1、细胞治疗原理及应用基本定义：CIK（ cytokine-inducedkiller，中文名： 自体细胞免疫疗法 多种细胞因子诱导的杀伤细胞），是将人外周血单个核细胞在体外用多种细胞因子（如抗CD3单克隆抗体、 IL-2 和 IFN- 等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞。由于该种细胞同时表达 CD3+和 CD56+两种膜蛋白分子 , 故又被称为 NK细胞样 T 淋巴细胞 , 兼具有 T 淋巴细胞强大的抗瘤活性和 NK细胞的非 MHC限制性杀瘤优点。因此 , 应用 CIK 细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗的首选方案。CIK细胞中的效应细胞CD3+和 CD56+细胞在正常人外周血中极其
2、罕见， 仅 1% 5%。2 特点CIK 细胞中的效应细胞CD3+CD56+细胞在正常人外周血中极其罕见，仅1%5%，在体外经多因子培养2830 天， CD3+CD56+细胞迅速增多，较培养前升幅可达1000 倍以上。实验证明，扩增出的CD3+CD56+细胞来源于 CD3+CD56-T细胞，而非 CD3-CD56+NK细胞。同时发现在 CD3+CD56的- T 细胞中，除 CD4+CD8-T细胞外，其余三种 T 细胞亚群（ CD4-CD8+、CD4-CD8-、CD4+CD8+）均可通过体外多因子培养而获得 CD56分子的表达，而由于 CD4+CD8+细胞和 CD4-CD8-细胞在正常人外周血中含
3、量极低而间接提示此 CD3+CD56+细胞绝大多数来源于外周血中CD4-CD8+T细胞。而由于 CD4-CD8-T细胞在培养 1 个月后有近 56%的 T 细胞同时表达 CD56和 CD3，表明其也是 CIK 细胞的重要来源。比较 CD3+CD56+CIK细胞中表达 CD8+和 CD8-,的两群细胞其杀瘤活性没有显著性差异， 提示 CIK 细胞的细胞毒性与 CD3CD56表达成相关趋势，而与 CD8的表达未表现出相关性。1.CIK 细胞增殖速度快，抗肿瘤活性细胞可大量增殖，且细胞活性也大大增强。2.CIK 细胞具有识别肿瘤的机制，对正常的细胞无毒性作用。3. 杀瘤谱广，可用于白血病、淋巴瘤、肺
4、癌、胃癌、肠癌等多种肿瘤的治疗，对多重耐药肿瘤细胞同样敏感。4. 是典型的个性化生物治疗模式。 将这类细胞回输后，还能使机体免疫能力提高，产生特异的抗病毒作用，从而对肿瘤治疗施以双重的作用。5. 由于 CIK 细胞是活化的自体细胞，用起来非常安全。3 杀伤原理CIK 细胞能够通过三种途径杀灭肿瘤细胞和病毒感染细胞：CIK 细胞对肿瘤细胞和病毒感染细胞的直接杀伤： CIK 细胞可以通过不同的机制识别肿瘤细胞，释放颗粒酶 / 穿孔素等毒性颗粒，导致肿瘤细胞裂解。CIK 细胞释放的大量炎性细胞因子具有抑瘤杀瘤活性： 体外培养的 CIK 细胞可以分泌多种细胞因子，如 IFN- 、TNF-、 IL-2
