酰胺、天冬氨酸、天冬酰胺、丙氨酸等也常用。通常采用蛋白质水解产物（包括酪蛋白水解物）、谷氨酰胺或氨基酸混合物。, 维生素：以各种辅酶的形式参与多种代谢活动，对生长、分化,等有很好的促进作用。虽然大多数的植物细
16、胞在培养中都能合成所必需的维生素，但在数量上不足，通常需加入一至数种维,生素。常用的维生素包括：盐酸硫胺素（Thiamine,VB1）、盐酸吡哆醇（Pyridoxin,VB6）、Vc（抗坏血酸）、有时还使用生物素、叶酸、VB12等。VB1对愈伤组织的产生和生活力有重要作用，VB6能促进根的生长。Vc有防止组织变褐的作用。, 肌醇：对糖类的相互转化、维生素和激素的利用等有 促进作用。能促进愈伤组织生长以及胚状体和芽的形成。,对组织和细胞的繁殖、分化有促进作用，对细胞壁的形成也有作用。, 腺嘌呤：是合成细胞分裂素的前体物质之一。添加腺嘌呤能促,进细胞合成分裂素，有利于细胞的分裂和分化，促进芽的形成
17、。,（3）调节物质, 植物激素(Phytohormone)：是植物自然状态下产,生的、对生长发育有显著作用的微量有机物。能影响生长和分化。, 在个体发育中，不论是种子发芽、营养生长、繁,殖器官形成以至整个成熟过程，主要由激素控制。, 植物体内的激素与细胞内某种称为激素受体的蛋,白质结合后，通过复杂的信号转导途径影响DNA、RNA和蛋白质的合成，并对特殊酶的合成起调控作用，从而表现出调节代谢的功能。, 生长素 (auxin), 生长素是由色氨酸通过一系列中间产物形成的。 在植物组织培养器官和整株水平中，生长素主要用来刺激细胞分,裂和诱导根的分化。, 常用的生长素有：吲哚乙酸（IAA）、2，4-二
18、氯苯氧乙,酸（2，4-D）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）等。,IAA活力较弱。NAA起动能力要比IAA高出3-4倍。IBA是促进发根能力较强的生长调节物质。NAA和IBA广泛用于生根，并与细胞分裂素互作促进芽的增殖和生长。,2，4D起动能力比IAA高10倍，特别在促进愈伤组织的形成上活力最高，但它强烈抑制芽的形成。, 细胞分裂素（Cytokinin）, 细胞分裂素大多是嘌呤族衍生物，自然状态下分裂素主,要在根中形成，茎端、萌发中的种子、发育中的果实和种子也能合成分裂素。, 分裂素的生理作用主要是诱导芽的分化、促进侧芽萌发生,长、促进细胞分裂与扩大。多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖，
19、而在生根培养时使用较少或用量较低。, 主要有激动素（KT）、6-苄基腺嘌呤（6-BA）和玉米素,（ZT）等。其中最常用的是6苄基腺嘌呤（6BA）。其中ZT活性最强，但昂贵。,高,有利于根的形成和愈伤组织的形成,适中低,有利于根芽的分化有利于芽的形成,1956年，米勒（Miller）与斯库格（Skoog）一起提出了植物激素控制器官形成的观点。,生长素/细胞分裂素,能促进茎的延长、发芽、种子休眠、开花、性别表现等过程。一般情况下，离体培养的细胞合成的赤霉素能满足自身需要，故常无需添加。若需要添加，常用GA3。, 赤霉素, 激素配比,3.1.3.4 常用培养基, 富盐平衡培养基：是目前使用最广泛的一
20、类，代表性的培养基有MS、 LS、BL、BM、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓度高；元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富。, 高硝态氮培养基：代表性培养基有B5（豆类、木本植物）、N6（单子叶植物和花药培养）、SH。特点是：硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1）。, 中盐培养基：代表性培养基有Nitsch、Miller、Blaydes、H。大多是在MS培养基基础上进行改良设计。特点是：大量元素、无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高。维生素种类比MS增多，例如增加了生物素、叶酸等。, 低盐培养基：代表性培养基有 Wh
21、ite（根、胚）、WS、HE、HB。特点是：无机盐、有机成分含量浓度低，多用作生根培养的培养基。,见P42附录表,例：MS培养基贮备液（母液）的配制,琼脂+蒸馏水 加热溶化 1mol/L NaOH 或1mol/L HCl蒸馏水大量元素微量元素 混合 定容 pH调节铁盐有机激素培养瓶 洗涤干净 干燥 分装入培养瓶灭菌 封口,糖溶解,冷却,接种,3.1.3.5 培养基配制,3.1.4 植物组织培养问题分析,（1）玻璃化问题,玻璃化（Vitrification）现象是指植物组织培养过程中因生理失调或病变而出现的一些半透明状、外观异常的试管苗现象，又称过度水化现象。, 由于玻璃苗的组织结构和生理功能异
