1、2.3.2.4 土壤有机氮组分的测定方法(Bremner 法58 )试剂准备:1、正辛醇(AR)2、6M盐酸:浓盐酸490ml用蒸馏水定容至1L。3、1MNaOH :40gNaOH用蒸馏水定容至1L。4、5MNaOH:200g NaOH 用蒸馏水定容至 1L。5、混合催化剂:K 2SO4:CuSO4:Se=100 :10 :1,即100g K 2SO4、 10g CuSO4.5H2O 和1gSe粉混合研磨,过80目筛充分混匀(注意带口罩),储存具塞瓶中。6、3.5%的MgO,称取MgO3.5g定容至100ml。7、磷酸硼砂缓冲液(pH11.2)Place 100 g. of Na3P04 .
2、12H20, 25g. of Na2B407l0H20, and about 900 ml. of water in a I-liter volumetricflask, and shake the flask until the phosphate and borate aredissolved. Dilute the solution to 1 liter, and store it in a tightly stopperedbottle.8、柠檬酸 (C6H8O7. H20) 研磨置于光口瓶中。9、水合茚三酮 (研钵磨碎,置于广口瓶中)10、硼酸硼砂缓冲溶液(1) 酸解液的制备:称取约
3、含10mgN 的土壤样品(过100 目筛)放入水解瓶中,加2滴正辛醇和6 mol/L HCl 20ml, 摇动瓶子使土壤样品和试剂充分混合。在电热板上水解回流12 小时,温度始终控制在1203。水解结束后,趁热过滤入100ml 杯中,多次洗涤水解瓶和土壤残渣,过滤液总体积不应超过60ml。过滤液用1 molNaOH 和5 mol NaOH 调至pH 为2 左右,再用pH 计指示,逐滴小心加入1 molNaOH, 边加边搅,直至pH 值为6.50.3,定容至100ml, 放入冰箱备用。另外,水解液空白用NaOH 调至pH 为6.50.3,定容至100ml。(2) 酸解总氮:吸取酸解液5ml 置于
4、凯氏瓶中,加入0.5g 混合催化剂和2ml 浓硫酸,再硝化炉上硝煮1 小时,直至硝化液呈清亮后,用凯氏定氮仪测定。(3) 酸解性氨态氮:吸取酸解液10ml,加入2.5ml 3.5%的MgO,在凯氏定氮仪上进行测定。(4) 酸解性氨态氮和氨基糖氮的测定:吸取酸解液10ml,加入磷酸硼砂缓冲液(pH11.2)10ml ,在凯氏定氮仪上进行测定。(5) 酸解性氨基酸态氮的测定:吸取酸解液10 ml 放入50 ml 的小烧杯中,加入2 ml 0.5mol NaOH, 在100水浴下加热直至溶液体积浓缩至 2-3ml,冷却后加入1g 柠檬酸和0.2g 水合茚三酮,再在 100水浴下10min,取下定容至50ml, 吸取该溶液10ml, 加20ml 硼酸硼砂缓冲溶液和2ml 5mol NaOH 蒸馏。(6) 非酸水解氮为土壤全氮与酸水解氮总量的差值;(7) 全氮用凯氏法消煮,自动定氮仪测定。参考文献Bremner J M. Organic forms of nitrogen / Black C A, ed. Methods of Soil Analysis. Madison: American Society of Agronomy, 1965:1238-1255.