5、等，不仅对肿瘤细胞有直接抑制作用，还可通过调节机体免疫系统反应性间接杀伤肿瘤细胞。CIK 细胞能够诱导肿瘤细胞的凋亡： CIK 细胞在培养过程中表达 FasL（型跨膜糖蛋白）通过与肿瘤细胞膜表达的 Fas（型跨膜糖蛋白）结合，诱导肿瘤细胞凋亡。CIK 细胞发挥作用的三种途径4 杀瘤特点编辑应用 LAK细胞是目前较为普及的肿瘤过继免疫治疗方案，广泛使用于黑色素瘤、肾细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、肺癌和结肠癌。因LAK细胞扩增数量有限，杀瘤活性也较 TIL 等 T 淋巴细胞为低，故虽然杀瘤谱广，但效果局限。相比较而言，TIL 细胞本身较 LAK细胞具有更强大的抗瘤效力，但由于杀瘤谱窄，制备困难，及在收集
6、过程中可能导致的功能改变而限制了其临床应用价值。与上述两种效应细胞过继免疫治疗相比，CIK 细胞具有独特的优势，列举如下。1. 增殖速度快CIK 细胞在培养过程中加入IFN- 、IL-1 、抗 CD3、McAb、IL-2 等多因子后，细胞增殖速度迅速加快，远超过LAK细胞。在培养第22 天增殖曲线达顶峰，约增加 100 倍，其中 CD3+CD56+细胞不仅绝对数量增加1000 倍以上，且所占百分比也大幅上升，培养至2830 天时达平台期，细胞毒活性亦达峰值，而LAK细胞培养前后数量没有明显增加。2.杀瘤活性高CIK 细胞是以CD3+CD56+T细胞为主的异质细胞群，大量体内外实验证实CIK 细
7、胞较以 NK细胞为主的 LAK细胞具备更强大的杀瘤活性，而且其体内杀瘤细胞毒性的维持不必依赖大剂量外源性 IL-2 的持续给予。体外实验中，任欢和 Lu 等均发现在体外等数量的 CIK 细胞比 LAK细胞对肿瘤细胞系的杀伤能力稍高或相近，但因 CIK 细胞在培养过程中 CD3+CD56+效应细胞增长迅速， 故 CIK 细胞的总杀伤单位（ TLU）为 LAK 细胞的 73 倍甚至更高，其杀伤效率显著高于 LAK细胞。肿瘤克隆抑制实验显示， CIK 细胞的瘤细胞抑制 Log 指数为 2.5 3.5 ，较 LAK细胞的瘤细胞抑制指数高 2 个 Log。体内实验发现，对于在严重联合免疫缺陷小鼠身上构建
8、的人类 B 细胞淋巴瘤 SU-DHL4模型，CIK 细胞在清除荷瘤鼠体内肿瘤病灶，抑制转移，延长生存期等方面的作用均明显优于 LAK细胞。3. 杀瘤谱广CIK 细胞虽然以 CD3+CD56+T 细胞为主要效应细胞， 但却没有 T 淋巴细胞杀伤时的 MHC限制性，故对于多种肿瘤细胞系（包括 NK敏感的 K562和 NK不敏感的 Hela 、HL60、人 T 细胞急淋白血病细胞系 OCRF-CEM，人淋巴瘤细胞系 OCI-LY8、LAM53，人结肠癌细胞系 HT-29、CR75，人肾癌细胞系 A704）和新鲜肿瘤组织均表现出强大的杀伤活性。4. 对多重耐药肿瘤细胞同样敏感Wolf 用阿霉素和长春新
9、碱诱导出多重耐药细胞系K562/DOX和 CCRF-CEM-VBL，发现 CIK 细胞对化疗药物敏感的亲本细胞和不敏感的转化细胞均具有强大的杀伤活性，两者比较无差别。5. 杀瘤活性不受 CsA、 FK506等免疫抑制剂的影响Mehta 观察到免疫抑制剂 CsA和 FK506虽然可以抑制抗 CD3单抗介导的 CIK 细胞脱颗粒过程，却不影响靶细胞诱导的 CIK 细胞脱颗粒，并且 CIK 细胞对靶细胞的杀伤活性不会因此降低。6. 对正常骨髓造血前体细胞毒性很小Seheffold通过 CFU-GM形成实验检测 CIK 细胞对骨髓造血前体细胞的影响，发现 CIK 细胞对 K562细胞的杀伤强度高达 3
