1、北京大学第三医院检验科 张 捷,肝胆疾病实验室检查,Laboratory Examinations Of Diseases Of Liver and Gall,肝脏的主要生理功能,1、代谢功能 (Metabolic Function)2、排泄功能 (Excretion Function)3、解毒功能 (Detoxification Function)4、生成凝血和纤溶因子,纤溶抑制因子,清除活性凝血因子。,肝的生物转化功能,第一相反应: 氧化、还原、水解第二相反应: 结合,肝脏实验室检查的主要目的,了解肝细胞有无损伤及损伤程度,动态观察肝脏功能,了解病情的 变化，治疗效果和预后评估。,协助诊断
2、肝脏疾病（病毒性、肝炎、 肝癌）协助判断病原、病种和病型等。,评价某些病人对一些手 术的耐受力和用药监护。,Examination of enzymes,1、检查反映肝细胞有无损伤的酶如: ALT(GPT) 、AST(GOT).2、检查反映肝细胞合成功能的酶如: 胆碱脂酶.3、检查反映胆汁有无淤积的酶如: ALP、GGT、5-NT.,一、Examination of enzymes,1、血清转氨酶的测定 (serum transaminase)丙氨酸氨基移换酶(Alanine Aminotransferase, ALT )天门冬氨酸氨基移换酶(Asparate Aminotransferase
3、, AST ),Reference Interval,正常人组织中转氨酶含量,U/g 或U/ml,血清ALT的临床意义,(1) 急性病毒性肝炎(2) 慢性病毒性肝炎(3) 自身免疫性肝炎(4) 肝硬化(5) 其他,AST/ALT Ratio,血清中AST/ALT比值约为 1.15/1肝脏中AST/ALT比值约为 2.5/1肝细胞早期损伤血中ALT比AST水平高的原因ALT易于透过肝细胞膜ALT在血中的半寿期比AST要长ALT大部分在细胞浆, AST的60%在细胞浆,Changes of AST/ALT Ratio,（1） 急性肝炎早期轻度肝细胞损伤ALTAST （2） 慢性肝炎活动期：ALTA
4、ST随病情好转, AST/ALT逐渐恢复正常 （3）肝纤维化、肝癌、阻塞性黄疸可有 ASTALT 肝硬化: AST/ALT 1.7-2.0 肝癌: AST/ALT 3.0,ALT与黄疸分离现象,严重肝损伤时,血清Bilirubin逐渐, 而sALT逐渐，表明有大量肝细胞的死亡。,Isoenzymes of AST,肝细胞内AST同工酶(1) AST(c): 60%存在于胞浆中(2) AST(m): 40%存在于线粒体中正常人血中90%是胞浆中的AST。临床意义,注 意 事 项,红细胞中AST和ALT分别为血清含量的15倍与7倍, 故明显溶血标本可干扰测定。,2、乳酸脱氢酶及同工酶,乳酸脱氢酶(
5、Lactate Dehydrogenase, LD and LD isoenzyme) 广泛存在于心、肾、肝、肺等多种组织之中 。,LD and LD Isoenzyme,LD Isoenzyme,正常人血清LD同工酶水平LD2LD1LD3LD4LD5,注 意 事 项因为红细胞内有LD,溶血标本干扰测定。,恶性肿瘤：LD总活力,肝脏疾病 ： LD5,血清LD同工酶检查的临床意义,溶 血 性 贫 血 LD 1、LD 2 ,心 肌 梗 死LD 1 、LD 2 ,肺 梗 塞 LD 3 ,3、碱 性 磷 酸 酶 (Alkaline Phosphatase, ALP),1、 分布ALP广泛存在于多种组织
6、之中如:肝脏、骨骼、肠、胎盘等2、 Reference Interval成年男性 20115 U/L成年女性 20105 U/L,ALP的生理性升高,、妊娠3个月胎盘可产生ALP,妊娠9个月为同龄妇女血清ALP水平的3-4倍。,1、血清ALP水平;1-5岁是成人血清ALP水平的2-4倍;10-18岁是成人血清ALP水平的4-5倍;,临床意义； ALP病理性增高；肝胆管梗阻骨骼系统疾病,ALP Isoenzyme,临床意义,(1) 胆道梗阻时,原发或转移性肝癌时血GGT。急、慢性酒精性肝炎,乙醇诱导微粒体生物 转化系统,使血GGT。 (3) 系统性红斑狼疮、单核细胞增多症等患者 血GGT。 (4
