1、疗提供依据 。根据本试验结果 ， 金银花 、蒲公英 、黄芩 、紫花地丁 、瓜蒌 、鱼腥草对现地引起奶牛乳房炎的金黄色葡萄球菌 、无乳链球菌 、大肠杆菌都有较强的抑菌作用 。参考文献 : 1 张国锋 中草药治疗奶牛乳房炎 J 中兽医医药杂志 ， 2004( 3) : 43 2 王新 ， 张秀英 中药治疗奶牛乳房炎的研究现状与展望 J 中国兽药杂志 ， 2004， 38( 2) : 43 46 3 王广彬 ， 刘耀伟 ， 王文魁 中草药治疗奶牛乳房炎的研究概况 J 湖北畜牧兽医 ， 2008 ( 7) : 21 22 4 岳春旺 ， 杜仕军 ， 孙茂红 ， 等 中草药治疗奶牛乳房炎的观察 J 中国
2、奶牛 ， 2001 ( 6) : 38 39 5 古春芝 ， 张连成 用中草药治疗奶牛乳房炎好处多 J 奶牛杂志 ， 2009 ( 12) : 69 71 6 苑丽 ， 胡功政 十一种中草药对常见病原菌的体外抑菌试验 J 兽药与饲料添加剂 ， 2001， 6( 1) : 20 7 付秀花 ， 王恬 中草药对奶牛乳房炎病原菌的体外抑菌试验 J 动物科学与动物医学 ， 2002， 19( 5) : 16 19 8 严作廷 ， 李宏胜 ， 郁杰 ， 等 中草药防治奶牛乳房炎的研究概况 J 动物医学进展 ， 2003， 24( 2) : 13 14， 30 9 武瑞 ， 连学昭 ， 富艳玲 ， 等 防
3、治奶牛乳房炎中药复方的抗炎作用及毒性作用研究 J 中国奶牛 ， 2006 ( 9) : 11 15 10 徐京平 ， 许文兵 ， 徐雷 中草药防治奶牛乳房炎 J 中兽医学杂志 ， 2010 ( 1) : 30( 011)收稿日期 : 2015 04 26; 修回日期 : 2015 05 16作者简介 : 胡梁及 ( 1991 ) ， 男 ， 硕士研究生 ， 研究方向为中药新药开发 ， hljsuperman sina com通信作者 : 朱盛山 ( 1956 ) ， 男 ， 教授 ， 本科 ， 博士生导师 ， 研究方向为中药新药开发 ， zhush3126 com24种中草药对鱼类车轮虫杀灭作
4、用的研究胡梁及 ， 张雄飞 ， 徐丰都 ， 彭 亮 ， 朱盛山( 广东药学院 中药开发研究所 ， 广州 510006)中图分类号 : S8415; 932 文献标识码 : B 文章编号 : 1004 7034( 2016) 03 0208 03车轮虫 ( Trichodina) 引起的鱼类寄生虫病一直是水产养殖中的重要病害之一 ， 随着养殖密度的扩大导致水质恶劣 、车轮虫繁殖加快 ， 养殖动物抵抗力下降 ，致使车轮虫病爆发频率大 ， 对渔业造成的经济损失较大 。目前 ， 对该病的防治主要是硫酸铜 + 硫酸亚铁合剂 ( 52) ( 简称铜铁合剂 ) 、甲醛等药物 ， 或多或少地存在着抗药性 、环
5、境污染 、药物残留 、毒副作用大等问题 ， 在实际应用中局限性较大 1。中草药具有绿色天然 、无公害的特点 ， 能满足人们对 “绿色水产品 ”的需求 ， 受到越来越多的关注 ， 是研发无公害渔药的有利方向 。但是 ， 该领域的研究国外尚缺乏相关报道 ，国内主要是有关临床经验的资料报道 ， 对杀虫中草药的系统研究报道很少 。本试验对有临床经验资料报道的中草药和市售常见杀虫中草药制剂进行系统研究 ， 筛选出高效 、低毒的杀虫中草药 ， 旨在为进一步开发无公害水产杀虫药物提供科学参考 。1 材料与方法11 药材中草药夹竹桃采自野外 ， 贯众 、鸦胆子 、蛇床子等19 种中草药购自药材市场 ， 分别干