10、 级，但对 GM-CFU仅有不足 1 级的抑制。 Holye 也证实 CIK 细胞对正常髓系克隆生成几乎没有影响， 只是对红系的生成显示出轻度抑制，这可能与 CIK 细胞自身分泌较高水平的 IFN- 有关。7. 能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞 Fas-FasL 凋亡已证明过继免疫治疗失败的一个重要原因是过继效应细胞被肿瘤细胞表面表达的某些蛋白（主要是 FasL）诱导凋亡，而 CIK 细胞虽然在 Fas 被占据后会引起少量细胞凋亡，但对其杀瘤细胞毒性没有明显影响。 Verneris 的实验提示 CIK细胞内有抗凋亡基因表达，并检出多种保护基因，如cFLIP、Bcl-2 、Bcl-X1 、DAD1和
11、 survivin的转录水平上调。同时发现CIK 细胞具备合成 FasL 的能力，CIK 细胞培养上清中可以检测到具生物学活性的水溶性FasL，表明 CIK 细胞可以对抗体内 FasL 阳性肿瘤所引发的效应细胞活性下降甚至消失。5 影响因素编辑1. 外源性细胞因子的补充CIK 细胞的体外扩增需要外源性细胞因子，如IL-2 、IL-7 、IL-12 等的辅助，这些因子控制着人免疫系统内各种抗原特异性细胞的扩增及其生物学活性。外源性IL-2、IL-7、IL-12可以显著促进淋巴细胞的生长，尤其存在有IL-2和 IL-7条件下CIK 细胞的增殖率为高，而外源性, IL-2、 IL-7、 IL-12对
12、 CIK 细胞的细胞毒活性没有影响。外源性 IL-2 和 IL-7 的刺激会降低 CIK 细胞表面相应受体的表达量，而 CD28分子在 IL-7 存在条件下较 IL-2 时表达更高。 IL-12 会降低 CIK 细胞表面 ICAM-1 的表达， IL-7 则会提高 CD56的表达。与 IL-2 相比， IL-7 可明显增加 CD4+细胞的比例。虽然外源性 IL-2 、IL-7 和 IL-12 培养过程中均可出现少量凋亡细胞，但有研究显示外源性IL-12 的添加会增加 CIK 细胞中坏死细胞的比例。抗 CD3McAb不仅在 CIK 细胞培养过程中起着重要作用， 在提高 CIK 细胞对白血病及淋巴
13、瘤的杀伤敏感性上同样具有促进作用。 Lefterov 将抗 CD3McAb与靶细胞预先共同孵育可增加 CIK 细胞对其的杀伤敏感性，而且这种增强作用可以被抗FcR的抗体（如抗 CD36、抗 CD32）所部分阻断，间接证明抗CD3McAb引发的杀伤活性增高与 FcR 介导的抗体结合有关。2. 多种细胞因子基因的转染由于 CIK 细胞扩增对外源性细胞因子有依赖， 因此通过基因转移方法将相关基因转入 CIK 细胞，不仅可减少外源性细胞因子的使用量， 还可提高 CIK 细胞自身的抗瘤活性。IL-7 ：Fitke利用改进的腺病毒转基因系统将人IL-7 基因转染 CIK 细胞，发现转染后细胞可以生成较高浓
14、度IL-7 ，最多者可达 1 100pg/106cell/24h。合成的IL-7 具有明显的生物学活性，可以促进转染CIK 细胞的增殖，显著高于未转染细胞。外源 IL-7 基因的表达同时改变了CIK 细胞对其他细胞因子的分泌，其中尤以 TNF- 分泌显著升高，这一现象在未转染CIK 体外添加 IL-7 时并未观测到。虽然转染后 CIK 细胞表面各种与细胞杀伤活性相关的表面抗原，如 ICAM-1 等与未转染 CIK 细胞相比无明显变化，但转染后 CIK 细胞在对多种肿瘤细胞系如肾癌、恶性黑色素瘤以及结肠癌的杀伤能力较未转染 CIK 细胞有明显增强。 IL-2 ：Lu 等发现 CIK 细胞培养过程