7、) 某些药物如抗癫痫药、镇静药等可使血GGT,停药后可恢复正常。,4、-谷氨酰转肽酶 ( -glutamyl transpeptidase, GGT),(5)肝炎,急性肝炎:早期血GGT, 恢复期比ALT下降慢, 可为急性肝炎恢复期唯一的血清酶学指标, 可提示急性肝炎尚没有痊愈。慢性肝炎: 如血清GGT有持续性一般表示病情不稳或恶化。,5、假 性 胆 碱 脂 酶 （Pseudocholinesterase, PCHE ）,机体中胆碱脂酶分为二类真性胆碱脂酶(ACHE，乙酰胆碱脂酶)存在于RBC、肺、脑、交感神经节主要作用：分解乙酰胆碱假性胆碱脂酶(PCHE ,丁酰胆碱脂酶)分布在血中，除可作用
8、乙酰胆碱外，可作用胆碱类化合物,PCHE是一种糖蛋白，由肝脏合成。婴幼儿血PCHE水平较成人为低 ,参考值范围因方法不同而有所差异。注 意 事 项标本不能溶血, 避免红细胞内CHE干扰测定。,临 床 意 义,严重肝病时，血PCHE与肝病变程度成正比。血中PCHE水平持续 提示预后不良。遗传性PCHE病、营养不良、有机磷中毒时也可有血PCHE。,慢性肝炎、肝硬化、上消化道出血时-岩藻糖苷酶水平也可轻度。,6、-岩藻糖苷酶,分布于人体组织细胞、血液和体液 中，参与机体的糖蛋白和糖脂代谢。,与AFP联合检查可提高原发性肝癌的诊断率。,动态观察肝癌患者病情变化及治疗效果监测。,ALT、GGT和PCHE
9、的检查可作为肝病的实验室酶学过筛试验有文献报道三种试验联合应用，其肝病检查阳性率可达99%。,ALT： 反映有无肝细胞损伤GGT： 反映有无胆汁淤积PCHE： 反映肝脏蛋白质合成功能,1、 来 源,(1)衰老或死亡的RBC代谢产生： (网状内皮系统破坏释放入血)为主 (2)骨髓无效造血: 少部分 (3)其它: 如肌红蛋白、过氧化物酶等(很少),二、 Bilirubin,T-Bili,结合Bili,非结合Bili,蛋白结合 Bili,蛋白非结合 Bili,与白蛋白 dBc mBc 共价键,葡萄糖醛酸,HPLC,T-Bili,间接Bili,直接Bili,蛋白非结合 Bili,蛋白结合 Bili,J
10、-G,HPLC,2、胆红素的分类,3、胆 红 素 性 质,4、Reference Interval,重氮试剂测定血清胆红素,总胆红素( Total Bilirubin, TB)间接胆红素 = TB - 直接胆红素,5、临 床 意 义,临床上常见黄疸类型的鉴别 (血）,临床常见黄疸类型鉴别（尿）,临 床 意 义,新生儿生理性黄疸:出生在24h后至一周内血清总胆红素12mg/dl,直接胆红素1.0mg/dl。,原因 (1) RBC破坏过多(2) 新生儿葡萄糖醛酸转移酶不足(3) 新生儿肝细胞中Y蛋白不足(4) 新生儿的肠肝循环增加,临 床 意 义,遗传性黄疸的疾病Grigler-Najjar 、G
11、ilber综合症患者由于葡萄糖醛酸转移酶缺乏或减少, 血清总、直胆红素结果雷同Rotor 、Dubin-Johnson综合症患者由于肝细胞向毛细胆管排泄胆红素异常，血清总、直胆红素结果雷同,溶血性黄疸。,梗阻性黄疸。,三 、血清总胆汁酸 (Total Bile Acid),肝细胞胆固醇 初级胆汁酸 次级胆汁酸 体外胆酸（CA) 脱氧胆酸(DCA) 鹅脱氧胆酸（CDCA) 石胆酸(LCA)熊脱氧胆酸（UDCA),肠道,细菌,肠-肝循环,临 床 意 义,(1)急性肝炎、慢性活动性肝炎：肝内毛细胆管损伤，胆汁酸进入血液, 总胆汁酸水平。(2) 胆汁淤积综合症肝内外胆汁淤积，胆汁排泌障碍，总胆汁酸水平
12、。,Reference Interal总胆汁酸10 mol/L,四、血浆蛋白质功能,维持血液的正常胶体渗透压和pH值运输多种物质：如维生素、脂肪、金属、微量元素、激素、药物免疫功能：抗体和补体凝血和纤溶营养,1、血清蛋白测定,总蛋白 (Total protein, TP)白蛋白 (Albumin, A)球蛋白 (Globulin, G)白蛋白/球蛋白比值 (A/G),Reference Interval,血清球蛋白(G) = TP - A,2、血清蛋白电泳 serum electrophoresis,(1) 原理:各种蛋白质所带电荷、等电点不同，蛋白质分子大小不同，在电场中的迁移率不同。根据这
