1、 高丽参的耳蜗毒性动物实验研究作者:杨楚胡吟燕郭维维江远仕翟所强【摘要】目的动物实验高丽参有耳毒性作用。方法以高丽参喂养组与庆大霉素注射组及对照组豚鼠,观察听性脑干反应阈值,其听功能的,耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶染色方法和扫描作者:杨楚 胡吟燕 郭维维 江远仕 翟所强【摘要】 目的 动物实验高丽参有耳毒性作用。方法 以高丽参喂养组与庆大霉素注射组及对照组豚鼠,观察听性脑干反应阈值,其听功能的,耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶染色方法和扫描电镜观察耳蜗形态学,综合评价高丽人参有无耳蜗毒性。结果 高丽参喂养组和对照组的ABR、毛细胞形态差异无性,和庆大霉素组差异有性。结论 高丽参对豚鼠无的耳毒性作用。【关键词】 高
2、丽参 耳蜗毒性 动物 Study f hlea txiity f radix panais quinqueflii ith anial experient 【Abstrat】 bjetive T investigate the hlea txiity f radix panais quinqueflii by anial experient.ethds 20 guinea pigs ere divided t fur grups. Radix panais quinqueflii feeding grup(inluding high dse grup and l dse grup), Gent
3、aiin injetin grup and nral ntrast grup ere pared. The ethds inluded exaining ABR t find ut the hange f hearing funtinal, hlea surfae preparatin fr Suindehydrgenase dyeing and sanning eletrn irspe t bserve the hange f hlea rphlgy, hih all used t estiate the hlea txiity f radix panais quinqueflii.Resu
4、lts There asnt signifiant differene beteen radix panais quinqueflii feeding grup and nral ntrast grup in ABR and hlea rphlgy, but the t grups ere respetively signifiant differene pared t Gentaiin injetin grup.nlusin Radix panais quinqueflii isnt evidene hlea txiity fr guinea pig. 【Key rds】 radix pan
5、ais quinqueflii hlea txiity anial 高丽人参原产于韩国,补气固脱的作用,是民间常用的补品,但临床中有一小人服用后耳鸣、耳聋。 ,国内外尚无此类报告,厂家也无该药对耳蜗毒性的说明。高丽人参有耳蜗毒性,本动物实验,并与庆大霉素,观察听性脑干反应阈值,其听功能的,耳蜗铺片琥珀酸脱氢酶染色方法和扫描电镜观察耳蜗形态学,综合评价高丽人参有无耳蜗毒性。 1 材料和方法 1.1 动物分组 红目白色豚鼠 20 只,均为雄性,体重 260320g,耳廓反射。随机分 4 组,每组各 5 只:(1)高丽人参低剂量组 8g/(kgd);(2)高丽人参高剂量组 16g/(kgd)。每天经