15、中 CD56分子的表达是 IL-2 依赖性的，但单独 IL-2 的存在却会降低培养后 CIK 细胞的表型变化幅度。尽管有实验指出 CIK 细胞的体内治疗并不需要 IL-2 体外持续供给， 但 Zoll 等的研究结果表明， 体外培养中 IL-2 对 CIK 细胞的增殖和杀伤功能有促进作用。 Schmidt-Wolf 将包含人 IL-2 基因片段的重组质粒用电穿孔法导入 CIK 细胞治疗转移性实体瘤，发现转染后细胞可分泌较高水平的 IL-2（ 330-1 800pg/106 cell/24h ，平均达 836pg/106cell/24h）。虽然转染前后CIK 细胞表面各种膜蛋白表达并无显著变化，但
16、体外检测转染后 CIK 细胞在增殖率和细胞杀伤活性上均高于未转染细胞。6 制备流程CIK 细胞制备流程抽取患者的外周血，在37， 5%的二氧化碳培养箱中孵育2h，使用高速离心机分离，收集悬浮细胞，在体外（模拟人体内环境），加入多种细胞因子如CD3单抗， IFN-R， IL-2 等培养，每隔 2-3 天换一次培养液，第 7、11、13、15 天收集 CIK 细胞， CD3+和 CD56+细胞迅速增多，较培养前升幅可达 1000 倍以上。7 发展历程1985 年美国外科医生首次发现大剂量的 IL-2 在体外可以将淋巴细胞培养成具有很强肿瘤杀伤作用的细胞， 称为 LAK细胞。以后发现在培养液中加入
17、CD3单克隆抗体可以将这些细胞的肿瘤杀伤活性提高十几倍， 扩增的数量也大幅提高， 这种细胞称为 CD3AK。在这个基础上再在培养液中加入 INF-r 、 IL-1 等细胞因子 , 得到表达 CD3CD8CD56阳性的异质细胞群，这些细胞称为 CIK，相比 LAK细胞增殖倍数更多，杀毒活力更强。1991 年美国斯坦福大学Schmidt Wolf等人首次报道了CIK 细胞。8 临床应用早在 1996 年国内已有 CIK 细胞治疗技术临床应用的研究论文发表，目前国内已有超过百家的医疗单位开展了该项治疗技术的相关临床应用与研究。根据国际国内细胞治疗临床应用的进展状况， 2009 年 5 月 1 日卫生
18、部颁发执行的医疗技术临床管理应用办法 将“自体免疫细胞治疗技术”列为三类医疗技术。 2肝癌患者接受手术联合CIK 治疗后 1 年、3 年、5 年的无病生存期比较 , 具体如图：9 适应症CIK 细胞治疗属于过继细胞免疫疗法， 由于 CIK 细胞溶瘤作用是非 MHC限制性的，即不受肿瘤组织类型的限制， 因此对任何一种肿瘤均有杀伤作用， 但对高抗原表达的癌症疗效最好，如：髓性白血病、黑色素瘤、肾细胞癌、转移性肾癌、非何杰金氏淋巴瘤等。其它癌症如肺癌、结肠癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、大肠癌等， CIK 细胞治疗亦有较好的疗效。 CIK 细胞治疗适用于任何一期的癌症患者，但对早期肿瘤患者或经过手术及放化疗