22、常，因此分化能力低，难以增殖成芽，也难以生根成苗，移栽大田更难成活，已成为组培的一大问题。, 组织培养过程中试管苗的玻璃化现象主要是适应性的生理问题，是不能很好适应培养基和培养环境的结果。 防治措施：P36 5点,玻璃化苗,（2）褐变问题, 褐变（Browning）可分为酶促褐变和非酶促褐变,，主要是酶促褐变。, 酶促褐变是由质体中的酚酶如多酚氧化酶(PPO), 当外值体处于机械损伤等逆境时，细胞膜的结构遭到破坏，酚酶催化多酚类化合物，使其发生氧化形成棕褐色的醌类物质和水；醌类物质经过非酶促聚合，形成黑褐色物质(羟醌与黑色素等)，引起褐变的发生。防治措施：P36-37 5点, 植物组织培养问题
23、分析,催化酚类氧化成醌引起的。,（3）微生物污染, 造成污染的病原菌主要包括外部污染菌和内源菌。微生物污染主要由外植体带菌或培养基灭菌不彻底以及操作人员操作不慎造成。外植体带菌引起的污染与外植体的种类、取材季节、部位、预处理及消毒方法等密切相关。, 应该严格按照无菌操作，取材时应选择嫩梢、新芽或胚作为外植体材料，对外植体进行彻底消毒。 针对内源菌污染，有可以采取以下防治措施：（1）改进外植体消毒方法。结合常规的消毒方法，采用间隙消毒法。即经过一般的消毒过程后，把外植体放在不含激素和维生素的培养基中，培养一段时间后取出，再消毒1次；（2）反复检查培养物。在初代培养成功后要反复检查，不要急于扩大繁
24、殖；（3）使用抗生素。, 植物组织培养问题分析,（4）其他问题,还有一些植物组织培养没有取得成功：无,心插柳柳成荫。目前被子植物组织培养成功的比较多。,然而，裸子植物组织培养成功的比较少，很难脱分化诱导成具有全能性的细胞。许多珍贵或濒危植物还不能进行快繁。, 植物组织培养问题分析,种苗工厂化过程中成本比较高。,植物胚胎培养,指对植物的胚及胚器官（子房、胚珠、胚乳）进行人工离体无菌培养，使其发育成完整幼苗的技术。包括胚培养（成熟胚培养、幼胚培养）、胚珠培养、子房培养、胚乳培养等类型。,3.2 植物胚胎培养,心形胚,子叶形胚,胚培养的意义, 克服远缘杂交中杂种胚的早期夭折 成熟胚培养快速繁殖, 培
25、养物作为转基因受体材料, 理论研究领域（器官发生、胚乳的作用、胚胎切割）,黄瓜远缘杂种幼胚培养,3.2.1 成熟胚培养(mature embryo), 成熟胚指子叶期至发育成熟的胚。其培养条件和操作技术相对简单，属自养型，只需无机盐和糖的培养基。, 实质：胚的离体萌发生长（解除种皮的抑制作用）。, 适用：不易萌发或繁殖的植物，或研究胚和胚乳及子叶的关系等。, 技术流程：将种子或果实 70%酒精表面消毒20-30S 70%升汞或10% NaClO消毒10min 无菌水冲冼8-10遍 无菌操作台上接种在培养基表面。,培养基：Tukey、MS,牡丹成熟胚的离体培养与快速繁殖,Mature embry
26、o culture and rapid propagation of tree peony,3.2.2 幼胚培养(immature embryo), 幼胚指发育早期的胚培养，难度较大, 幼胚剥离时期的选择是关键：确定授粉后天数与胚胎发育的相应关,系，对于远缘杂种胚，要在其夭折前培养。, 幼胚的分离：先取出胚珠，在高倍解剖镜下剥离珠被，取出完整的幼胚, 幼胚的培养：基本技术同成熟胚培养，但培养基成分更复杂，属异养。,（越早越难培养）,培养基：Tukey、MS、B5、Nitsch较高浓度蔗糖、IAA、BA, 50%棷汁,幼胚发育:原胚球形胚心型胚鱼雷胚子叶胚,球形胚前期心型胚前期,球形胚鱼雷胚,
27、被子植物胚乳为双受精三倍体（3n） 裸子植物胚乳在受精前形成单倍体(n),胚乳培养的再生植株倍性如何？,倍性混乱：除三倍体、多倍体外，多数看来是由多种倍性细胞所组成的嵌合体！,可能胚乳培养具有更广泛的变异性！,3.2.3 胚乳(endosperm)培养,胚乳再生植株不一定保持原来倍性。,胚乳培养的意义, 研究胚乳细胞的全能性, 离体条件下研究胚和胚乳的关系 三倍体育种, 胚乳培养也会产生较多的混倍体，可用于染色体工程研究, 胚乳培养发育途径,胚乳消毒 剥离,胚状体发育成苗柚，柑桔和枣不定芽苗大麦, 水稻, 玉米, 苹果, 马铃薯,愈伤组织,形态发生,基本培养基： MS；White,附加2，4-