13、一原理可将血清中的不同蛋白质分开。,Reference Interval ( 醋 酸 纤 维 膜 法 ),(琼 脂 糖 凝 胶 电 泳),%,48 64,2.55.4,8.314,8.715,12 15,血清白蛋白减少， 球蛋白增加是肝病血清蛋白电泳的特征。,恶 性 肿 瘤1、2 Alb ,肝 病 Alb 、1、 2、 -globulin -globulin ,肝病的蛋白电泳图,Alb or 1、2 、 形成 - 桥(IgA or IgM) A/G倒置,1、多发性骨髓瘤2、巨球蛋白血症3、良性单克隆免疫球蛋白增生症,3、血清前白蛋白 （ Serum Prealbumin, PA),由肝细胞合成
14、，分子量6万KD，电泳时在白蛋白前。其半寿期仅为1.9天。 PA为一载体蛋白，可与T3、T4、视黄醇结合。 血清PA水平可反映肝脏的合成蛋白功能,因半寿期短，比白蛋白和转铁蛋白更为敏感。,五、肝纤维化检查,肝纤维化是肝硬化前期的必经阶段，其病理改变是肝脏中肝细胞数量和所占空间减少，间质细胞和细胞外基质含量增加。检查 血清型前胶原胶原层粘连蛋白透明质酸,1、型前胶原、胶原,肝及间质细胞产生的型前胶原,血中P-P,反映肝细胞胶原合成。胶原是基底膜的主要成分，在肝纤维化时，胶原的合成量。参考值：140ng/ml（EIA）,2、层粘连蛋白 (Laminin,LN),LN又称板层素，存在于组织基底膜，是
15、非胶原性糖蛋白，它与胶原均是构成基底膜的主要成分。3、透明质酸 (Hyaluronic acid,HA)HA由成纤维细胞和间质细胞合成经淋巴入血, HA主要在肝脏代谢，血HA水平变化可反映肝脏病变和肝纤维化情况。,HBV肝炎免疫学检测HBV肝炎核酸检测血HBV-DNA定量检测(杂交捕获法、定量PCR法 ),HBsAg,HBcAg,HbeAg,DNA,血清中不同HBV标志物的临床意义HBsAg anti-Hbs anti-HBc HBeAg anti-Hbe HBV/DNA 意义+ - + + - + 病毒活动 + - + - +/- + 病毒活动 + - + - +/- - 正在消退的急性肝炎
16、健康携带者 - + + - +/- - 自然感染后的免疫 - + - - - - 疫苗接种后的免疫,HCV 的 检 测方法:(1) HCV抗体(2) HCV-RNA (定量RT-PCR或探针法)报道window of HCV-RNA after infection 11-13 days (detect HCV-RNA)13-14 days (detect HCV-Ag )70 days (3代） (detect HCV-Ab),临床一般选择原则,健康体检ALT、AST : 有无肝细胞损伤HbsAg: 有无乙型肝炎病毒感染进一步: 可检查血清胆红素、 血清蛋白等。一般肝功能检查:GGT、血清蛋白
17、、LD、ALP 、PCHE等,肝 炎,(1) 胆红素（TB/DB): 黄疸或非黄疸、尿胆原/尿胆红素 (2) ALT、AST：了解肝细胞损伤情况 (3) 血清-GT、LD、ALP 进一步了解肝细胞损伤情况和有无胆汁淤积。 (4) 肝炎相关抗原抗体的免疫学检查判断为哪种类型的肝炎。 (5) 血清自身抗体的检查，判断是否自身免疫性肝炎。,原发性肝细胞癌检查血清AFP 和 CEA血清-岩藻糖苷酶、GGT、ALP等肝 纤 维 化血清P-P、胶原、LA、HA等,1、肝细胞早期轻度损伤时，血清中哪种酶最敏感?A ASTB ALTC GGTD LDE ALP2、红细胞中的ALT是血清中含量的多少倍？A 7倍
18、B 10倍C 12倍D 15倍E 20倍,3、AFP 500ng/ml，CEA 8ng/ml时, 对哪种疾病最有诊断意义?A 慢性肝炎B 原发性肝细胞癌C 肝硬化D 慢性活动性肝炎E 肝转移癌4、溶血性黄疸，胆红素代谢的特点是A 血清结合胆红素明显升高B 尿胆红素明显阳性C 尿胆原减少D 血清非结合胆红素明显升高E 尿胆素减少,5、男性，慢性乙型肝炎病史10年，近来乏力、牙龈出血、纳差、腹胀加重、黄疸、肝区隐痛，皮肤上可见蜘蛛痣，肝脾肿大，且有腹水征。实验室检查AFP 25ug/L、ALT 216U/L。（1） 此病人最可能的诊断是A 原发性肝癌B 慢性肝炎C 溶血性黄疸D 肝细胞性黄疸E 肝硬化,思考题： 1、肝脏酶学检测项目及临床意义 2、肝脏蛋白质检测项目及临床意义 3、肝硬化检测项目 4、黄疸的鉴别诊断参考书： 1、临床生物化学和生物化学检验教材 2、内科学教材 3、Lab.Test Handbook (DAVID S.JACOBS),61,Thanks,