6、燥粉碎后备用 。中草药经广东药学院中药鉴定科室鉴定 。鱼倍健 、百部贯众散 、雷丸槟榔散和车轮净 ( 主要成分是印楝素 、苦参 ) 4 种杀虫中草药制剂 ， 均购自广州兽药店 。参试药材名录见表 1。12 试验动物挑选患有车轮虫病的规格一致 体重为 ( 5 1) g 的金鼓鱼 ( Scatophagus argus) 500 尾 ， 备用 。患车轮虫病金鼓鱼的鉴别特征为 : 病鱼鱼鳃上布满车轮虫 ， 鳃丝通常为暗灰色 ， 有时病鱼急剧侧游 。车轮虫大量寄生时 ， 由于虫体的刺激 ， 引起组织发炎 ， 分泌大量黏液 ， 在体部 、鳃上形成一层黏液层 ， 鳃上皮增生 ， 严重时甚至会造成组织病变
7、2。患鱼收集自阳江市阳东县雅韶镇绿色无公害养殖场 。13 中草药提取物的制备分别称取各中草药样品 100 g， 粉碎 ， 过 50 60目筛 ， 使用 8 10 倍 95% 乙醇加热回流提取 3 次 ， 每次 2 h， 合 并 提 取 液 ， 过 滤 ， 减压浓缩成浓度为05 g/mL的流浸膏 ， 置 4 冰箱中保存 ， 备用 。14 杀虫活性的测定杀虫活性的测定参照参考文献 3 中的方法 。准备 15 个 20 L 的塑料桶 ， 分别盛有 10 L 原池塘水 ，8022016( 03) : 208 210DOI:10.13881/ki.hljxmsy.2016.0418表 1 参试药材名录药
8、材名称 所属科名 供试部位贯众 鳞毛蕨科 根茎鸦胆子 苦木科 成熟果实蛇床子 伞形科 成熟果实吴茱萸 芸香科 成熟果实两面针 芸香科 根黄姜 姜科 根茎洋金花 茄科 花木通 木通科 茎苦参 豆科 根土荆芥 藜科 全草石榴皮 石榴科 果皮青蒿 菊科 地上部分土荆皮 松杉目 根皮槟榔 棕搁科 成熟果实苦楝皮 楝科 树皮 、根皮黄荆 马鞭草科 叶百部 百合科 根仙鹤草 蔷薇科 地上部分常山 虎耳草科 根夹竹桃 夹竹桃科 叶溶氧量为 62 78 g/mL， 水温为 ( 240 1 0) ， 分别投放感染有车轮虫的金鼓鱼 10 尾 。将参试中草药提取物浓度控制在 1 000 mg/L 并按照一定浓度梯度
9、分别进行筛选 ， 市售杀虫药的给药剂量参照说明书 ，毒性试验时采用说明书给药剂量的 5 倍和 10 倍给药 ， 试验重复 3 次 ， 并设置空白对照组 。试验期间 ，试验鱼出现中毒现象时 ， 及时将其捞出放入清水中并记录 。在 48 小时时 ， 取鳃制片 、镜检 ， 观察记录各组药物的不同浓度对车轮虫的杀灭情况 ， 计算各组供试药物的杀虫率和试验鱼的死亡率 。本试验规定 ， 杀虫率在 20%以下的药物浓度为无效浓度 。杀虫率和死亡率的计算公式 : 杀虫率 = ( 对照组的车轮虫平均存活数量 试验组的车轮虫平均存活数量 ) /对照组的车轮虫平均存活数量 100%; 死亡率 = ( 投放的鱼数量
10、镜检时鱼存活数量 ) /投放的鱼数量 100%。15 杀虫活性的评价在设定的杀虫时间取供试鱼鳃制片 、镜检观察并统计车轮虫从鳃部脱落的情况 ， 如果没有脱落 ， 观察是否死亡 ， 虫体在 1 2 min 不来回滑动者视为死亡 ，若鳃部无虫或虫已死亡均确定杀虫率为 100%; 如果部分脱落 ， 统计每尾鱼鳃部存活寄生虫的数量 ， 计算平均值 ， 并与空白对照组进行对比 ， 计算杀虫率 。2 结果与分析在 48 小时时统计各浓度梯度下车轮虫平均存活数量和空白对照组的车轮虫平均存活数量 ， 再按照公式计算出该供试药物在该浓度下的杀虫率 ; 统计各试验组鱼的存活数量 ， 并计算鱼死亡率 。不同供试药物