28、D或NAA 0.52.0，6-BA 0.11.0,3.2.4 胚珠和子房培养,未受精胚珠受精胚珠,愈伤组织,大孢子或卵细胞为单倍体植株发育成种子再生植株,胚珠(ovule)培养包括,%,%,S,胚珠培养步骤,适宜时间摘取子房,70酒精表面消毒30,5次氯酸钠液中灭菌,10分钟,无菌水冲洗数次,无菌条件下取出胚珠,接种于固体培养基,培,养,基本培养基：Nistch ； MS；White,子房(ovary)培养, 未授粉 授粉,ovary culture 包括,子房培养技术要点, 摘取时间：在开花前15天摘下未授粉子房或授,粉后子房。, 灭菌：禾谷类植物用70%酒精擦洗幼穗；双子叶植物,花蕾用饱和
29、漂白粉灭菌15min；子房用70%浸30s，无菌水冲洗后，用0.1%升汞1520min, 再无菌水冲洗，无菌滤纸吸干。, 接种：无菌条件下剥开花蕾，夹出子房并接种于培养,基（ Nistch 、MS、N6、B5，IAA/IBA、2,4-D）。, 培养条件：T26, RH 50-60%，16h散射光。, 毛状根（hairy root）是植株或其器官、组织、单个细胞甚至原生质受发根农杆菌感染后，形成的一种类似头发一样的根组织。毛状根属于激素自养型，在次级代谢产物生产方面具有极大应用潜力。,3.3 Hairy root culture毛状根培养,关于初级和次级代谢产物, 初级代谢产物（Primary
30、metabolites） 是通过初级代谢,产生的维持细胞生命活动必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。在不同种类的细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。任何一种产物的合成发生障碍都会影响细胞正常的生命活动，甚至导致死亡。, 次级代谢产物（Secondary metabolites） 是通过次级代,谢合成的产物，大多是分子结构比较复杂的小分子化合物，例如抗生素、激素、生物碱、毒素等。由于次级代谢产物大多具有生物活性，因此是植物代谢产物研究的重点。,大多数植物次级代谢产物与细胞分化有关。,opine,发根农杆菌诱导毛状根产生机制, 发根农杆菌（Agrobacteriumrhizogenes）：
31、土壤细菌，能侵染大多数双子叶植物和少数单子叶植物。 Ri质粒（root inducing plasmid）中具有, TDNA区(transferred DNA region)含有IAA合成基因tms1、2，能插入到寄主植物基因组中。,LB,ori, Vir区平时处于抑制状态，当受AS激活后，产生一列核酸内切酶，切割产生T-DNA区，融合到植物基因组，在无外源激素下表达产物，刺激植物细胞形成毛状根。在整个过程中Vir区不转移入寄主植物基因组中。,D,Evir,T-DNA,RBHairy root genesand opine synthaseRicatabolism,Ri质粒,A,B,G,C,3
32、.3.1 毛状根诱导方法, 外植体接种法： 叶、茎等外植体与发根农杆菌共培养2-3天，经过抗生素筛选培养和继代培养可产生毛状根。,茎杆接种法： 用种子培养无菌苗，取茎尖培养成植株，去叶和茎尖后在茎杆划出伤口，用发根农杆菌侵染、培养。, 原生质体-农杆菌共培养法： 制备原生质体，培养3-5天后，与农杆菌共培养，经自发激素或抗菌素筛选后形成愈伤组织，在不添加激素的基本培养基上可产生毛状根。,3.3.2 毛状根培养产生次级代谢产物的优点, 毛状根生长快，在培养时无需添加激素，易于培养。, 毛状根分化程度高，次级代谢物产生能力强。, 可通过T-DNA区基因改造，通过基因工程途径提高次级代谢产物含量。,
33、毛状根在药用植物生产方面具有极大应用价值,由于药物野生资源逐年减少以及栽培品种的品质下降，给中成药加工和出口，以及临床应用带来一定的供应困难。,举例： 水母雪莲毛状根培,养生产黄酮类化合物,雪 莲,吉祥如意、圣洁之物,雪莲被视为神物。饮过苞叶上的露珠水滴,则认为可以驱邪除病,延年益寿。高山牧民在行路途中遇到雪莲时,被认为有吉祥如意的征兆,并以圣洁之物相待。,雪莲，别名雪荷花.主要生长于天山南北坡，阿尔泰山及昆仑山雪线附近的高旱冰碛地带的悬崖峭壁之上。3000-5000M海拔以上。我国新疆著名特产。,雪 莲,雪莲中主要成分为黄酮类化合物，具有止咳祛痰、抗炎镇痛、治疗偏瘫、护肝解毒、治疗肝炎/肝硬化、抗癌、延缓衰老等功效。,雪莲药用价值,水母雪莲(Saussures medusa)属菊科凤毛菊属雪兔子亚属植物。雪莲在医药上应用以有数百年的历史。汉族人民多视为治疗风湿关节炎之珍品;维吾尔、哈萨克族则当作妇科良药。,水母雪莲毛状根培养生产黄酮,自然资源有限，生长条件苛刻，很难人工栽培。,因此通过水母雪莲细胞培养生产黄酮,有着重要意义。,Summary in Plant Tissues Culture,