19、后肿瘤负荷较小的患者效果好。它对于手术、放化疗或造血干细胞移植后患者体内微小残留病灶的清除， 防止癌细胞扩散和复发，提高患者自身免疫力， 减少毒性反应等方面具有重要作用。 某些不适合手术、不能耐受放化疗的中晚期肿瘤患者， CIK 细胞治疗可以提高其生活质量，延长带瘤生存时间。CIK 细胞通过直接杀伤、 分泌多种细胞因子等直接抑制肿瘤细胞生长，诱导肿瘤细胞凋亡起到治疗作用。大多数执行杀伤功能的细胞在回输后立即执行其功能，半衰期约 2 周至一个月。回输的细胞中包括一部分记忆细胞，可存活几年至几十年，当遇到相应刺激后，迅速在体内活化，杀伤靶细胞。所以CIK 细胞治疗的疗程间隔原则上为一个月， 建议首
20、先间隔一个月连续做三个疗程，以后每半年做一个疗程。DC-CIK定义DC-CIK生物免疫疗法 ( 或 DC+CIK)是指与 DC细胞共培养的 CIK 细胞。细胞因子诱导的杀伤细胞（ cytokine-inducedkillers,CIK）是一类抗肿瘤抗病毒效应细胞，能在体外被诱导并大量增殖。树突状细胞（dendritic cell,DC）是有效的专职抗原提呈细胞，成熟的DC可以通过型组织相容性抗原（MHC-）等途径提呈肿瘤抗原，有效抵制肿瘤细胞的免疫逃逸机制。CIK 细胞和 DC细胞是细胞免疫治疗的 2 个重要组成部分，两者联合可确保高效的免疫反应。作用随着细胞制备技术的日趋完善， DC-CIK
21、 细胞过继免疫治疗在临床逐渐开展，相关报道可见。实验研究方面， Marten 实验研究表明： DC和 CIK 功培养可以同时促进 CIK 细胞和 DC细胞的增殖和免疫功能。张嵩等的动物实验研究表明：化疗后应用 DC-CIK细胞可有效抑制肿瘤细胞生长， 甚至使肿瘤完全消失；而且 DC-CIK 细胞的抗肿瘤效应对集体免疫系统功能不产生危害， 在当前对肿瘤特异性抗原了解相对较少的情况下，应用 DC-CIK 细胞作为肿瘤放化疗和手术后的辅助治疗有重要的临床意义。白血病中赵春华等研究表明：与 DC共培养可使 CIK 细胞获得更高的增殖速率和更强的体内外抗肿瘤活性， DC-CIK细胞可以作为一种临床有效的
22、抗白血病免疫治疗策略。童春容等临床研究显示： DC-CIK 细胞治疗具有明显清除微小残留白血病细胞防止复发的作用，并且静脉输注安全。肿瘤中将 CIK 细胞和同源 DC细胞共培养后即可获得DC-CIK 细胞。它既可促进DC细胞的成熟，更能促进 ClK 的增殖，并加强其抗肿瘤活性。 DC细胞是机体免疫应答的始动者，能够诱导持久有力的特异性抗肿瘤免疫反应； CIK 细胞可通过非特异性免疫杀伤作用清除肿瘤患者体内微小残余病灶， 所以负载肿瘤抗原的 DC与 CIK 的有机结合（即 DC-CIK细胞）能产生特异性和非特异性的双重抗肿瘤效应。一、 DC治疗对肿瘤治疗的原理DC可以高表达 MHC-类和 MHC
23、-类分子， MHC分子与其捕获加工的肿瘤抗原结合，形成肽 -MHC分子复合物， 并递呈给 T 细胞，从而启动 MHC-I类限制性 CTL 反应和 MHC-类限制性的 CD4+Thl 反应。同时， DC还通过其高表达的共刺激分子 (CD80/B7-1、 CD86/B7-2、 CD40等) 提供 T 细胞活化所必须的第二信号，启动了免疫应答。DC与 T 细胞结合可大量分泌 IL-12 、 IL-18 激活 T 细胞增殖，诱导 CTL生成，主导 Th1 型免疫应答，利于肿瘤清除；激活穿孔素P 颗粒酶 B 和 FasL/Fas 介导的途径增强 NK细胞毒作用；DC分泌趋化因子 (Chemotactic