6、口喂服高丽人参煎剂 1 次,连续 14 天。药物煎制方法:高丽人参切片冷水浸泡 2h,煮沸后文火 2h,取液,2 次煎液浓缩成 18.4g/10l,存放冰箱。(3)庆大霉素对照组: 100g/(kgd),大腿内侧肌肉内注射,每天 1 次,连续 14 天。(4)另设一对照组。 1.2 听功能测试每组动物用药前,停药后 24h 和 7 天后活杀前均行 ABR的阈值测试。用 HIS SARTEP2.22 RK STATIN 记录 ABR。选择交替短声 lik 刺激,刺激重复率21.1 次/s,平均叠加次数 512,扫描 10s,滤波带宽:1003000Hz,记录电极置于颅顶,参考电极置于刺激侧耳垂,
7、地线接对侧耳垂,耳机距外耳道口 3。 1.3 形态学观察 标本制作方法:动物连续给药 14 天,停药 7 天后听功能检查后断头处死,每组取一只做电镜标本,日本 SE-800 扫描电镜观察,其余均行耳蜗铺片,蜗管内灌注 SDH 作用液染色,固定,解剖显微镜下剥去耳蜗骨壳,去除螺旋韧带和前庭膜,将耳蜗分段制成耳蜗铺片,光镜观察及毛细胞记数。毛细胞记数从钩端开始,连续观察 16 个视野,记录毛细胞的缺失数及各组实测的外毛细胞总数。判断毛细胞的缺失标准是:毛细胞的轮廓不清或消失无蓝色颗粒。1.4 统计学方法 ABR 阈移值及毛细胞缺失数按秩和检验统计学。 2 结果 2.1 各组动物 ABR 阈值测定
8、见表 1。表 1 各组动物 ABR 阈值测定 (xs,dB SPL)表 1 结果可看出,高丽人参实验低剂量组 8g/(kgd)和高剂量组 16g/(kgd),用药后 ABR阈值稍增高(阈移 10dBSPL) ,与对照组差异无性(P0.05) ,庆大霉素组用药后 ABR 阈值增高(阈移 10dBSPL) ,与高丽人参低剂量组和高剂量组对比差异有极性(P 0.01) ,高丽人参低剂量组与高剂量组差异无性(P0.05) 。 2.2 耳蜗铺片观察结果 见表 2。 表 2 耳蜗毛细胞缺失数 注:高剂量组 3 只,低剂量组 2 只,对照组 2 只动物在实验过程中死亡 从表 2 外毛细胞缺失数可以看出高丽人
9、参低剂量组 8g/(kgd)和高剂量组 16g/(kgd)与对照组差异均无性(P0.05)而与庆大霉素对照组差异均有性( P0.01) ,高丽人参高低剂量组毛细胞缺失数间差异无性(P 0.05) ,在耳蜗铺片中高丽参组和对照组内毛细胞均无损伤,庆大霉素组可见内毛细胞损伤缺失。 2.3 扫描电镜观察结果 高丽人参低剂量组 8g/(kgd)和高剂量组 16g/(kgd)和对照组未见异常,庆大霉素对照组可见外毛细胞缺失:1 耳自钩端至 1圈外毛细胞纤毛缺失,1 圈上内毛细胞纤毛缺失; 2 圈下以散在外毛细胞纤毛缺失为主,内毛细胞纤毛缺失;1 耳可见钩端至 1 圈下外毛细胞纤毛缺失, 1 圈上外毛细胞
10、纤毛大缺失,内毛细胞纤毛缺失。 3 高丽参是五加科人参属植物人参(PANAX GINSENG .A. EGER)的根1 ,生产于韩国,又称别直参,味甘微苦,性温,大补元气、固脱生津、安神等作用,是我国民间常用补品,文献报道其毒性作用很小,长期服用可玫瑰疹、瘙痒、眩晕、头痛、体温升高及出血等症状人参中毒综合征。在临床工作中有一小患者服用高丽参后耳鸣、耳聋,国内外尚无高丽参有耳蜗毒性的专项报道24 ,本实验对比高丽人参高、低剂量与对照及庆大霉素对动物耳毒性作用对比,听功能检测、耳蜗的形态学观察。实验结果表明:耳蜗形态学结果与听功能检查结果,高丽参对豚鼠无的耳毒性作用。但这无法解释临床中所见的那些患
11、者耳鸣、耳聋的原因,与的实验剂量低,观察短及给药方法系,这仍有待探讨。 【参考文献】 1 王裕生.中药药理与应用,北京:卫生出版社, 1998,12-27. 2 顾瑞,王忠植,顾之年.听力学的发展和现状.耳鼻咽喉科杂志, 1989,24(5 ):276-268. 3 Hanter-Duvar I,unt RJ.Eletrn irspi assessent f the hlea se tehniques and results.Ata tlrygnl, 1978,351:3. 4 Stekell ,Engstr H, Ades H.Patterns f hair ell daage after intense auditry stiulatin.Ann trhin larygnl,1969,78:114.