11、对车轮虫的杀灭作用及试验鱼中毒情况的统计结果见表 2( 按照药物的杀虫率由高到低排序 ) 。表 2 48 小时时供试药物对车轮虫杀灭作用及试验鱼中毒情况的统计结果供试药物车轮虫 试验鱼有效浓度 /( mgL1)杀虫率 /%中毒剂量 /( mgL1)鱼死亡率 /%鱼倍健 20 100 200 0木通 200 90 500 30蛇床子 200 75 200 100贯众 200 70 200 100黄姜 300 60 600 50两面针 100 50 200 80吴茱萸 300 45 500 40苦参 300 45 0 0苦楝皮 400 45 800 60鸦胆子 600 45 0 0洋金花 400
12、40 600 50夹竹桃 200 40 200 20石榴皮 100 35 100 40土荆芥 200 30 200 50土荆皮 100 30 300 30青蒿 600 30 0 0槟榔 100 20 100 100百部 600 20 0 0仙鹤草 800 20 0 0百部贯众散 1 0 10 0雷丸槟榔散 02 0 2 0车轮净 02 0 2 30黄荆 0 0常山 0 0空白对照 0 0注 : 表示无意义 。由表 2 可知 ， 48 小时时鱼倍健杀虫浓度为20 mg/L 时 ， 杀虫率为 100%， 且 10 倍杀虫浓度剂量未出现鱼中毒死亡现象 ; 其次木通 、蛇床子和贯众的杀虫浓度为 200
13、 mg/L 时 ， 杀虫率分别为 90%、75%和 70%; 黄姜的杀虫浓度为 300 mg/L 时 ， 杀虫率为60%; 吴茱萸 、两面针 、苦楝 、鸦胆子 、洋金花 、夹竹桃 、苦参 、石榴皮 、土荆芥 、土荆皮 、青蒿 、槟榔 、百部 、仙鹤草的杀虫率在 20% 50% 之间 ; 在测试浓度范围内 ，百部贯众散 、雷丸槟榔散 、黄荆 、常山 、车轮净均没有任何的杀虫活性 。在蛇床子和贯众杀虫浓度为200 mg/L、槟榔浓度为 100 mg/L 时 ， 试验鱼的死亡率均为 100%; 木通 、黄姜 、两面针 、吴茱萸 、苦楝皮 、洋金花 、夹竹桃 、石榴皮 、土荆芥 、土荆皮 、车轮净的试
14、验浓度在 200 800 mg/L 之间时 ， 试验鱼均出现了不同程度的死亡 ; 在试验范围内 ， 鱼倍健 、苦参 、鸦胆子 、青蒿 、百部 、仙鹤草 、百部贯众散 、雷丸槟榔散均未出现90203， 2016中毒现象 。3 讨论目前 ， 针对车轮虫病防治药物方面的研究较少 ，市场上也缺乏有效无公害的杀虫药物 ， 兽药国家标准 4收录的唯一用于杀灭车轮虫的药物是铜铁合剂 ， 长期使用存在着抗药性增大 、重金属富集 、环境污染 、毒副作用大等不利因素 ， 从而导致渔药滥用的现象加剧 。目前 ， 化学渔药在我国水产养殖中仍处于主导地位 ， 化学渔药在杀灭鱼类寄生虫的同时 ， 也杀死了水中的大量微生物
15、和藻类等 ， 加之检测手段及药物残留标准的日益严苛 ， 化学类药物的使用受到了极大的限制 。与化学药物相比 ， 中草药是理想的天然环保药物 ， 对鱼病的疗效较显著 、性状稳定 ， 对水质影响小 ， 从而保证了水产养殖业的健康发展 ， 保证了人们的食用安全性 ， 将这一优势引入到车轮虫病的防治是一个较好的思路 。本试验结果表明 ， 绝大多数中草药提取物或制剂没有杀灭车轮虫的作用 ， 但笔者发现在市售的渔药中 ， 商品标示的中草药杀虫药物的使用量一般不超过1 mg/L， 且在使用中部分药物确实具有一定的效果 ，因此不排除这些商品渔药用中草药提取物作为掩盖而实际上主要是使用化学药物的可能 ， 这还需
16、进一步研究 ， 同时也应引起管理部门的高度重视 。本试验对 20 种中草药提取物和 4 种市售中草药制剂杀灭车轮虫作用的研究结果显示 ， 18 种中草药提取物和 1 种市售中草药制剂具有杀灭车轮虫活性 。在中草药制剂鱼倍健的浓度为 20 mg/L 时 ， 杀虫率即可达到 100%， 且 10 倍杀虫浓度剂量未出现鱼中毒死亡现象 ， 因此值得进一步推广 ; 木通在 48 小时时 ，最高杀虫率为 90%， 但是 200 mg/L 的用量较大 ， 从经济角度考虑 ， 不适合直接用于渔药生产 ; 蛇床子和贯众的杀虫率虽然能达到 70% 以上 ， 但对鱼的中毒剂量与杀虫剂量很接近 ， 因此需进行复方配伍
