1、细胞治疗及干细胞 库 发展现状 实 验室产品集团 赛默飞世尔中国 800 810 5118 400 650 5118 59 pdf 2 Channel ThermoFisher的产品和服务 电 子商 务 客 户 服 务 配送 现场 服 务 试剂 仪 器 设备 耗材 软 件 Products 3 ThermoFisher在中国 ThermoFisher全球 100余亿美元年营收 40个国家 35 000多名员工 150个国家 350 000多个客户 美国财富 234位 ThermoFisher中国 1 400 名员工 6个生产工厂 2个物流中心 7个销售办公中心 2个客户体验中心 上海 北京 1
2、个技术研发中心 ThermoFisher重点产品线 科学仪器 过程仪器 环境仪器 生命科学试剂 实验室产品 专业诊断 2005 2010 2006 2007 2008 2009 1020 名员工 1116 名员工 1404 名员工 2004 262名员工 467名员工 554名员工 907名员工 广州 香港 成都 上海 北京 东莞 兰州 沈阳 济南 武汉 销售 办公中心 销售 办公中心 工厂 客户体验中心 4 LED LCD LSP LH SP Troyer 2009 Lu 2006 Karahuseyinoglu 2007 Jo 2008 Weiss 2006 Majore 2009 Lu
3、2006 Mitchel 2003 Periera 2008 Periera 2008 Petsa 2009 Qiao 2008 Seshareddy 2008 Friedman 2007 Nekanti 2009 12 干细胞治疗适用症 机理及临床细胞使用方法 适用情形 器官组织功能衰退性疾病 如帕金森综合征 晚期肝脏疾病 自体免疫性疾病 如牛皮癣 系统性红斑狼疮 组织物理损伤 如皮肤烧伤 关节软骨磨损 禁忌症 恶 性 肿 瘤 可能的疗效机理 细胞因子分泌 分化 免疫调节 细胞迁徙 临床细胞使用方法 引入方法 局部引入 介入移植 系统引入 静脉滴注 干细胞分化状态 预分化 未分化 条件培养基
4、 13 临床用 细胞制备过程中安 全 性基本考 虑 对接受治疗的患者的保护 减少外源微生物感染细胞的可能 性 支原体 细菌等 提高细胞的生物活性 降 低细胞培养液中的残留物质 避免发烧 严重过敏等不良反应 对其它患者 操作 者及环境的 保护 降低患者传染性的样本之间交叉感染的几率 减 少患者具有传染性的细胞和组织样本对环境和操作者的潜在威胁 14 细胞治疗中一些需要进一步完善的地方 细胞制备规范性 操作 设备耗材 试剂 操作 不同个体来源的细胞混合培养 细胞传代次数过多 细胞活性检测仅使用胎盘蓝而未进一步检测凋亡 细胞生长密度过大 细胞冻存方法不规范 设备与耗材 使用超净台培养病人细胞 细胞培
5、养重复使用移液管 培养瓶 离心管等一次性耗材 冻存管液氮储存的样品交叉感染 培养病人细胞的培养箱不及时灭菌 试剂 培养基体系尚未完善和标准化 无血清培养与血清替代品的选择 血清选择使用不够严格 干细胞冻存过程中血清浓度过高 细胞临床应用方案 针对不同疾病和脏器的细胞移植方案的研究开发 对潜在不良反应的进一步防范 与其他疗法的配伍 复苏后的细胞不经培养立即注射 治疗机理的进一步研究 治疗机理的深入研究 细胞制剂的开发 15 干细胞 组织样本库 样本种类及冷冻技术 样本种类 提纯的生物大分子 细胞悬浮液 片状组织及颗粒状组织小块 大块组织或器官 样本内保护的对象 生物大分子 活细胞 活组织微观结构
6、 冷冻伤害 冰晶损伤 intracellular ice damage 冷冻速度过形成快较多冰晶 直接伤害细胞和组织微观结构 溶液损伤 solution damage 冷冻速度过慢引起 细胞内外溶液由于部分水形成冰晶而造成生物液体渗透压升高 冷冻技术 程序降温 programmed freezing 分步降温 stepwise freezing 细胞和薄片状组织和器官 玻璃化冷冻 vitrification 细胞 组织和器官 急冻 snap frezing 生物大分子 冷冻剂 渗透性 快速渗透入细胞内的小分子 如 DMSO 甘油 乙二醇等 非渗透性 PVP 蔗糖 聚乙二醇等有机大分子 16 干
7、细胞库 组织样本库 样本储存温度 17 冻存相关产品选择 800C冰箱 对运行故障率有较高要求 对温度稳定性 温度波动范围 尤其是受到取放样品等温度扰动后的迅速恢复能力 有较高的要求 液氮气相 140 1800C vs 液相 1960C 液相冻存 只要冻存耗材能耐受 推荐使用 如使用冻存袋的脐血造血干细胞 气相冻存 在耗材不适合液相的情况下建议使用气相冻存 以避免样本交叉污染 如使用冻存管的脐带间充值干细胞 真假气相液氮罐 国内使用的液氮罐基本都是假气相 液氮容器底部放一部分液氮 上面液氮蒸汽区间储存样本 深冷冰箱 1500C 电制冷 无需加液氮 适合取放样品不频繁的情况 程序降温仪 冻存管 外旋冻存管 vs 内旋冻存管 800C及以上可以使用外旋管 深冷冰箱或更低的温度推荐使用内旋管 冻存管用于液氮液相时需要使用 parafilm密封膜和冻存管套保护 对材质的生物吸附性有更严格的要求 打印码 一维 二维 冻存管 vs 预置码 二维 冻存管 外 旋 内 旋 18 干细胞 组织样本库两种解决方案