24、 Cytokines ， CCK)专一趋化初始型 T 细胞促进 T 细胞聚集，增强了 T 细胞的激发。保持效应 T 细胞在肿瘤部位长期存在，可能通过释放某些抗血管生成物质 ( 如 IL-12 、IFN- ) 及前血管生成因子而影响肿瘤血管的形成。上述 CCK进一步以正反馈旁分泌的方式活化 DC，上调 IL-12 及 CD80、CD86的表达；同时 DC 也直接向 CD8+T细胞呈递抗原肽，在活化的 CD4+ T细胞辅助下使 CD8+T 细胞活化， CD4+ 和 CD8+T细胞还可以进一步通过分泌细胞因子或直接杀伤，增强机体抗肿瘤免疫应答。二、 CIK 治疗对肿瘤治疗的原理 . CIK 细胞能以
25、不同的机制识别肿瘤细胞通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的肿瘤细胞膜进行胞吐。实现对肿瘤细胞的裂解 ;.通过诱导肿瘤细胞凋亡杀伤肿瘤细胞; . CIK 细胞分泌 IL-2 、 IL-6 、 IFN- 等多种抗肿瘤的细胞因子；. CIK 细胞回输后可以激活机体免疫系统，提高机体的免疫功能。三、基本流程确定患者的入选标准相关检查细胞动员细胞采集分离外周血单个细胞分别培养树突细胞和淋巴细胞树突细胞和淋巴细胞共同培养获得DC-CIK细胞细胞回输疗效评估随访四、 DC-CIK生物免疫疗法的适用人群关于 DC-CIK 细胞治疗的适用人群，首先，就入选方面适用于各类恶性肿瘤疾病患者。其次，排除标准有严重心脏病，包
26、括近期内患心肌梗塞、失代偿性心力衰竭、严重心律失常、顽固性不稳定型心绞痛等；近期内患有急性脑出血者；严重哮喘或其他严重呼吸功能不全者；如进行介入治疗，对造影剂过敏者。肝炎中临床动态观察慢性乙肝患者 DCCIK 细胞的增殖及杀伤活性发现， 患者 DC CIK 细胞的增殖和杀伤活性均低于正常人。推测 DC CIK 细胞可能通过以下机制发挥抗肝炎病毒作用：体外培养 DC CIK 细胞过程中采用的 CD。单抗 (MabCD3)及 II -2 等细胞因子直接激活扩增 DCCIK，回输后直接杀伤病毒感染的细胞；研究显示 MabCD3+、1L-2 培养激活的 T 细胞分泌多种细胞因子如 INF-7 、IL一
27、 2 等。这些细胞因子可直接渗透细胞内抑制或杀伤病毒或通过改善体内的细胞因子环境，上调病毒感染细胞的 MHC分子及共刺激分子，激活扩增病毒特异性DCCIK、巨噬细胞、自然杀伤细胞等，从而清除病毒。生物免疫疗法治疗流程手术前 1-2 天采集患者外周血50-100ml ，送达实验室；DC-CIK治疗流程于实验室进行分离、培养DC/CIK 细胞；手术当天无菌切取患者肿瘤组织，送往实验室制备肿瘤抗原并封存；DC细胞负载抗原培养至第9 天，收获 3 份，取 1 份患者静脉回输，其余两份每隔 5-7 天患者静脉回输；CIK 细胞培养至第 12-15 天收获，连续3 天患者经脉回输。肿瘤分型综合治疗体系北京
28、四六六医院肿瘤医学中心临床中： 对“肿瘤”首先采用“肿瘤分型综合治疗体系”，肿瘤综合治疗的目的有根治性治疗和姑息性治疗两类。 一旦确诊为肿瘤后，需要进行系统而全面的辅助检查， 并初步评估出病人所患肿瘤的经验疗效和治疗目的，如果肿瘤有治愈的可能， 就应以根治为目的， 采用各种有效治疗方法予以积极治疗， 千方百计地争取达到治愈。 但由于现阶段许多晚期肿瘤的治疗属于姑息性治疗，以延长病人的生存时间、提高生活质量为基本目标，因此，在制定综合治疗方案时不仅要重视病人的近期疗效， 更要重视病人的远期疗效和生活质量。并不是所有的肿瘤都需要综合治疗， 有些没有播散的早期肿瘤和转移率很低的局限期肿瘤， 单一治疗