17、 ， 以降低对水生动物的毒性 ; 由于黄姜 、两面针 、吴茱萸 、苦楝皮 、鸦胆子 、洋金花 、夹竹桃 、苦参 、石榴皮 、土荆芥 、土荆皮 、槟榔 、青蒿 、百部 、仙鹤草 、黄荆 、常山 、百部贯众散 、雷丸槟榔散 、车轮净的杀虫活性较低 ， 在杀灭车轮虫药物开发上不具有产业化价值 。参考文献 : 1 李鸶鸶 ， 张洪玉 ， 王佳迪 ， 等 车轮虫病防治药物及安全性研究进展 J 上海海洋大学学报 ， 2014， 23( 4) : 546 555 2 于莎莎 浙江宁波地区部分海 、淡水经济鱼类外寄生车轮虫的研究 D 重庆 : 重庆师范大学 ， 2012 3 王高学 ， 徐钰 ， 王建华 ，
18、等 29 种天然植物提取物对指环虫杀灭作用的研究 J 淡水渔业 ， 2006， 36( 3) : 3 8 4 中国兽药典委员会 兽药国家标准 ( 化学药品 、中药卷 ) 第一册 M 北京 : 化学工业出版社 ， 2013 ( 011)收稿日期 : 2015 04 10; 修回日期 : 2015 05 05作者简介 : 李金莲 ( 1974 ) ， 女 ( 藏族 ) ， 畜牧师 ， 专科 ， 研究方向为畜牧生产 ，檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼
19、檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼檼殥殥殥殥lijinlian1974126 com抗菌肽对仔猪血清猪瘟抗体水平、免疫球蛋白含量及细胞因子含量的影响李金莲( 青海省海南州共和县倒趟河镇兽医站 ， 青海 海南州 813000)中图分类号 : S8283; S8525 文献标识码 : B 文章编号 : 1004 7034( 2016) 03 0210 03随着我国养猪业的规模化 、集约化发展 ， 断奶仔猪病毒病的发生日益增加 ， 究其原因可能与断奶仔猪免疫功能低下密切相关 。抗菌肽 ( antibacterial pep-tides， AMP) 是从生物体内提取和纯化出来的一类具有生物活性的小分子多肽
20、 ， 具有抗病毒 、抗细菌 、抗肿瘤 、抗寄生虫 、促进生长发育 、提供免疫力等广泛的生物学功能 1 2， 有望成为无污染 、无残留 、新型绿色的饲料添加剂 3， 彻底解决抗生素作为饲料添加剂产生的药物残留和耐药性 。本研究在断奶仔猪基础日粮中添加不同水平的抗菌肽 ， 通过检测猪瘟抗体水平 、免疫球蛋白含量 、细胞因子含量等指标 ， 全面研究探讨抗菌肽对提高断奶仔猪免疫功能的影响 ， 以期为抗菌肽在养猪生产中的产业化应用提供合理的科学依据和实践参考 。1 材料21 日龄健康断奶仔猪 ， 由海北富康养殖场提供 ;抗菌肽 ， 购自瑞鑫百奥生物科技 ( 深圳 ) 有限公司 ; 猪瘟活疫苗 ( ST 传代细胞源 ) ， 购自广东永顺生物制药有限公司 ; 猪瘟抗体正向间接血凝 ( IHA) 检测试剂盒 ， 购自中国农业科学院兰州兽医研究所 ; 猪免疫球蛋白 G( IgG) 、免疫球蛋白 A( IgA) 、免疫球蛋白 M( IgM) ELISA 检测试剂盒和猪白细胞介素 2( IL 2) 、白细胞介素 4( IL 4) 、干扰素 ( IFN )0122016( 03) : 210 212DOI:10.13881/ki.hljxmsy.2016.0419