29、方法就能取得很好的治疗效果， 一般就不需要进行综合治疗。如皮肤基底细胞癌的转移率很低， 单一手术治疗就常能治愈。 胃粘膜内癌单纯手术切除的 5 年生存率非常高。这也极大程度上降低了患者的治疗费用。表型特点1. 增值速度快： CIK 细胞在培养过程中加入抗CD3McAb,IL-2 等多因子后，细胞增值速度迅速，远超过 LAK细胞。在培养第 22 天增值曲线达顶峰，约增加 100 倍，其中 CD3+CD56+细胞不近绝对数量增加 1000 倍以上，且所占百分比也大幅上升，至培养 28-30 天时达平台期，细胞毒活性亦大顶峰值。实验证明，扩增出的 CD3+CD56+细胞来源于 CD3+CD56-T细
30、胞，而非 CD3-CD56+NK细胞。同时发现在CD3+CD56-的, T 细胞中，除（ CD4-CD8-T细胞外，其余三种T 细胞亚群（ CD4-CD8+、CD4-CD8-、CD4+CD8+）均可通过体外多因子培养而获得CD56分子的表达， 而由于 CD4+CD8+细胞和 CD4-CD8细-胞在正常人外周血中含量极低而间接提示此 CD3+CD56+细胞绝大多数来源于外周血中 CD4-CD8+T细胞。而由于 CD4-CD8-T细胞在培养 1 个月后有近 56%的 T 细胞同时表达 CD56和 CD3，表明其也是 CIK 细胞的重要来源。比较 CD3+CD56+CIK细胞中表达 CD8+和 CD
31、8-,的两群细胞其杀瘤活性没有显著性差异，提示 CIK 细胞的细胞毒性与 CD3CD56表达成相关趋势， 而与 CD8的表达未表现出相关性。2. 杀瘤活性高： CIK 细胞是以 CD3+CD56+T细胞为主的异质细胞群，大量体内外实验证实 CIK 细胞较以 NK细胞为主的 LAK细胞具备更强大的杀瘤活性，而且其体内杀瘤细胞毒性的维持不必依赖大剂量外源性 IL-2 的持续给予。体外实验中发现等数量的 CIK 细胞比 LAK细胞对肿瘤细胞系杀伤能力稍高或相近， 但因 CIK细胞在培养过程中增长迅速，故 CIK 细胞的总杀伤单位为 LAK细胞的 73 倍甚至更高，其杀伤效率显著高于 LAK细胞。肿瘤
32、克隆抑制实验显示， CIK 细胞的瘤细胞抑制 Log 指数为 2.5-3.5 ，较 LAK细胞的瘤细胞抑制指数高 2 个数量级。体内实验发现，对于在严重联合免疫缺陷小鼠身上构建的人类 B 细胞淋巴瘤 SU-DHL4 模型， CIK 细胞在清除荷瘤鼠体内肿瘤病灶，抑制转移，延长生存期等方面的作用均明显优于 LAK细胞。用例高燕、魏来等随机选择 16 例慢性乙型肝炎 (CHB)患者用自体免疫活性细胞回输法治疗，追踪 52 周。在完整随访 14 例患者中， 4 例患者治疗前后完成 2 次肝穿刺，其中 1 例患者结果提示治疗后肝细胞坏死和小叶内炎症程度明显减轻， 纤维化程度改善。 其余 3 例肝脏组织学变化不明显， 但无加重或恶化。 经过 52 周随访， 14 例患者中有 6 例 HBVDNA阴转。抗 HBe血清转化和 AIT 正常化比率为4286 。没有出现治疗相关的不良反应。结论：自体 DCCIK 细胞过继免疫治疗不会导致慢性乙肝患者肝组织损伤， 同时，可通过某种非细胞毒性机制抑制乙肝病毒复制。
